邢會(huì)琴， 馬建倉， 許永鋒， 李萬蒼

（1.河西學(xué)院農(nóng)學(xué)系，張掖 734000； 2.甘肅省張掖市玉米原種場，734000；3.甘肅省張掖市玉源種業(yè)有限責(zé)任公司，734000； 4.甘肅省張掖市植保植檢站，734000）

防治玉米頂腐病和黑粉病藥劑篩選

邢會(huì)琴1， 馬建倉2，3， 許永鋒4， 李萬蒼3

（1.河西學(xué)院農(nóng)學(xué)系，張掖 734000； 2.甘肅省張掖市玉米原種場，734000；3.甘肅省張掖市玉源種業(yè)有限責(zé)任公司，734000； 4.甘肅省張掖市植保植檢站，734000）

采用10種殺菌劑對(duì)玉米頂腐病菌室內(nèi)測(cè)定結(jié)果表明，80%多·福·福鋅可濕性粉劑、70%多·福可濕性粉劑、97%多菌靈可濕性粉劑和98%烯唑醇可濕性粉劑抑菌效果最好，而且持效期較長。以97%多菌靈可濕性粉劑和98%烯唑醇可濕性粉劑按3∶1或4∶1的比例進(jìn)行復(fù)配，抑菌效果達(dá)到了其各自單用的抑菌效果。經(jīng)安全性測(cè)定，用98%烯唑醇可濕性粉劑進(jìn)行種子包衣在低溫條件下對(duì)玉米出苗和苗期生長有一定影響，97%多菌靈可濕性粉劑則無影響。田間防治試驗(yàn)表明，97%多菌靈可濕性粉劑或97%多菌靈可濕性粉劑與98%烯唑醇可濕性粉劑復(fù)配對(duì)玉米頂腐病和瘤黑粉病均有一定防效。在玉米4～8葉和8～12葉期時(shí)，以97%多菌靈可濕性粉劑20g＋有機(jī)硅5mL／666.7m2和97%多菌靈可濕性粉劑25g＋98%烯唑醇可濕性粉劑5g＋有機(jī)硅7mL／666.7m2用量分別噴灑，對(duì)頂腐病的防治效果達(dá)90%左右，并可兼治瘤黑粉病，防治效果達(dá)70%左右。

玉米頂腐??； 瘤黑粉?。?殺菌劑； 有機(jī)硅； 防治

由于甘肅省河西走廊玉米制種面積的擴(kuò)大，且許多自交系對(duì)病害抗性水平低，以及多年玉米連作和耕作質(zhì)量下降，使威脅玉米生產(chǎn)的兩大病害頂腐?。跢usarium subglutinans（Wr.＆ Reink.）Nelson，Touss＆ Marasas）］［1－8］和 瘤 黑 粉 病 ［Ustilago maydis（DC.）Corda］日趨嚴(yán)重［8］。自2006年以后，頂腐病在制種生產(chǎn)中呈日趨加重的趨勢(shì)，田間一般發(fā)病率為10%～35%，嚴(yán)重的達(dá)70%以上。頂腐病發(fā)生后，造成葉片腐爛或邊緣產(chǎn)生缺刻，為后續(xù)玉米瘤黑粉病病菌提供了侵染傷口。一旦感病自交系和有利于病害發(fā)生的環(huán)境條件相遇，兩種病害在同一個(gè)育種材料上共同發(fā)生，可引起種子生產(chǎn)的極大損失。

國內(nèi)外對(duì)玉米病害的防治通常以單病單治為主，而且藥劑防治是農(nóng)作物病蟲害防治中重要的措施之一，但在總體上又存在農(nóng)藥使用量高、有效利用率低和防效不高的問題，在具體實(shí)踐中也出現(xiàn)室內(nèi)離體條件下抑菌效果高，而田間噴灑防治時(shí)效果低甚至無效果等問題。分析原因，一是農(nóng)藥在噴霧時(shí)靶標(biāo)針對(duì)性差：由于禾本科植物組織表面的蠟質(zhì)層和農(nóng)藥本身的問題，使霧滴在葉片表面不能形成良好的濕潤分布，霧滴在葉片表面常常形成水滴滾落地面；二是噴灑農(nóng)藥季節(jié)常受高溫蒸發(fā)和多雨雨淋等因素的影響，造成農(nóng)藥有效成分劑量在噴霧過程中傳遞效率降低，達(dá)不到預(yù)期的防治效果。本研究針對(duì)近年在甘肅制種基地的病害問題，篩選能夠兼治玉米頂腐病和瘤黑粉病的化學(xué)農(nóng)藥，并選擇有機(jī)硅作為助劑，降低藥液在植物表面的張力，提高農(nóng)藥霧滴在靶標(biāo)表面的潤濕能力和鋪展性能［9］，提高農(nóng)藥使用效率、降低農(nóng)藥投放量。研究旨在為合理用藥提供科學(xué)依據(jù)，達(dá)到“一防治多病”的目的。

1 材料與方法

1.1 供試藥劑

供試農(nóng)藥：80%多·?！じｄ\可濕性粉劑（河北冠龍農(nóng)業(yè)有限公司），25%多·錳鋅可濕性粉劑（四川國光農(nóng)化有限公司），70%多·?？蓾裥苑蹌ㄉ綎|溪得利化工有限公司），70%代森錳鋅可濕性粉劑（江蘇新沂新泰化工有限公司），15%三唑酮可濕性粉劑（江蘇建農(nóng)農(nóng)藥化工有限公司），50%福美雙可濕性粉劑（石家莊市綠豐化工有限公司），97%多菌靈可濕性粉劑（石家莊濟(jì)泰三沐農(nóng)化有限公司），98%烯唑醇可濕性粉劑（深圳市鵬基生物技術(shù)有限公司），50%對(duì)二甲基氨基苯重氮磺酸鈉可濕性粉劑（山東鑫星農(nóng)藥有限責(zé)任公司），98%惡霉靈原藥（濰坊天達(dá)植保有限公司）。

供試種衣劑：20%克·福懸浮種衣劑（河北省北農(nóng)海利涿州種衣劑有限公司），7.5%克·戊醇玉米種衣劑（吉林省公主嶺市八達(dá)農(nóng)化有限公司）。

供試表面活性劑：有機(jī)硅（廣東省農(nóng)資生產(chǎn)資料總公司）。

1.2 供試病原菌

玉米頂腐病菌（Fusarium subglutinans），從張掖市平原堡鎮(zhèn)制種玉米田采集分離純化所得；玉米瘤黑粉菌（Ustilago maydis），采自田間病株。

1.3 供試品種

供試品種為玉米自交系‘鄭58’，由張掖市玉米原種場提供。

1.4 對(duì)玉米頂腐病菌抑菌試驗(yàn)

1.4.1病菌培養(yǎng)

將分離純化并經(jīng)致病性測(cè)定確認(rèn)的頂腐病原菌制成菌懸液，接入高壓滅菌的馬鈴薯蔗糖瓊脂（PSA）平板培養(yǎng)基，置28℃下培養(yǎng)6d，在菌絲均勻布滿培養(yǎng)皿時(shí)備用。

1.4.2 藥劑種類篩選

采用水平擴(kuò)散法［10］，將頂腐病菌孢子懸浮液加入冷卻至45℃左右的滅菌PSA培養(yǎng)基中，搖勻后制成含菌平板，待凝固后備用。

所有藥品按使用最大濃度配制成藥液，用無菌鑷子夾取消毒的濾紙片（6mm）分別置于盛有不同藥液的燒杯中浸泡數(shù)分鐘，然后鑷取濾紙片在燒杯壁上停留片刻，去除多余藥液，放在含菌培養(yǎng)基中央，置于28℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，每種藥3個(gè)重復(fù)。培養(yǎng)3d后，用十字交叉法定期測(cè)量菌落直徑大小。

1.4.3 有效藥劑的最低完全抑菌濃度（MIC）測(cè)定

采用含毒介質(zhì)紙片孢子法［11］，將選定的有效藥劑配成不同濃度的藥液后分別與滅菌PSA培養(yǎng)基配制成含毒平板（培養(yǎng)皿大小75cm），使最終濃度為0、1、2、5、10mg／mL。經(jīng)干熱滅菌直徑6mm 的普通濾紙片在孢子懸浮液（2×105個(gè)／mL）中浸泡，取出與瓶壁接觸去余液，貼于培養(yǎng)基表面，每皿3片，28℃培養(yǎng)72h后測(cè)量其最低完全抑菌濃度（MIC）及菌落大小。

1.4.4 毒力測(cè)定

采用上述方法，在MIC之下以2倍稀釋法設(shè)有效藥劑及其復(fù)配劑2、1、0.5、0.25、0.125、0.062 5mg／mL 6個(gè)濃度，每處理濃度1皿，每皿3個(gè)重復(fù)，以不加藥液的平皿作空白對(duì)照。置28℃下培養(yǎng)72h，按十字交叉法測(cè)量各菌落直徑，以其平均值代表菌落大小。計(jì)算其抑菌百分率（計(jì)算公式為：抑菌率（%）＝（對(duì)照菌落直徑—處理菌落直徑）／對(duì)照菌落直徑×100%）。按生物統(tǒng)計(jì)幾率值換算表，將抑制百分率換算成抑菌幾率值［12］，以試驗(yàn)設(shè)計(jì)的濃度對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)，抑菌幾率值為縱坐標(biāo)，分別建立回歸方程（毒力回歸方程），計(jì)算各自的EC50和EC90進(jìn)行毒力評(píng)價(jià)。

1.5 安全性測(cè)定及評(píng)價(jià)

經(jīng)抑菌試驗(yàn)和毒力比較篩選的化學(xué)農(nóng)藥按規(guī)定濃度和667m2用量分別加入20%克·福種衣劑和7.5%克·戊醇玉米種衣劑，按40∶1和50∶1的種藥比與玉米自交系‘鄭58’包衣，沙盤種植，每處理3盤，前10d為15℃培養(yǎng)，以后為20℃培養(yǎng)，調(diào)查出苗期、根重、株高、出苗率。評(píng)價(jià)生產(chǎn)應(yīng)用的安全性。

1.6 田間防治效果試驗(yàn)

1.6.1 玉米頂腐病防效試驗(yàn)

1.6.1.1 菌麥粒的培養(yǎng)

將小麥粒沖洗干凈后加水煮沸20min，分裝于罐頭瓶中高壓滅菌30min，在無菌操作條件下，將培養(yǎng)好的玉米頂腐病菌連同培養(yǎng)基塊一同接到小麥粒上混勻后置28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)，待小麥粒布滿病菌時(shí)用以接種。

1.6.1.2 田間試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)地選擇在張掖市玉米原種場，試驗(yàn)設(shè)3個(gè)處理，共11個(gè)小區(qū)，處理Ⅰ為種子包衣（種衣劑是20%克·福懸浮種衣劑），1～5小區(qū)，第1小區(qū)為97%多菌靈可濕性粉劑20g／667m2種子包衣，第2小區(qū)為97%多菌靈可濕性粉劑20g／667m2＋有機(jī)硅5mL／667m2種子包衣，第3小區(qū)為97%多菌靈可濕性粉劑20g＋98%烯唑醇可濕性粉劑1.5g／667m2包衣，第4小區(qū)為97%多菌靈可濕性粉劑20g＋98%烯唑醇可濕性粉劑1.5g＋有機(jī)硅5mL／667m2包衣，第5小區(qū)無藥劑成分包衣劑包衣。處理Ⅱ作葉面噴灑，6～9小區(qū)，即第6小區(qū)為97%多菌靈可濕性粉劑按20g／667m2的量在4～8葉期噴灑，第7小區(qū)為97%多菌靈可濕性粉劑按20g＋有機(jī)硅5mL／667m2（復(fù)配劑Ⅰ型）的量在4～8葉期噴灑，第8、第9小區(qū)在8～12葉期噴灑，用藥量分別為97%多菌靈可濕性粉劑20g＋98%烯唑醇可濕性粉劑5g／667m2，97%多菌靈可濕性粉劑20g＋98%烯唑醇可濕性粉劑5g＋有機(jī)硅7mL／667m2（復(fù)配劑Ⅱ型）。處理Ⅲ是灌心，即第10個(gè)小區(qū)，是在8～12葉期灌心，用藥量是97%多菌靈可濕性粉劑25g＋98%烯唑醇可濕性粉劑5g＋有機(jī)硅7mL／667m2，第11小區(qū)是對(duì)照，不做任何處理。種子包衣的藥種比為1∶50，每小區(qū)7行，行長30m，行距50cm，株距25cm，每穴播種2粒玉米種子和1g菌麥粒接菌。各小區(qū)以每2行作為一個(gè)重復(fù)，管理同田間大田制種玉米。

1.6.2 玉米瘤黑粉病防效試驗(yàn)

玉米瘤黑粉病防效試驗(yàn)設(shè)計(jì)同頂腐病，每穴接種混菌土（菌土比為1∶500）3g。

1.6.3 防治效果調(diào)查

抽雄后分別對(duì)玉米頂腐病和瘤黑粉病進(jìn)行病情調(diào)查，計(jì)算發(fā)病率、病情指數(shù)和防治效果。玉米頂腐病分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)參照邢會(huì)琴等［6］。發(fā)病率＝發(fā)病株數(shù)／調(diào)查總株數(shù)×100%；病情指數(shù)＝∑（各級(jí)病株數(shù)×各級(jí)代表值）／總株數(shù)×最高一級(jí)代表值×100；防治效果＝（對(duì)照發(fā)病率－處理發(fā)病率）／對(duì)照發(fā)病率×100%。

2 結(jié)果與分析

2.1 化學(xué)農(nóng)藥種類篩選

10種殺菌劑室內(nèi)抑菌測(cè)定結(jié)果（表1）表明，培養(yǎng)72h后，各殺菌劑對(duì)頂腐病菌均有一定的抑菌作用，其中，98%烯唑醇可濕性粉劑抑菌圈直徑最大，達(dá)33.3mm，但是抑菌圈不透明，說明其對(duì)玉米頂腐病菌具有很強(qiáng)的抑制作用，但不能完全殺菌（培養(yǎng)基中殘存少量很不發(fā)達(dá)的菌絲體）；抑菌圈直徑超過20mm的有70%多·?？蓾裥苑蹌?、80%多·?！じｄ\可濕性粉劑、97%多菌靈可濕性粉劑、25%多·錳鋅可濕性粉劑和15%三唑酮可濕性粉劑，抑菌效果較好。繼續(xù)培養(yǎng)至288h時(shí)，70%多·福可濕性粉劑、80%多·福·福鋅可濕性粉劑、98%烯唑醇可濕性粉劑和97%多菌靈可濕性粉劑的抑菌圈明顯大于其他藥劑（p＜0.01），直徑仍然在20mm以上，持效期長；25%多·錳鋅可濕性粉劑、15%三唑酮可濕性粉劑和70%代森錳鋅可濕性粉劑的抑菌圈直徑在10～20mm之間，其他藥劑的抑菌圈直徑小于10mm，有些已經(jīng)失去了抑菌能力。

表1 不同藥劑對(duì)玉米頂腐病菌抑制作用

2.2 有效藥劑對(duì)頂腐病菌的最低完全抑菌濃度（MIC）測(cè)定

選定有效藥劑80%多·?！じｄ\可濕性粉劑、70%多·?？蓾裥苑蹌?8%烯唑醇可濕性粉劑、97%多菌靈可濕性粉劑、98%烯唑醇＋97%多菌靈復(fù)配劑對(duì)頂腐病菌的最低完全抑菌濃度（MIC）測(cè)定結(jié)果（表2）表明，97%多菌靈可濕性粉劑、98%烯唑醇可濕性粉劑、DXB（97%多菌靈可濕性粉劑∶98%烯唑醇可濕性粉劑＝3∶1）和DXC（97%多菌靈可濕性粉劑∶98%烯唑醇可濕性粉劑＝4∶1）的 MIC均為1mg／mL，80%多·?！じｄ\可濕性粉劑、70%多·?？蓾裥苑蹌┖虳XD（97%多菌靈可濕性粉劑：98%烯唑醇可濕性粉劑＝5∶1）的 MIC是2mg／mL，DXA（97%多菌靈可濕性粉劑：98%烯唑醇可濕性粉劑＝2∶1）的MIC是5mg／mL。

2.3 97%多菌靈·98%烯唑醇可濕性粉劑復(fù)配劑對(duì)玉米頂腐病菌的聯(lián)合毒力

測(cè)定結(jié)果（表3）表明，97%多菌靈可濕性粉劑與98%烯唑醇可濕性粉劑按2∶1和5∶1的配比有明顯減效作用（p＜0.05），EC50和EC90均明顯高于兩者單獨(dú)測(cè)定結(jié)果，按3∶1和4∶1的配比與單獨(dú)測(cè)定結(jié)果比較，沒有明顯的增效或減效作用（p＜0.05），與單用效果相當(dāng)?？紤]到98%烯唑醇可濕性粉劑對(duì)防治玉米瘤黑粉病有很好的效果，兩種藥劑混配可達(dá)到“一防治多病”的目的。為藥劑防治頂腐病和兼治黑粉病提供可利用的信息。

表2 有效藥劑的最低完全抑菌濃度（MIC）測(cè)定1）

表3 97%多菌靈和98%烯唑醇的毒力測(cè)定

2.4 97%多菌靈與98%烯唑醇室內(nèi)安全性測(cè)定

經(jīng)抑菌試驗(yàn)篩選的97%多菌靈可濕性粉劑、98%烯唑醇可濕性粉劑和97%多菌靈·98%烯唑醇可濕性粉劑（按4∶1比例，即DXC）分別按20g／667m2、5g／667m2和20g／667m2的量加入20%克·福種衣劑和7.5%克·戊醇玉米種衣劑，與玉米自交系‘鄭58’包衣，沙盤種植，15℃（出苗前）～20℃（出苗后）培養(yǎng)，所測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)（表4）表明，98%烯唑醇可濕性粉劑不論是單獨(dú)包衣還是與97%多菌靈可濕性粉劑復(fù)配包衣，對(duì)玉米出苗和苗期生長都有明顯負(fù)作用，特別在15～20℃（即低溫條件下）范圍內(nèi)出苗期推遲3～5d，根系粗短，根毛大幅減少。而97%多菌靈可濕性粉劑對(duì)玉米種子包衣基本沒有影響。

表4 97%多菌靈WP與98%烯唑醇WP室內(nèi)安全性測(cè)定1）

2.5 田間防治效果

2.5.1 98%烯唑醇可濕性粉劑和97%多菌靈可濕性粉劑對(duì)玉米頂腐病的田間防治效果

從表5可以看出，種子包衣和葉面噴灑均有一定防治效果，在種子包衣的4個(gè)小區(qū)中，各處理防效在68.32%～79.57%之間，但是藥劑種類和是否添加有機(jī)硅作用不明顯；在8～12葉期灌心防治效果只有7.24%；葉面噴灑的4個(gè)小區(qū)中，不論是發(fā)病率還是病情指數(shù)均明顯低于對(duì)照（p＜0.05），防治效果在70%～90%之間，在4～8葉期和8～12葉期噴灑時(shí)，加了表面活性劑有機(jī)硅的處理發(fā)病率和病情指數(shù)均低于沒加有機(jī)硅的處理，而且防治效果能提高8.46～17.31個(gè)百分點(diǎn)。

2.5.2 98%烯唑醇可濕性粉劑和97%多菌靈可濕性粉劑對(duì)玉米瘤黑粉病的田間防治效果

各處理除了對(duì)玉米頂腐病有很好的防效以外，還可以兼治瘤黑粉病，田間試驗(yàn)結(jié)果表明（表6），與對(duì)照相比，種子包衣、葉面噴灑和灌根對(duì)瘤黑粉病都有一定防治效果。但是各種處理中97%多菌靈可濕性粉劑的防效明顯低于97%多菌靈可濕性粉劑加98%烯唑醇可濕性粉劑的處理。從表中數(shù)據(jù)還可以看出，防治效果與頂腐病有相同的規(guī)律：用助劑包衣種子的作用不明顯，而葉面噴灑加助劑卻能明顯提高防治效果。

表5 98%烯唑醇和97%多菌靈對(duì)玉米頂腐病的田間防治效果

表6 98%烯唑醇和97%多菌靈對(duì)玉米瘤黑粉病的田間防治效果

3 討論

本試驗(yàn)篩選出4種藥劑70%多·?？蓾裥苑蹌?、80%多·?！じｄ\可濕性粉劑、97%多菌靈可濕性粉劑和98%烯唑醇可濕性粉劑對(duì)玉米均有很好的殺（抑）菌作用，而且持效期較長。其中，70%多·福可濕性粉劑和80%多·?！じｄ\可濕性粉劑是復(fù)配劑，98%烯唑醇可濕性粉劑和97%多菌靈可濕性粉劑按1∶4和1∶3的比例復(fù)配對(duì)玉米頂腐病菌的抑菌效果比其單獨(dú)測(cè)定沒有明顯的增效或減效作用，由于烯唑醇對(duì)防治玉米瘤黑粉病有很好的效果［13］，兩種藥劑混配可達(dá)到“一防治多病”的目的。

多菌靈和烯唑醇是目前生產(chǎn)中常用的兩種農(nóng)藥，可以防治多種病害，而且復(fù)配可以提高水稻粒黑粉病的防病增產(chǎn)效果［14］。本研究表明，97%多菌靈可濕性粉劑與98%烯唑醇可濕性粉劑原液在室內(nèi)對(duì)玉米頂腐病菌的殺（抑）菌效果很好，這兩種藥劑在田間單獨(dú)或復(fù)配對(duì)玉米頂腐病和瘤黑粉病都有一定的防治效果，如果在其中加入0.05%～0.1%的助劑能明顯提高防治效果。由于有機(jī)硅表面活性劑能提高農(nóng)藥的溶解度，降低藥滴與葉片的表面張力和接觸角，擴(kuò)大其在葉片表面的鋪展面積而提高防治效果。

本研究室內(nèi)和田間試驗(yàn)對(duì)97%多菌靈可濕性粉劑與98%烯唑醇可濕性粉劑原液的混合使用均是現(xiàn)配現(xiàn)用，沒有做藥理反應(yīng)試驗(yàn)，兩者在長期混合情況下是否發(fā)生藥理反應(yīng)有待于進(jìn)一步研究。

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Fungicides for controlling the corn top-rot and corn smut diseases

Xing Huiqin1， Ma Jiancang2，3， Xu Yongfeng4， Li Wancang3
（1.Department of Agronomy，Hexi University，Zhangye734000，China；2.Zhangye Maize Stock Seed Farm，Gansu734000，China；3.Zhangye Yuyuan Seeds Co.，LTD.，Gansu734000，China；4.Zhangye Station of Plant Protection and Quarantine，Gansu734000，China）

Ten fungicides were selected to controlFusariumsubglutinansin the laboratory.The results showed that 80%carbendazim·thiram·ziram WP，70%carbendazim·thiram WP，97%carbendazim WP and 98%diniconazole WP could remarkably inhibit pathogens，and the inhibition duration was long.The inhibition effect of 97%carbendazim·98%diniconazole WP，with the ratio of 3∶1 or 4∶1，had the same effect as 97%carbendazim WP or 98%diniconazole WP.Safety testing showed that 98%diniconazole WP seriously affected the germination of maize seeds and growth of seedlings，while 97%carbendazim WP had no effects on the germination of maize seeds and growth of seedlings.Control efficacy tests in fields indicated that the control effect of 97%carbendazim WP or 97%carbendazim·98%diniconazole WP could control corn top rot and corn smut diseases.By spraying20 g97%carbendazim WP and5 mL silicone per 666.7 m2or 25 g 97%carbendazim WP and5 g 98%diniconazole WP and7 mL silicone per 666.7 m2during 4－8leaf and 8－12leaf stages，the control efficiency of corn top rot disease was about 90%.They could also control corn smut disease，and the control efficiency was about 70%.

corn top rot disease； corn smut disease； fungicide； silicone； control

S 435.131

A

10.3969／j.issn.0529-1542.2011.05.038

2010-09-28

2010-10-25

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