萬(wàn)焰，刁慶春，龔娟，盧芳

（1.四川省遂寧市中心醫(yī)院，遂寧 629000；2.重慶市第一人民醫(yī)院，重慶 400011）

狼瘡2號(hào)方對(duì)緩解期系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清中IL-6、IL-10、IL-18 及 Blys的影響

萬(wàn)焰1，刁慶春2，龔娟2，盧芳2

（1.四川省遂寧市中心醫(yī)院，遂寧 629000；2.重慶市第一人民醫(yī)院，重慶 400011）

目的 研究狼瘡2號(hào)方對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）患者血清中白介素（IL）-6、IL-10、IL-18及B淋巴細(xì)胞刺激因子（Blys）的影響，探討其治療SLE的作用機(jī)制。方法 將78例緩解期SLE患者分為狼瘡2號(hào)方加西藥治療的中西藥結(jié)合治療組和單純西藥治療的對(duì)照組，觀察兩組患者治療前后血清中IL-6、IL-10、IL-18及Blys水平的變化。結(jié)果 兩組患者治療前血清中IL-6、IL-10、IL-18及Blys水平均顯著高于健康組；治療組治療后患者血清中IL-6、IL-10、IL-18及Blys水平明顯下降；對(duì)照組治療后血清中IL-6、IL-18、Blys水平明顯下降，但I(xiàn)L-10水平治療前后差異無(wú)顯著性；其中治療組血清中IL-18、Blys下降水平較對(duì)照組顯著。結(jié)論 狼瘡2號(hào)方結(jié)合小劑量糖皮質(zhì)激素治療緩解期SLE患者，能明顯降低IL-6、IL-10、IL-18及Blys的水平,有效減少激素的副作用。

系統(tǒng)性紅斑狼瘡；狼瘡2號(hào)方；白介素-6；白介素-10；白介素-18；B淋巴細(xì)胞刺激因子

萬(wàn)焰：重慶市第一人民醫(yī)院-瀘州醫(yī)學(xué)院聯(lián)合培養(yǎng)研究生，現(xiàn)在四川遂寧中心醫(yī)院

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）是一種典型的自身免疫性炎癥性結(jié)締組織疾病，臨床上可表現(xiàn)為多系統(tǒng)、多臟器受累。其發(fā)病機(jī)制尚未明了，文中通過(guò)對(duì)2009年3月—2010年3月在我院就診的78例緩解期SLE患者給予中藥湯劑狼瘡2號(hào)方加小劑量糖皮質(zhì)激素（以下簡(jiǎn)稱激素）治療，觀察治療前后SLE患者血清中白介素（IL）-6、IL-10、IL-18及B淋巴細(xì)胞刺激因子（Blys）水平的變化，以探討狼瘡2號(hào)方治療SLE后對(duì)以上細(xì)胞因子等變化的影響。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 我院門診及住院部收治的緩解期SLE患者，其診斷均符合美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)1982年的SLE分類標(biāo)準(zhǔn)?；颊吣挲g 15～49歲，平均（25±10）歲；女 74例，男 4例；病程14d～20年，激素最小量為5mg/d，維持1年，最大40mg/d，持續(xù)1個(gè)月。并按SLE病情評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)（SLEDAI）評(píng)分，小于9分為緩解期。按2∶1比例選擇20名健康體檢人員作為健康對(duì)照組，女 18人，男 2人，年齡 18～45歲，平均（28±10）歲。將78例緩解期SLE患者隨機(jī)分為狼瘡2號(hào)方加西藥治療的中西結(jié)合治療組（40例）和單純西藥治療的對(duì)照組（38例），其一般情況具有可比性，所用激素用量均衡。出現(xiàn)以下情況不納入本試驗(yàn)：因病情需要使用甲潑尼龍沖擊治療和需要聯(lián)合細(xì)胞毒藥物治療。臨床資料見(jiàn)表1

表1 患者臨床資料

1.2 治療方法

對(duì)照組：?jiǎn)斡眉に刂委?，初始劑量為潑尼?0～40mg/d，病情穩(wěn)定后逐漸減量至小劑量維持。

治療組：在使用對(duì)照組治療方案基礎(chǔ)上加用中藥湯劑狼瘡2號(hào)方（我院經(jīng)驗(yàn)方，組成：熟地黃、山茱萸、山藥、北沙參、麥冬、牡丹皮、玄參、益母草、丹參、金銀花、絲瓜絡(luò)、生地、菟絲子、黨參等），水煎服，每日1劑，分2次服用，連用2個(gè)月。

1.3 檢測(cè)項(xiàng)目與方法 觀察兩組患者治療前后血清中IL-6、IL-10，IL-18及Blys的水平，并與20名健康體檢者作對(duì)照。人血清中IL-6、IL-10，IL-18及Blys水平的測(cè)定采用ELISA法，具體操作見(jiàn)試劑盒說(shuō)明。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以±s描述，多樣本組間比較采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

治療組和對(duì)照組治療前血清中IL-6、IL-10，IL-18及Blys水平，均顯著高于健康對(duì)照組（P＜0.01）。

治療組治療后患者血清中IL-6、IL-10、IL-18及Blys水平下降，與治療前相比差異有顯著性（P＜0.05）；對(duì)照組治療后血清中IL-6、IL-18及Blys水平下降，差異具有顯著性（P＜0.05），但 IL-10水平治療前后差異無(wú)顯著性（P＞0.05）；治療后治療組與對(duì)照組比較，IL-18、Blys水平下降差異有顯著性（P＜0.05）。見(jiàn)表 2。

3 討論

白介素是一大類非均一的調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、介導(dǎo)信號(hào)傳遞的多肽類，IL-6、IL-10、IL-18等在SLE中較受關(guān)注。

SLE患者血清中，IL-6的表達(dá)明顯升高，同時(shí)發(fā)現(xiàn)IL-6與抗ds-DNA呈正相關(guān)[1]。IL-6是Th2細(xì)胞因子中的B細(xì)胞刺激因子，可以刺激SLE患者外周血單一核細(xì)胞（PBMCs）產(chǎn)生抗DNA自身抗體[2]。有研究證明IL-6升高與幽門螺桿菌感染、消化道潰瘍、高血糖等均有密切聯(lián)系[3-6]，這些恰好也是激素的副作用，我們的研究中發(fā)現(xiàn)，兩組治療前后的IL-6水平下降，但中西醫(yī)結(jié)合治療組療效更好，是否可以推測(cè)中藥降低了激素的副作用，有待進(jìn)一步探討。

表2 兩組治療前后血清中IL-6、IL-10，IL-18及Blys水平的比較（±s）pg/mL

表2 兩組治療前后血清中IL-6、IL-10，IL-18及Blys水平的比較（±s）pg/mL

注：與健康對(duì)照組比較，☆P＜0.01；與本組治療前后比較，★P＜0.05；治療后與對(duì)照組比較，▲P＜0.05。

組別治療組對(duì)照組健康對(duì)照組IL-10 452.94±90.65☆134.04±71.32★61.08±95.27☆432.16±89.31 112.56±35.15治療前治療后治療前治療后IL-6 28.65±19.62☆13.38±13.29★26.13±20.53☆16.78±14.32★11.26±5.87 IL-18 1012.35±510.63☆510.56±214.78★▲978.34±436.43☆710.17±350.13★521.39±318.45 Blys 1.513±0.423☆0.918±0.135★▲1.579±0.314☆1.237±0.316★0.712±0.119

IL-10是一個(gè)多效性細(xì)胞因子，具有免疫刺激和免疫抑制雙重作用，其免疫刺激作用主要是提高B細(xì)胞的存活率，促進(jìn)B細(xì)胞的增殖、MHC-Ⅱ類抗原表達(dá)以及抗體的分泌。有研究表明[7]IL-10可以刺激SLE患者PBMCs產(chǎn)生抗dsDNA抗體。IL-10同時(shí)具有抗炎和致炎作用。研究表明[8]SLE患者無(wú)論在活動(dòng)期還是緩解期，其體內(nèi)IL-10水平始終高于正常人。這與我們的結(jié)果一致。Yin等[9]研究發(fā)現(xiàn)MRL/lpr小鼠的細(xì)胞免疫和炎癥反應(yīng)不能被IL-10抑制，提示IL-10在SLE疾病早期可能是一種保護(hù)性因子。說(shuō)明在疾病的不同時(shí)期，IL-10的作用可能完全相反，這和中醫(yī)的辨證施治有一定的相似之處。試驗(yàn)中我們發(fā)現(xiàn)西藥對(duì)照組治療前后IL-10水平無(wú)差異，但是中西藥結(jié)合治療組治療后IL-10水平降低，這與我們之前動(dòng)物實(shí)驗(yàn)推測(cè)[10]相一致。

IL-18可直接增強(qiáng)FasL介導(dǎo)的Th1細(xì)胞毒效應(yīng)，促使T、B細(xì)胞的凋亡發(fā)生，引起SLE患者外周血白細(xì)胞（PBL）凋亡率增加[11]。研究發(fā)現(xiàn)SLE患者血漿IL-18水平及PBMC IL-18mRNA的相對(duì)平均水平與SLEDAI呈正相關(guān)[12]，提示外周血IL-18可能并未參與SLE的早期發(fā)病過(guò)程，但當(dāng)疾病發(fā)展到一定程度，IL-18分泌水平升高，可能在本病的進(jìn)一步發(fā)展中起作用。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)在降低IL-18水平上，中西藥結(jié)合治療組優(yōu)于西藥對(duì)照組。

Blys是1999年發(fā)現(xiàn)的腫瘤壞死因子（TNF）配體超家族新成員[13]。Blys作為一種B淋巴細(xì)胞共刺激因子，參與了B細(xì)胞的增殖和分化,在體液免疫中亦具有重要的作用。SLE患者血漿或血清的Blys水平較正常對(duì)照組顯著升高，并且循環(huán)中的Blys生物學(xué)活性較對(duì)照組顯著增強(qiáng)[14]。有報(bào)道[15]Blys水平的變化與血清抗dsDNA抗體水平變化一致。Blys轉(zhuǎn)基因小鼠Blys過(guò)度表達(dá)與SLE樣表現(xiàn)有明顯相關(guān)性；SLE易感小鼠在疾病早期即出現(xiàn)循環(huán)Blys水平升高；Blys拮抗劑可以延緩疾病進(jìn)程、提高生存率[16]。動(dòng)物模型研究證實(shí)Blys在SLE的發(fā)生發(fā)展中起作用。因此，從1999年Blys發(fā)現(xiàn)以后,已有生物技術(shù)公司著手進(jìn)行Blys及其可溶性受體和單克隆抗體的開(kāi)發(fā)[17,18]。目前國(guó)內(nèi)對(duì)于中醫(yī)藥治療SLE作用機(jī)制方面的研究尚未有中藥對(duì)Blys作用的相關(guān)報(bào)道，故鑒于Blys在發(fā)病機(jī)制中的重要性及抗Blys抗體的治療作用，我們選定其做為一個(gè)檢測(cè)指標(biāo)。我們之前做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)中藥方＋潑尼松組的Blys低于中藥方組以及潑尼松組[10]，此次臨床觀察也提示中西醫(yī)結(jié)合治療可更好的降低Blys水平。

紅斑狼瘡中醫(yī)稱為紅蝴蝶瘡,中醫(yī)學(xué)認(rèn)為其發(fā)病主要是因先天素體稟賦不足，腎陰虧虛；后天七情內(nèi)傷，勞倦過(guò)度，六淫邪毒侵襲以及陽(yáng)光毒、藥毒、飲食不節(jié)等，內(nèi)外因素相搏，陰陽(yáng)失調(diào)，氣血失和，瘀阻脈絡(luò)，五臟六腑受損，以及皮、肉、筋、脈、關(guān)節(jié)等失養(yǎng)而致生本病。禤國(guó)維認(rèn)為紅斑狼瘡急性期以熱毒熾盛證多見(jiàn)，緩解期以陰虛內(nèi)熱證、脾腎陽(yáng)虛證多見(jiàn)[19]，其中脾腎陽(yáng)虛證多見(jiàn)于狼瘡性腎炎。對(duì)于SLE緩解期陰虛內(nèi)熱者，治宜滋陰養(yǎng)腎、清熱涼血。我們運(yùn)用的狼瘡2號(hào)方，以熟地黃、山茱萸、山藥為君滋陰補(bǔ)腎，沙參、麥冬、玄參、生地、金銀花、牡丹皮養(yǎng)陰、清熱、涼血為臣，佐以丹參、益母草活血涼血，絲瓜絡(luò)清熱解毒通絡(luò)，菟絲子、白芍加重滋補(bǔ)肝腎陰血的作用，以及黨參益氣、生津，有助于陰血的運(yùn)化，共奏滋陰養(yǎng)腎、清熱涼血之效。本研究表明狼瘡2號(hào)方結(jié)合激素治療SLE，能有效降低血清中IL-6、IL-10、IL-18及Blys的水平，且對(duì)IL-18和Blys水平的下降明顯優(yōu)于單純激素治療組。上述結(jié)果推測(cè)狼瘡2號(hào)方可能通過(guò)降低血清中IL-6、IL-10，IL-18及Blys的水平而起到了治療緩解期紅斑狼瘡的和降低激素副作用。與目前開(kāi)展的生物療法相比，中藥可顯著降低治療成本。

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R593.24

A

1672－0709（2011）04-0230－03

重慶市衛(wèi)生局重點(diǎn)項(xiàng)目（2007-1-7）

刁慶春，Email:gchdiao@vip.sina.com

2011-02-23)