陳鴛誼，李行諾，張翠萍，葛志偉，顏繼忠

（1.浙江工業(yè)大學 藥學院，浙江 杭州 310032；2.浙江大學 藥學院，浙江 杭州 310058）

當歸中的一個新苯酞類化合物

陳鴛誼1，李行諾1，張翠萍1，葛志偉2，顏繼忠1

（1.浙江工業(yè)大學 藥學院，浙江 杭州 310032；2.浙江大學 藥學院，浙江 杭州 310058）

為研究當歸根莖中的有效化學成分，采用D101大孔吸附樹脂、硅膠柱色譜和反相高效制備液相色譜等方法從當歸乙醇提取物中分離純化得到7個化合物，通過化合物的理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)鑒定為senkyunolide H（Ⅰ），senkyunolide I（Ⅱ），Z-6-羥基-7-甲氧基－藁本內(nèi)酯（Ⅲ），Z-藁本內(nèi)酯（Ⅳ），E-6，7-反式－二羥基藁本內(nèi)酯（Ⅴ），阿魏酸（Ⅵ），falcarindiol（Ⅶ），其中化合物Ⅲ為一新的苯酞類化合物.

當歸；Z-6-羥基-7-甲氧基－藁本內(nèi)酯；苯酞類化合物

當歸為傘形科植物Angelicasinensis的干燥根［1］，藥用歷史悠久，素有“十方九歸”之說，具有補血活血、潤腸、調(diào)經(jīng)之功效.現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，其對心血管系統(tǒng)疾病和腫瘤疾病亦有較好的療效［2］.當歸成分非常復雜，主要含有苯酞類、香豆素類、黃酮類以及有機酸類化合物［3］.為進一步研究當歸的藥效物質(zhì)基礎和建立當歸快速提取分離的工藝流程，對當歸的化學成分進行了比較系統(tǒng)的研究，為建立當歸工業(yè)化生產(chǎn)的質(zhì)量控制標準奠定實驗基礎.對當歸中主要揮發(fā)性成分進行了分離和鑒定.在HPLC的指導下，采用大孔吸附樹脂、硅膠柱色譜和制備型高效液相色譜等方法從當歸90%乙醇提取物中分離得到了7個化合物.

1 儀器與試劑

美國Agilent 1100制備型高效液相色譜儀，HP chemstations處理軟件（安捷倫科技有限公司，美國）；分析型高效液相色譜（Knauer，杭州綠綿安特分析系統(tǒng)裝備有限公司），進樣器 Auto sampter 3800，四元梯度泵、在線脫氣機、多波長紫外檢測器；BRUKER AC-80型磁共振光譜儀（TMS為內(nèi)標）測定.Mill-Q超純水器（Mllipore公司）；柱色譜硅膠（100～200目）和薄層色譜硅膠均為青島海洋化工廠產(chǎn)品.甲醇為色譜純，購自美國Merck公司，其他溶劑均為分析純.當歸（Angelicasinensis）藥材購于杭州胡慶余堂，樣品保存于浙江工業(yè)大學藥學院.

2 提取與分離

當歸干燥根3.0 kg，用90%乙醇回流提取2次，每次1.5 h，提取液用紗布濾去固體顆粒，減壓濃縮得浸膏1 504 g.浸膏用去離子水溶解，過濾，使用D101大孔吸附樹脂進行層析分離，分別用水、20%乙醇、60%乙醇和90%乙醇洗脫，收集60%和90%乙醇洗脫部分，減壓濃縮.60%乙醇洗脫組分經(jīng)硅膠柱色譜分離得到6個流分（Fr.1—6），90%乙醇洗脫組分經(jīng)硅膠柱色譜分離得到7個流分（Fr.7—14）.各流分經(jīng)高效制備液相色譜純化，色譜柱為ZORBAX SB-C18（21.2×250 mm，7μm），流 速8 mL／min，甲醇－水梯度洗脫.Fr.3得到化合物Ⅵ（37 mg），Ⅴ（54 mg），Ⅱ（333 mg），Ⅰ（68 mg）；Fr.8得到化合物Ⅲ（22 mg），Ⅳ（56 mg）；Fr.12得到化合物Ⅶ（45 mg）.化合物Ⅰ－Ⅶ的化學結(jié)構分別為

3 結(jié)構鑒定

化合物Ⅰ 棕黃色油狀物.EI-MS（m／z）：224［M］＋；1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：0.94（3H，t，J＝7.4 Hz，H-11），1.49（2 H，sext，H-10），1.85（1 H，m，H-5a），2.04（1 H，m，H-5b），2.33（2 H，q，H-9），2.40（1 H，m，H-4a），2.64（1 H，m，H-4b），3.94（1H，dt，J＝3.2，9.6 Hz，H-6），4.57（1H，d，J＝3.5 Hz，H-7），5.30（1H，t，J＝7.9 Hz，H-8）；13C-NMR（CDCl3，125 MHz）δ：169.4（C-1），153.2（C-3），148.2（C-3a），125.4（C-7a），114.4（C-8），67.3（C-6），63.5（C-7），28.1（C-9），25.7（C-5），22.3（C-10），18.4（C-4），13.8（C-11）.以上數(shù)據(jù)與文獻［4］報道基本一致，鑒定化合物為senkyunolide H.

化合物Ⅱ 棕黃色油狀物.EI-MS（m／z）：224［M］＋；1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：0.95（3H，t，J＝7.4 Hz，H-11），1.49（2 H，sext，H-10），1.89（1H，m，H-5a），2.10（1 H，m，H-5b），2.35（2 H，q，H-9），2.49（1H，m，H-4a），2.56（1H，m，H-4b），3.94（1 H，ddd，J＝9.6，6.4，3.2 Hz，H-6），4.49（1H，d，J＝5.3 Hz，H-7），5.28（1H，t，J＝7.9 Hz，H-8）；13C-NMR（CDCl3，125 MHz）δ：169.2（C-1），153.1（C-3），148.0（C-3a），125.8（C-7a），114.3（C-8），71.6（C-6），67.5（C-7），28.1（C-9），26.5（C-5），22.3（C-10），19.0（C-4），13.8（C-11）.以上數(shù)據(jù)與文獻［5］報道基本一致，鑒定化合物為senkyunolide I.

化合物Ⅲ 棕黃色油狀物.［α］2D0＝－1.50（c＝0.28，CHCl3），通 過 HR-EI-MS 可 知 分 子 式 為C13H18O4（m／z238.1216，Cal.238.1205），IR（KBr，cm－1）3 450，2 960，1 760，1 677，1 637，1 466.1HNMR（CDCl3，500 MHz）譜中，高場區(qū)給出一個甲基質(zhì)子信號δ：0.95（3H，t，J＝7.4 Hz，H-11）；四個亞甲基質(zhì)子信號δ：1.50（2 H，sext，H-10），1.99（2H，m，H-5），2.36（2 H，q，H-9），2.45，2.55（2 H，m，H-4）；兩個連有氧原子的次甲基質(zhì)子信號δ：3.98（1H，J＝3.6 Hz，H-7），4.17（1H，m，H-6）；一個烯氫質(zhì)子信號δ：5.29（1H，t，J＝7.5 Hz，H-8）.13C-NMR（CDCl3，125 MHz）給出了13個碳信號，包括一個酯羰基碳信號δ：169.4（C-1）；四個烯碳信號δ：154.1（C-3），148.5（C-3a），124.2（C-7a），113.6（C-8）；兩個連有氧原子的次甲基碳信號δ：73.8（C-7），67.8（C-6）；一 個 甲 氧 基 碳 信 號 δ：58.7（－OCH3）；四個亞甲基碳信號δ：28.0（C-9），24.4（C-5），22.3（C-10），17.2（C-4）；一個甲基碳信號：δ：13.8（C-11）.通過 HSQC譜對該化合物的碳氫數(shù)據(jù)進行了準確的歸屬（表1）.發(fā)現(xiàn)除多出一個甲氧基信號，以及6位和7位的碳氫信號出現(xiàn)差異外，該化合物的NMR數(shù)據(jù)與senkyunolide I（2）的數(shù)據(jù)十分相近.通過HMBC譜，最終確定甲氧基位于C－7位，并且通過NOESY譜確定C-6位羥基與C-7位甲氧基處于反式（見圖1）.經(jīng)查閱文獻，該化合物為一個新的苯酞類化合物，命名為Z-6-羥基-7-甲氧基－藁本內(nèi)酯.

表1 化合物Ⅲ 的1 H NMR和13 C NMR數(shù)據(jù)Table 1 1 H NMR and 13 C NMR data of compoundⅢ（CDCl3，J in Hz）

圖1 化合物Ⅲ的HMBC和NOESY相關Fig.1 The Key correlations in HMBC and NOESY spectra of compoundⅢ

化合物Ⅳ 淺黃色油狀物.EI-MS（m／z）：190［M］＋；1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：0.96（3H，t，J＝7.4 Hz，H-11），1.50（2 H，sext，H-10），2.38（2H，q，H-9），2.47（2 H，m，H-5），2.61（2H，m，H-4），5.24（1H，t，J＝8.0 Hz，H-8），6.01（1H，m，H-6），6.28（1H，dt，J＝2.0，9.7 Hz，H-7）；13C-NMR（CDCl3，125 MHz）δ：167.6（C-1），148.5（C-3a），147.1（C-3），129.9（C-6），123.9（C-7a），117.0（C-7），112.9（C-8），28.1（C-9），22.4（C-10），18.5（C-4），13.7（C-11）.以上數(shù)據(jù)與文獻［6］報道基本一致，鑒定化合物為Z-藁本內(nèi)酯.

化合物Ⅴ 淺黃色油狀物.EI-MS（m／z）：224［M］＋；1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：0.96（3H，t，J＝7.4 Hz，H-11），1.51（2H，sext，H-10），1.91，2.10（2H，m，H-5），2.32（2 H，q，H-9），2.73（2H，m，H-4），3.97（1H，m，H-6），4.48（1H，J＝5.3Hz，H-7），5.77（1 H，t，J＝8.6 Hz，H-8）；13C-NMR（CDCl3，125 MHz）δ：169.0（C-1），151.5（C-3），147.6（C-3a），128.2（C-7a），118.2（C-8），71.0（C-6），67.6（C-7），27.9（C-9），26.7（C-5），23.0 （C-10），22.5（C-4），13.6（C-11）.以上數(shù)據(jù)與文獻［7］報道基本一致，鑒定化合物為E-6，7-反式－二羥基藁本內(nèi)酯.

化合物Ⅵ 灰白色粉末.EI-MS（m／z）：194［M］＋；1H-NMR（DMSO-d6，500 MHz）δ：3.82（3 H，s，－OCH3），6.38（1 H，d，J＝15.9 Hz，H-8），6.80（1H，d，J＝8 Hz，H-6），7.08（1H，dd，J＝8.5 Hz，H-5），7.28（1H，d，J＝1.5 Hz，H-2），7.49（1H，d，J＝16 Hz，H-7），10.35（1H，brs，Ar-OH）；13CNMR（DMSO-d6，125 MHz）δ：168.2（C-9），149.1（C-4），148.0（C-3），144.4（C-7），125.9（C-1），122.8（C-6），115.9（C-8），115.6（C-5），111.2（C-2），55.7（OCH3）.以上數(shù)據(jù)與文獻［4］報道基本一致，鑒定化合物為阿魏酸.

化合物Ⅶ 棕黃色油狀物.EI-MS（m／z）：260［M］＋；1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：0.90（3H，t，J＝7.0 Hz，H-17），1.29（8 H，m，H-13～H-16），1.38（2H，m，H-12），2.10（2H，m，H-11），4.94（1H，brd，J＝5.3 Hz，H-3），5.20（1 H，d，J＝8.3 Hz，H-8），5.25（1H，m，H-1a），5.49（1H，m，H-1b），5.52（1 H，m，H-10），5.60（1H，m，H-9），5.94（1H，d，J＝1.6 Hz，H-2）；13C-NMR（CDCl3，125 MHz）δ：135.8（C-2），134.4（C-10），127.6（C-9），117.2（C-1），79.8（C-4），78.3（C-7），70.1（C-5），68.6（C-6），63.3（C-3），58.4（C-8），31.7（C-11），29.2（C-12），29.1（C-13），29.0（C-14），27.6（C-15），22.6（C-16），14.0（C-17）.以上數(shù)據(jù)與文獻［8］報道基本一致，鑒定化合物為falcarindiol.

4 結(jié) 論

以當歸為研究對象，采用加熱回流、溶劑萃取法得到90%乙醇提取物.提取液經(jīng)D101大孔吸附樹脂、硅膠柱層析粗分，將得到的各部分進行高效制備液相色譜純化，得到化合物單體.共分離得到7個化合物單體，通過理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)鑒定了其結(jié)構，其中Z-6-羥基-7-甲氧基－藁本內(nèi)酯（Ⅲ）為一新的苯酞類化合物.

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A new phthalide derivatives from Angelica sinensis

CHEN Yuan-yi1，LI Xing-nuo1，ZHANG Cui-ping1，GE Zhi-wei2，YAN Ji-zhong1
（College of Pharmaceutical Science，Zhejiang University of Technology，Hangzhou 310032，China；2.College of Pharmaceutical Science，Zhejiang University，Hangzhou 310058，China）

Chemical constituents from the roots and stem ofAngelicasinensiswere isolated and purified with D101 macroporous resin，column chromatography on silica gel and preparative HPLC.Seven compounds were identified as senkyunolide H （Ⅰ），senkyunolide I（Ⅱ），Z-6-hydroxyl-7-methoxyligustilide（Ⅲ），Z-ligustilide（Ⅳ），E-6，7-trans-dihydroxyligustilide（Ⅴ），ferulic acid（Ⅵ），F(xiàn)alcarindiol（Ⅶ）by physical and chemical properties and spectroscopic analysis spectra.Among them，compoundⅢ was a new phthalide derivative.

Angelicasinensis；Z-6-hydroxyl-7-methoxyligustilide；phthalides

R284.1

A

1006-4303（2011）05-0524-04

2010-04-08

國家重大科技專項基金資助項目（2009ZX09313-036）

陳鴛誼（1985—），女，浙江臺州人，碩士研究生，研究方向為中藥提取與分離，E-mail：chenyuanyi1985＠126.com.通信作者：顏繼忠教授，E-mail：yjz＠zjut.edu.cn.

（

劉 巖）