管冬元，方肇勤，潘志強(qiáng)，盧文麗，劉小美，梁 超，吳中華，茍 薇

(上海中醫(yī)藥大學(xué)，上海 201203)

中藥五味標(biāo)準(zhǔn)化檢驗(yàn)方法的建立*

管冬元，方肇勤△，潘志強(qiáng)，盧文麗，劉小美，梁 超，吳中華，茍 薇

(上海中醫(yī)藥大學(xué)，上海 201203)

目的:探索和建立標(biāo)準(zhǔn)化中藥五味檢驗(yàn)方法。方法:試驗(yàn)人員經(jīng)培訓(xùn)后，10人同步、盲法對(duì)黃柏等10味中藥飲片和黃連解毒湯等6張小復(fù)方標(biāo)準(zhǔn)水煎劑以及小檗堿等7個(gè)中藥有效組分溶液進(jìn)行品味和打分及綜合評(píng)價(jià)，并研究和建立標(biāo)準(zhǔn)化中藥五味檢驗(yàn)的方法。結(jié)果:(1)知母、黃柏、生梔子、生大黃、苦參、生黃芪、生曬參、淫羊藿、制附子、制吳茱萸等10味中藥飲片五味檢驗(yàn)結(jié)果多與2005《中華人民共和國(guó)藥典》所載近似，但有較為準(zhǔn)確的程度刻畫(huà)與區(qū)分;個(gè)別藥物如淫羊藿、制附子以苦味為主，而非《藥典》所載的辛、甘;(2)首次對(duì)黃連解毒湯、大黃附子湯、左金丸、參附湯、吳茱萸湯、療本滋腎丸等6個(gè)小復(fù)方的五味進(jìn)行了檢驗(yàn)與刻畫(huà);(3)首次對(duì)菝葜皂苷元、小檗堿、梔子苷、大黃酚、大黃素、淫羊藿苷、烏頭堿等7個(gè)中藥有效組分進(jìn)行了檢驗(yàn)與刻畫(huà)，發(fā)現(xiàn)這些組分多與其對(duì)應(yīng)飲片的五味近似，惟大黃素、大黃酚未能檢出生大黃的苦味，而菝葜皂苷元的苦味也遠(yuǎn)弱于知母。結(jié)論:所建立的中藥五味的標(biāo)準(zhǔn)化檢驗(yàn)方法能準(zhǔn)確、客觀、量化地檢出中藥、中藥小復(fù)方和中藥有效組分的五味，這對(duì)于驗(yàn)證已有中藥五味及當(dāng)代中藥新藥標(biāo)準(zhǔn)化研發(fā)是有益的。

中藥;五味;藥性;方法學(xué);標(biāo)準(zhǔn);中藥有效組分

五味是中藥藥性的核心內(nèi)容。當(dāng)代中藥學(xué)的發(fā)展，包括新的動(dòng)植物中藥的建立、自中藥所提取的有效藥用組分等，均需要準(zhǔn)確刻畫(huà)其五味;且由于種種原因，歷代對(duì)一些常用中藥的五味記載不一，莫衷一是，這些不僅給臨床遣方用藥帶來(lái)不便，而且直接限制了中藥學(xué)科的發(fā)展。因此，建立標(biāo)準(zhǔn)化、客觀化的中藥五味檢驗(yàn)方法，并逐一檢驗(yàn)與刻畫(huà)是十分必要的。有鑒于此，借鑒中藥五味歷代主要采用口感品味的方法，我們嘗試建立了標(biāo)準(zhǔn)化中藥五味的檢驗(yàn)方法，并初步對(duì)10味中藥飲片、6個(gè)中藥小復(fù)方以及7個(gè)對(duì)應(yīng)中藥的有效組分等五味進(jìn)行了標(biāo)準(zhǔn)化、計(jì)量化的檢驗(yàn)。

1材料與方法

1．1中藥與試劑

中藥飲片:河北知母、四川黃柏、廣西生梔子、甘肅生大黃、廣西苦參、山西生黃芪、遼寧生曬參、山西淫羊藿、四川制附子、四川制吳茱萸等，均購(gòu)自上?？禈蛑兴庯嬈尽Ｖ兴幱行ЫM分:菝葜皂苷元、小檗堿、梔子苷、大黃酚、大黃素、淫羊藿苷、烏頭堿等，均購(gòu)自上海西寶生物技術(shù)有限公司。

冰醋酸、蔗糖、氯化鈉等為國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司產(chǎn)品，甲硝唑?yàn)樯虾：馍街扑幱邢薰井a(chǎn)品，紅辣椒購(gòu)自超市。

1．2 中藥制備

1．2．1 中藥飲片浸膏的制備 取知母、黃柏、生梔子、生大黃、苦參、生黃芪、生曬參、淫羊藿、制附子、制吳茱萸等10味中藥飲片各100g。分別粉碎過(guò)50目篩，20℃自來(lái)水1∶10浸沒(méi)2h;煮沸后，文火保持微沸30min，取藥汁;再加入等量自來(lái)水，煮沸后，文火保持微沸30min，取藥汁;合并兩次藥汁，過(guò)濾，文火濃縮至1g生藥/1ml浸膏。檢驗(yàn)時(shí)，各取5ml中浸膏，加5ml純凈水，混勻后用于品味。

1．2．2 中藥小復(fù)方浸膏的制備 6個(gè)小復(fù)方及劑量分別為黃連解毒湯(黃連9g，黃柏6g，黃芩6g，梔子 9g)、大黃附子湯(大黃 9g，附子 12g，細(xì)辛3g)、左金丸(黃連18g，吳茱萸 3g)、參附湯(生曬參12g，制附子 9g)、吳茱萸湯(吳茱萸 9g，生曬參 9g，生姜18g，大棗 4枚)、療本滋腎丸(知母 9g，黃柏9g)。以上劑量參考《方劑學(xué)》教材［1］，每個(gè)小復(fù)方均取10帖用量制備水煎劑(方法同上)，濃縮至1g生藥/1ml浸膏。檢驗(yàn)時(shí)，各取5ml小復(fù)方水煎劑，加5ml純凈水，混勻后用于品味。

1．2．3 中藥有效組分溶液的配制 表1顯示，7個(gè)中藥有效組分所對(duì)應(yīng)的中藥、用量、助溶劑。所有中藥有效組分的純度均大于98%，用量參考《中華人民共和國(guó)藥典》2005年版［2］所規(guī)定的100g生藥中的含量。各有效組分用相應(yīng)的助溶劑助溶后，用純凈水定溶到100ml(相當(dāng)于1g中藥生藥/1ml的濃度)。檢驗(yàn)時(shí)，各取5ml中藥有效組分水溶液，加5ml純凈水混勻后用于品味。同時(shí)以相應(yīng)濃度的助溶劑乙醚、丙酮、乙醇做對(duì)照，以排除助溶劑對(duì)中藥中藥有效組分五味檢驗(yàn)的影響。

表1 中藥單體、劑量與助溶劑

1．3 五味標(biāo)準(zhǔn)品及配制

表2顯示，選用冰醋酸、甲硝唑、蔗糖、氯化鈉等水溶液以及紅辣椒浸膏。經(jīng)研究者自低濃度逐漸加大濃度品味后，配制成輕、中、重不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品，用于口感培訓(xùn)和調(diào)適。

1．4 五味檢驗(yàn)計(jì)分標(biāo)準(zhǔn)

表3顯示，酸、苦、甘、辛、咸等五味的輕重程度分別記為0～4五級(jí)，其分值和對(duì)應(yīng)的口感。

表2 五味標(biāo)準(zhǔn)品的濃度

表3 中藥五味檢驗(yàn)的計(jì)分標(biāo)準(zhǔn)

1．5 試驗(yàn)人員及其培訓(xùn)和五味檢驗(yàn)

10名五味檢驗(yàn)自愿試驗(yàn)者年齡在25歲～55歲之間，無(wú)重大疾病與特殊嗜好。試驗(yàn)者先重復(fù)品味五味標(biāo)準(zhǔn)品溶液，打分，交流感受;然后品味各被試品。

五味檢驗(yàn)采用盲法。試驗(yàn)者每次含被試品5ml～10ml，品味后吐凈，在五味檢驗(yàn)表中記錄;立即用純凈水充分漱口3次;進(jìn)行下一個(gè)被試品檢驗(yàn)。對(duì)于某被試品的五味，依據(jù)口感逐一刻畫(huà)。

1．6 助溶劑口感校正

鑒于大多中藥有效組分需助溶劑融解，而助溶劑有五味差異，因此采用校正公式:有效組分五味值=含助溶劑的有效組分溶液五味值－相同濃度助溶劑溶液的五味值。

1．7 統(tǒng)計(jì)分析與評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

表4顯示，統(tǒng)計(jì)出每個(gè)樣品10人檢驗(yàn)五味值的均數(shù)，依據(jù)中藥五味程度傳統(tǒng)描述方法，確定五味的強(qiáng)度范圍。以苦為例，0～0．4計(jì)為無(wú)味，0．5～1．4計(jì)為微苦，1．5 ～2．4 計(jì)為小苦，2．5 ～3．4 計(jì)為苦，3．5～4．4計(jì)為大苦。

表4 中藥五味的計(jì)分量表

2 結(jié)果

2．1 不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品的檢驗(yàn)結(jié)果

表5顯示，所有試驗(yàn)者均能準(zhǔn)確區(qū)分標(biāo)準(zhǔn)品的五味及其不同程度，統(tǒng)計(jì)結(jié)果及按藥性術(shù)語(yǔ)描述。

表5 不同濃度五味標(biāo)準(zhǔn)品的檢驗(yàn)結(jié)果(均數(shù))

在味中濃度、高濃度的被試品中，紅辣椒浸膏(辛)和氯化鈉溶液(咸)一些試驗(yàn)者品味似有“酸”味，檢驗(yàn)值為 0．2，接近 0。

2．2 中藥飲片五味的檢驗(yàn)結(jié)果

表6顯示10個(gè)中藥飲片五味的檢驗(yàn)結(jié)果。表7顯示參考表4的標(biāo)準(zhǔn)、檢驗(yàn)結(jié)果及按藥性術(shù)語(yǔ)描述，以及與《2005中華人民共和國(guó)藥典》比較。

表6 10個(gè)中藥飲片五味的檢驗(yàn)結(jié)果(均數(shù))

表7顯示，(1)生曬參、淫羊藿、制附子、吳茱萸等五味的檢測(cè)結(jié)果與《藥典》出入較大，其中尤其是淫羊藿、制附子以苦為主，應(yīng)予糾正;(2)知母、黃柏、生梔子、生大黃、苦參、生黃芪等五味的檢測(cè)結(jié)果與《藥典》近似，但程度上有所細(xì)化。

2．3 小復(fù)方五味的檢驗(yàn)結(jié)果

表8顯示，6張小復(fù)方五味的檢驗(yàn)結(jié)果;表8顯示，轉(zhuǎn)換為藥性評(píng)價(jià)用語(yǔ)。

2．4 中藥有效組分五味的檢驗(yàn)結(jié)果

表7 10個(gè)中藥飲片的五味與《藥典》比較

表8 6張小復(fù)方五味的檢驗(yàn)結(jié)果(均數(shù))

表9 6張小復(fù)方的五味

表10、11顯示，大黃酚未保留大黃的苦味，大黃素幾乎未保留大黃的苦味，菝葜皂苷元未保留知母苦味。

表10 7個(gè)中藥有效組分五味的檢驗(yàn)結(jié)果(均數(shù))

表11 7個(gè)中藥有效組分的五味及其與其對(duì)應(yīng)飲片對(duì)照

3 討論

3．1 中藥五味的重要性

五味是中藥藥性的核心內(nèi)容，在指導(dǎo)臨床用藥方面發(fā)揮著重要的作用;而且單味中藥或復(fù)方水煎劑的五味口感，對(duì)于患者的情緒、食欲、胃氣等有較大影響，直接關(guān)系到醫(yī)從性和療效，因此中藥五味為歷代醫(yī)家所重視。

3．2 根據(jù)中藥實(shí)際判定五味

一般認(rèn)為，歷代中藥五味的判斷來(lái)自2個(gè)方面［3、4］，其一是通過(guò)品嘗得知。如“入口則知其味”(《神農(nóng)本草經(jīng)百種錄》)，這是藥物的真實(shí)滋味，也是中藥五味檢驗(yàn)的主要來(lái)源;其二是概括中藥的功能。如《本草備要》記載:“凡藥酸者能澀能收，苦者能泄能燥能堅(jiān)，甘者能補(bǔ)能和能緩，辛者能散能潤(rùn)能橫行，咸者能下能軟堅(jiān)，淡者能利竅能滲泄，此五味之用也。”引申出去，葛根本無(wú)辛味，但因其能發(fā)散解表，因而有記載葛根味“辛”。但是，鑒于某味藥物的口感可能與其功能存在差異，以及一藥往往有多種功能，因而不顧藥物的實(shí)際口感而擬定其“五味”會(huì)造成混亂，是不合理的，應(yīng)予糾正。

3．3 建立中藥五味檢驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化

造成歷代對(duì)某些中藥五味刻畫(huà)差異的主要原因之一是缺乏標(biāo)準(zhǔn)化五味檢驗(yàn)方法，集零散記錄而成。因此，建立中藥五味檢驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化方法，并對(duì)《中華人民共和國(guó)藥典》所載中藥予以重新檢驗(yàn)是必要的。

3．4 標(biāo)準(zhǔn)化中藥五味的檢驗(yàn)方法

我們初步建立的方法，包括了如下一些基本要素:(1)采用按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)制備的中藥飲片;(2)中藥飲片采用標(biāo)準(zhǔn)水煎工藝，以模擬臨床用藥實(shí)際;(3)被試各中藥飲片采用相同劑量和濃度;(4)采用五味標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照;(5)試驗(yàn)人員的培訓(xùn);(6)盲法;(7)同步檢驗(yàn)多味中藥飲片等被試品并比較與對(duì)照;(8)采用計(jì)量化檢驗(yàn)方法。這些要素對(duì)于準(zhǔn)確檢驗(yàn)和刻畫(huà)中藥五味是必要的。

3．5 關(guān)于被試中藥飲片、小復(fù)方和中藥有效組分的五味

(1)本研究刻畫(huà)了知母、黃柏、生梔子、生大黃、苦參、生黃芪、生曬參、淫羊藿、制附子、吳茱萸的五味，其中部分與《藥典》存在差異，這可能與古今藥物的品種差異與演變、炮制與否、咀嚼生藥藥材與品味水煎劑等不同有關(guān)。鑒于生藥和藥材的鑒定與臨床普遍采用標(biāo)準(zhǔn)炮制飲片不同，因此可以分別選用對(duì)應(yīng)的檢驗(yàn)方法;(2)鑒于目前臨床上大多采用中藥復(fù)方水煎劑，因此檢驗(yàn)中藥復(fù)方的五味具有實(shí)用價(jià)值;(3)鑒于大多中藥含有不同有效組分，提取方法不同，其構(gòu)成和得率還會(huì)存在差異。因此，準(zhǔn)確刻畫(huà)所提取有效組分的五味，對(duì)于其療效與對(duì)應(yīng)中藥飲片的比較，以及使有效組分的中藥化是必要的。

［1］鄧中甲主編．方劑學(xué)［M］．七版．北京:中國(guó)中醫(yī)藥出版社，2008．

［2］國(guó)家藥典委員會(huì)．中華人民共和國(guó)藥典［S］．北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2005．

［3］李衛(wèi)民，鄧中甲．試論中藥五味理論［J］．時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2008，19(2):489-490．

［4］彭評(píng)志．中藥五味的研究現(xiàn)狀與展望［J］．傳統(tǒng)醫(yī)藥，2009，18(14):73-74．

Establishing a standard verification method for Five Flavors of Chinese medicine

GUAN Dong-yuan，F(xiàn)ANG Zhao-qin△，PAN Zhi-qiang，LU Wen-li，
LIU Xiao-mei，LIANG Chao，WU Zhong-hua，GOU Wei(Shanghai University of Traditional Chinese Medicine，Shanghai201203，China)

Objective:To explore and establish experimental detecting method for the five flavours of traditional Chinese drugs．Methods:By the synchronic and blind method，ten trained experimental persons taste，grade and get the synthetic evaluation from ten decoction pieces(such as Huangbai，etc．)，six Chinese herbal formula(like Huanglian Jiedu Decoction，etc．)，and seven active Chinese herbal ingredients(like Berberine，etc．)Thus，studying and establishing detecting method for the five flavours of traditional Chinese drug．Results:(1)The detecting result of the five flavours ofthe decoction pieces(such asHuangbai， Zhizi， Kushen， Shengshaishen， Zhimu， Shengdahuang，Shenghuangqi，and Zhiwuzhuyu)largely approximate the delineation in《Pharmacopoeia of the People’s Republic of China》(2005)and have a better discrimination．Apart from them，individual medicine(like Yinyanghuo and Zhifuzi)have bitter taste primarily，but pungent taste，sweet taste．(2)It is the first time that the five flavours of the six Chinese herbal formula(Huanglian Jiedu Decoction，Liaoben Zishen Pill，Dahuang Fuzi Decoction，Zuojin Pill，Shenfu Decoction and Wuzhuyu Decoction)have a good description．(3)The five flavours of the active Chinese herbal ingredients(Berberine，chrysophanol，emodin，jasminoidin，timosaponin，icariin and myoctonine)are firstly inscribed and similar to corresponding decoction pieces，excepting chrysophanol and timosaponin．Conclusion:By this method，the five flavours of traditional Chinese drug(Chinese herbal formula，Chinese herbal formula ，the active Chinese herbal ingredients)can be detected and quantified accurately，it is beneficial to have the existing traditional Chinese medicine confirmed and have the contemporary new traditional Chinese medicine medicine get a standard research and development

traditional Chinese drug;five flavours;drug property;technology;standard;the active Chinese herbal ingredients

R285．1

B

1006-3250(2011)12-1333-03

上海市教育委員會(huì)科研創(chuàng)新重點(diǎn)項(xiàng)目(09ZZ127)

2011-06-02

管冬元(1969-)，男，湖南人，副教授，醫(yī)學(xué)博士，從事辨證論治基礎(chǔ)研究。

△通訊作者:方肇勤(1955-)，男，上海人，教授，博士研究生導(dǎo)師，醫(yī)學(xué)博士，從事辨證論治基礎(chǔ)研究，Tel:021-51322115，E-mail:zqfang@sh163．net。