王 斌 李旭廷 曹 良 黃 偉 龔 雪

（1 四川省畜牧科學研究院，四川省成都市 610066；2 四川鼎尖動物藥業(yè)，四川省成都市 610100）

四川德陽某豬場發(fā)酵床飼養(yǎng)育肥豬200頭，2011年1月10日，一棟圈內(nèi)有十幾頭3月齡育肥豬出現(xiàn)食欲減退，拉黃色稀糞。次日糞便變?yōu)榧t褐色，內(nèi)有大量脫落的腸粘膜，并有3頭死亡。畜主采用了痢菌凈注射液進行治療，無明顯效果，發(fā)病豬和死亡豬數(shù)量繼續(xù)增加，病情蔓延至整棟豬舍，患豬出現(xiàn)采食量下降和腹瀉，病豬拱背，皮膚彈性減退，日漸消瘦，虛弱無力，口、鼻、兩耳輕度紫紺，截止2011年1月17日，死亡豬20余頭。

1 解剖病變

筆者對發(fā)病和死亡豬只進行臨床解剖，主要病變位于消化道：盲腸漿膜大量米粒到粟粒大小的白色結(jié)節(jié)，腸粘膜潰瘍，局部淋巴結(jié)腫大?；啬c、結(jié)腸腸管內(nèi)有多個血凝塊，腸壁增厚、腫脹，呈出血性腸炎病變。

2 臨床診斷

該豬場豬只于40日齡進行了豬瘟疫苗的免疫，之后未進行驅(qū)蟲和其它疫苗的免疫，根據(jù)臨床癥狀、解剖病變及痢菌凈治療無效，初步診斷為腸道寄生蟲和胞內(nèi)勞森氏菌混合感染。

3 實驗室診斷

3.1 寄生蟲卵檢查

采集腸道糞便，用鹽水漂浮法收集蟲卵，進行顯微鏡檢。

3.2 螺旋體檢查

取腸粘膜直接涂片，加一滴生理鹽水，暗視野顯微鏡下觀察。

3.3 豬瘟、藍耳病抗體檢查

耳緣靜脈采集病豬血液并分離血清，用武漢科前的豬瘟、藍耳病ELISA抗體檢測試劑盒對分離的8頭豬只的血清進行抗體效價測定，方法和判定標準參照試劑盒說明書。

3.4 胞內(nèi)勞森氏菌PCR檢測

采集兩份糞便，參照Suh D K等[1]方法設計一對引物：

P15’-GCAGCACTTGCAAACAAT AAACT-3′

P25’-TTCTCCTTTCTCATGTCCC ATAA-3′

引物由上海生工生物工程技術(shù)服務有限公司合成。糞便DNA的提取及PCR反應條件參照參考文獻[1]，最后取PCR產(chǎn)物10 μL于1%瓊脂糖凝膠中電泳，紫外燈下觀察結(jié)果，并拍照。

4 結(jié)果與分析

4.1 寄生蟲檢查結(jié)果

顯微鏡視野下可見大量橢圓形的蟲卵，卵內(nèi)有多個胚細胞。最終結(jié)合病理變化和顯微鏡檢結(jié)果確診為豬結(jié)節(jié)蟲感染。

4.2 螺旋體檢查結(jié)果

鏡檢多個腸粘膜組織涂片，均未發(fā)現(xiàn)螺旋體。

4.3 抗體檢查結(jié)果

根據(jù)豬瘟抗體判定標準，OD630值≥0.35，判為陽性，OD630值＜0.35，判定為陰性。結(jié)果顯示8頭豬的血清全部呈陰性。藍耳病抗體判定標準，OD630值＞0.42判定為陽性，OD630值＜0.38判定為陰性，OD630值介于0.38到0.42之間判定為可疑。結(jié)果顯示8頭豬的血清有6份為陽性，2份可疑，且陽性樣本OD630值為0.42的 2～3倍。

4.4 PCR檢測胞內(nèi)勞森氏菌結(jié)果

兩份糞便病料均在210 bp處擴增出與預期大小相符的目的條帶，見圖1。

圖1 胞內(nèi)勞森氏菌特異性序列PCR檢測結(jié)果

實驗室檢測結(jié)果表明，該豬場存在較為嚴重的寄生蟲感染和胞內(nèi)勞森氏菌感染，豬瘟疫苗免疫失敗，且感染了豬藍耳病病毒。

5 防治方案

根據(jù)診斷結(jié)果，采用以下治療方案：對尚有食欲的豬在飼料中添加120 ppm泰樂菌素和4 ppm伊維菌素治療，連用5天，停藥1天，再繼續(xù)用3天。無食欲豬肌肉注射泰樂菌素注射液和伊維菌素注射液，一日2次，連用3天，同時飲水中添加葡萄糖和鹽。采用此方案治療后，病情得以控制，除嚴重血痢患豬無法治愈死亡外，其余豬只逐漸康復。

6 討論

發(fā)酵床養(yǎng)豬因環(huán)保、低能耗、低成本，在國內(nèi)掀起了一股發(fā)酵床養(yǎng)豬的熱潮，但在生產(chǎn)實踐中，仍然存在一定的問題，尤其是在疾病的防治方面。田浪[2]等研究發(fā)現(xiàn)，微生態(tài)發(fā)酵床內(nèi)含有多類致病性細菌，對豬的健康構(gòu)成潛在威脅。文章中發(fā)病豬場采用發(fā)酵床養(yǎng)殖，但未進行驅(qū)蟲，導致寄生蟲在場內(nèi)不斷的循環(huán)傳播，造成疾病暴發(fā)。腹瀉是發(fā)酵床養(yǎng)豬中常見的疾病，也是較難控制的疾病。因為病豬的糞便含大量病原微生物，通過熱發(fā)酵不能將其全部殺滅，且發(fā)病時無法進行徹底消毒，易造成病原微生物在場內(nèi)的擴散。

解剖癥狀和顯微鏡檢表明該豬場寄生蟲感染嚴重，但單純的寄生蟲感染并不容易造成如此高的死亡率，通過臨床和實驗室診斷，表明胞內(nèi)勞森氏菌是造成血痢的主要病因。在臨床上該病很容易被誤診為豬痢疾，采用痢菌凈治療而導致治療失敗。胞內(nèi)勞森氏菌在我國豬場臨床感染率較高，常表現(xiàn)為慢性感染，豬群生長緩慢，飼料報酬下降。本病例為典型的急性感染，發(fā)病急、死亡率高，盡管通過藥物治療最后得以控制，但仍對豬場造成了嚴重損失。因此對于該病應重在預防，一旦發(fā)病，應及早采用敏感藥物進行治療。

從抗體檢測結(jié)果可知該豬場的豬瘟疫苗免疫失敗，存在豬瘟感染風險，且藍耳病病毒抗體異常高，提示已經(jīng)感染了藍耳病病毒。

小型散養(yǎng)育肥豬場在我國養(yǎng)豬行業(yè)中占了很大比例，筆者近年走訪了四川地區(qū)一些散養(yǎng)場，很多畜主缺乏疾病預防觀念，飼養(yǎng)管理技術(shù)落后，導致疫病多發(fā)。筆者認為，散養(yǎng)豬場存欄數(shù)量少，疫病防控壓力相對于規(guī)模豬場要小得多，但養(yǎng)殖戶也必須掌握基本的飼養(yǎng)管理和防疫技術(shù)，只有建立養(yǎng)重于防、防重于治的理念，才能保障小規(guī)模飼養(yǎng)場的健康發(fā)展。

[1]Suh D K,Lym S K,Bae Y C,et al.Detection of Lawsonia intracellularis in diagnostic specimens by one-step PCR.J Vet Sci,2000,1 (1)：33-37.

[2]田浪,廖黨金,萬昭軍，等.養(yǎng)豬發(fā)酵床中主要致病菌鑒定及致病性研究.當代畜牧， 2010（4） ：13-15.