阮時珍 李月桂 王鵬霖 陳 強 李水添 黃巧珍 江旺坤 黃煥文

(1.福建省寧德市華林微生物技術(shù)研究所,寧德 352100;2.廣東省梅州市華芝源食用菌推廣站,梅州 514788)

我國是世界上第一個成功地大批量人工培養(yǎng)北蟲草的國家。自1986年開始,吉林省蠶業(yè)科學(xué)研究所就探索用柞蠶、桑蠶蛹培育與天然北蟲草形態(tài)特征相一致的子座,并探索出規(guī)?；嘤纳a(chǎn)模式。[1]沈陽市農(nóng)科所等單位于1986—1987年在大米培養(yǎng)基和柞蠶蛹上接種北蟲草菌,均獲得完整的子座。經(jīng)檢測和臨床研究證實,人工培育的北蟲草具有和野生蟲草相似的化學(xué)成分、藥理作用及臨床療效,完全可以作野生蟲草的替代品,用于醫(yī)療及保健等領(lǐng)域。

北蟲草傳統(tǒng)栽培采用瓶栽,勞動強度大,產(chǎn)量低。近年來,寧德市華林微生物技術(shù)研究所與廣東省梅州市華芝源食用菌推廣站生產(chǎn)基地合作,經(jīng)多年攻關(guān),業(yè)已形成較為成熟的具低成本、高工效、便于推廣等特點的盆栽北蟲草技術(shù)。第一潮轉(zhuǎn)化率平均達(dá)55%以上,子實體的形態(tài)、色澤接近于天然北蟲草產(chǎn)品,品質(zhì)優(yōu)良。

1 北蟲草的生活條件

1.1 營養(yǎng) 北蟲草為兼性腐生菌。營養(yǎng)生理實驗表明,以甘露醇為碳源,牛肉膏為氮源時,菌絲生長既快又好。北蟲草可用多種昆蟲的蛹和幼蟲或大米飯培育,在以大米飯為基本成分,添加動物性氮源 (如蠶蛹粉),使之營養(yǎng)更為豐富時,形成子實體快而多。

1.2 溫度 北蟲草孢子釋放適溫為22～26℃。菌絲在8～30℃能發(fā)育生長,最適溫度為18～25℃。8～15℃生長較慢,26～30℃菌絲生長快,但長勢弱;30℃以上菌絲生長慢或不能生長。菌核形成的適宜溫度10～20℃,子實體形成和生長發(fā)育溫度為10～25℃,適溫為18～23℃。北蟲草培育應(yīng)保持恒溫管理,只在原基分化期才給予較大的溫差刺激。

1.3 濕度 培養(yǎng)基含水量60%～63%適于菌絲生長。菌絲培養(yǎng)期間,室內(nèi)相對濕度應(yīng)保持在65%～68%;子實體生長期間,室內(nèi)濕度應(yīng)提高到90%～95%。

1.4 光照 菌絲在黑暗條件下比有散射光時生長旺盛。原基形成和子座生長需要較明亮的散射光,要求保持光照度在100～200勒克斯以上。在完全黑暗的情況下,氣生菌絲較旺盛,出現(xiàn)冒菌絲現(xiàn)象;而日夜連續(xù)光照則會阻礙子座的分化進程。

1.5 空氣 子實體生長期間要保持良好通風(fēng),室內(nèi)二氧化碳濃度含量超過1%,則不能正常分化子座,而往往出現(xiàn)密度很大、子座纖細(xì)的畸形子實體。

1.6 酸堿度 菌絲在pH 5～8范圍內(nèi)均能生長,以5.5～6.8為適宜。

2 栽培管理技術(shù)

2.1 栽培季節(jié) 北蟲草從10月至翌年5月均可進行生產(chǎn),一般可安排2批次生產(chǎn)。由于溫度高于30℃時蟲草菌絲會出現(xiàn)自溶現(xiàn)象,所以采收期盡量不要安排在6月份以后。

1.從被動到主動，是社區(qū)自治的前提。社區(qū)居民要有主人翁的意識，通過爭當(dāng)社區(qū)精英、熱心腸，在做事的過程中帶動更多的人參與，形成差序帶動格局。在主動服務(wù)的過程中形成內(nèi)生獎懲機制，評選出“熱心阿姨”“好大哥”等光輝形象，對那些習(xí)慣于搭便車，享受了服務(wù)不干事、不配合的家庭或個人要透明、要曝光。

2.2 工藝流程 制備栽培種→配制培養(yǎng)基→滅菌→冷卻→接種→上架發(fā)菌→出草管理→采收貯存。

2.3 菌種生產(chǎn) 人工栽培北蟲草,菌種是關(guān)鍵。為了獲得優(yōu)良菌株,生產(chǎn)者可從食用菌科研機構(gòu)或有信譽的菌種專業(yè)生產(chǎn)廠家購買菌種進行對比,一般說,具有結(jié)實性的優(yōu)良菌株在培養(yǎng)基表面易分泌桔黃色物質(zhì),菌絲體在光照的刺激下,也易變成桔黃色或橙黃色,若培養(yǎng)基表面,有紫色或紫紅色分泌物,則表明該菌種已嚴(yán)重退化,應(yīng)棄之不用。生產(chǎn)前需作出草試驗,以保證菌種確實可用。

(1)可供選擇的母種培養(yǎng)基。①馬鈴薯200克(煮沸20分鐘取汁),葡萄糖20克,瓊脂18～20克,磷酸二氫鉀2克,硫酸鎂3克,蛋白胨5克,水1升。②馬鈴薯和北蟲草培養(yǎng)基各100克 (煮沸20分鐘取汁),葡萄糖20克,瓊脂18～20克,硫酸鎂2克,蛋白胨6克,磷酸二氫鉀 3克,水1升。③葡萄糖10克,蛋白胨10克,蠶蛹粉12克,全脂奶粉10克,磷酸二氫鉀3克,硫酸鎂2克,維生素B120毫克,瓊脂20克,水1升。

(2)母種的生產(chǎn)。采用上述配方配制培養(yǎng)基,裝入試管,高壓1.5兆帕滅菌30分鐘,擺斜面冷卻后,在無菌條件下接種。挑選菌絲白色,粗壯濃密,呈匍匐狀緊貼培養(yǎng)基生長,邊緣整齊,無明顯絨毛狀白色氣生菌絲的優(yōu)良菌種。接種后的試管置23～25℃恒溫箱避光培養(yǎng)。接種后前3天,每天對光檢查,棄去污染試管,待菌絲長滿斜面后使用。

(3)液體菌種制作。培養(yǎng)基配方:①馬鈴薯200克,葡萄糖20克,全脂奶粉5克,磷酸二氫鉀3克,蛋白胨3克,水1升;②玉米粉30克,葡萄糖20克,蛋白胨1克,酵母粉0.5克,磷酸二氫鉀2克,硫酸鎂1克,水1升;③葡萄糖10克,蛋白胨5克,蠶蛹粉10克,全脂奶粉10克,磷酸二氫鉀1克,硫酸鎂2克,水1升,pH值自然。

將配制好的液體培養(yǎng)液,裝入1 000毫升的三角瓶中,裝瓶量為500～700毫升,高壓1.5兆帕滅菌30分鐘,冷卻后,在無菌條件下接入3～4片0.5平方厘米大小的母種塊,使之浮在液體培養(yǎng)液面上萌發(fā)吃料,在22～25℃下,靜置培養(yǎng)48小時,觀察有無雜菌。挑選無污染的菌種瓶置于每分鐘90～120轉(zhuǎn)的電磁搖床上進行培養(yǎng)。在溫度23～25℃下培養(yǎng)5～7天,待培養(yǎng)液中出現(xiàn)大量菌絲球且在靜置條件下培養(yǎng)液明顯分層時即可停止培養(yǎng)。培養(yǎng)好的液體菌種需及時用于生產(chǎn)。

2.4 大米培養(yǎng)基配制 以直徑為35厘米,高12厘米的普通塑料盆為例。每盆裝入130克大米,蠶蛹粉3.5克,磷酸二氫鉀4克,葡萄糖4克,維生素B110毫克,水160毫升。

一般宜用質(zhì)量低的粳米類作培養(yǎng)基,按配方稱量好所有原料,在容器中備好潔凈的水。先將磷酸二氫鉀、葡萄糖、維生素B1溶于水中,攪拌均勻,使其完全溶解,測量pH值,使溶液pH達(dá)到7～8。如過高或過低,可分別用1N(當(dāng)量)濃度的鹽酸和1N(當(dāng)量)濃度的氫氧化鈉調(diào)節(jié)。每盆先裝入大米130克,再加入蠶蛹粉3.5克,然后再加入160毫升的輔料溶液,搖勻后用聚丙稀塑料膜封住盆口,用牛筋繩扎緊,上灶滅菌。采用常壓灶進行滅菌,在100℃,維持8～10小時,悶灶4～6小時后,出灶,進冷卻室冷卻。

2.5 發(fā)菌及出草管理 滅菌后,盆料冷卻5～8小時至28℃以下后,在無菌條件下,每盆接入液體菌種30～50毫升,用接種器均勻地噴到整個料面。將接種后的盆料排放在發(fā)菌出草架上,盆的擺放密度一定要適宜,以利通風(fēng)透氣。發(fā)菌階段溫度控制在18～20℃,濕度在60%～65%,黑暗條件下經(jīng)過9～15天,菌絲即發(fā)滿全盆,此時可以轉(zhuǎn)入出草管理。

(1)催蕾。在催蕾過程中,需控制好出草室的光照、溫度、濕度等。要想使原基分化快速、整齊,首先是要加強光照,光照時間每天保持14～16小時。室內(nèi)溫度一般控制在18～22℃,但須拉大晝夜溫差,范圍掌握在4～8℃。濕度不可過大,控制在65%～70%,以免氣生菌絲徒長而影響分化;另外,還需把封口膜打開一個小口,以保證盆內(nèi)外空氣流動順暢。管理得當(dāng),3～5天后菌絲即可由白色轉(zhuǎn)變?yōu)榻埸S色,隨后在培養(yǎng)料表面逐漸形成桔黃色的菌絲團,再經(jīng)約7天,菌絲團快速分化,形成大量桔紅色小原基。原基分化完成后,催蕾過程即告結(jié)束。

(2)子實體生長管理。當(dāng)原基分化完成后,需將光照時間縮短至每日12小時,料面受光強度需保持均勻,以免子實體在盆內(nèi)彎卷生長,并適時調(diào)整室內(nèi)空氣相對濕度,濕度管理不當(dāng)易致氣生菌絲徒長。初期將濕度控制在80%～85%,待子實體

長度超過周圍菌絲表面后,將空氣相對濕度增大到90%。同時加強空氣流通,逐漸地開大封口膜的通氣口。

2.6 采收與加工 當(dāng)子實體長至5～8厘米長時,子座表面有桔黃色粉狀物出現(xiàn),即表示北蟲草已成熟,可以采收。采收時,用帶彎頭的小鏟刀,小心地將子實體從基部鏟下。采下的北蟲草按標(biāo)準(zhǔn)分級,用干燥設(shè)備烘烤,烘干后及時銷售,保存。北蟲草正品標(biāo)準(zhǔn),一般是粗細(xì)均勻,長度在5厘米以上,顏色桔黃或金黃色,水分低于13%,無邊皮碎料。應(yīng)放在干燥涼爽處避光保存。