李巨銀 胡新崗 魏 寧 江蘇畜牧獸醫(yī)職業(yè)技術學院 225300

呼腸孤病毒是1954年Ramos和Sbani等先從健康兒童的糞便中分離出來的，1975年國際病毒命名委員會定名為呼腸孤病毒科(Reoviridae)。呼腸孤病毒科是一類無囊膜雙股分節(jié)段的RNA病毒。包括9個屬，其中與獸醫(yī)學有關的是正呼腸孤病毒屬，環(huán)狀病毒屬和輪狀病毒屬，廣泛分布于自然界。禽呼腸孤病毒感染引起了世界各國養(yǎng)禽生產嚴重的經濟損失，2002年波蘭學者報道了與吸收障礙綜合癥有關的雞腸型呼腸孤病毒以及以肝脾腎有壞死性病灶為特征的壞死型。該病以5-7周齡肉用雞多發(fā)，肉用雞的發(fā)病率可達100%，死亡率為1%-3%。近年來，隨著禽呼腸孤病毒的感染、流行日趨增加和臨床疾病形式的不斷多樣化，防制禽類呼腸孤病毒感染的難度不斷增大。為有針對性地防制禽類呼腸孤病毒感染，為我國禽類呼腸孤病毒所致疫病的防治提供理論依據(jù)，現(xiàn)將其綜述如下。

1 病原研究

1954年，F(xiàn)ahey和Craw ley首次從有慢性呼吸道疾病的雞呼吸道內分離到禽呼腸孤病毒。1972年，Walker等人通過電鏡觀察定名為呼腸孤病毒。1976年，hwaitz首次報道了蛋雞的呼腸孤病毒感染，F(xiàn)ujskai等人在1969年從火雞分離到幾株呼腸孤病毒。1982年，Pgae首次報道了火雞的呼腸孤病毒感染。據(jù)報道，新西蘭(1987年)、印度(1988年)和波蘭(2000年)都分離到高致病性的雞源呼腸孤病毒。此外，意大利、荷蘭、巴西、阿根廷、法國、以色列、英國相繼報道了呼腸孤病毒感染。1984年有人用瓊擴法初步證實我國部分地區(qū)的雞場中有該病存在，1985年王錫坤證實了我國也有雞病毒性關節(jié)炎發(fā)生。1988年長春某雞場發(fā)生了與雞病毒性關節(jié)炎相似的雞病，后確定為病毒性關節(jié)炎病毒-禽呼腸孤病毒。同年，江西省某市也爆發(fā)了疑似呼腸孤病毒病，初步認為是禽呼腸孤病毒所致的病毒性關節(jié)炎。1992年陳士友從患關節(jié)炎病雞腸道內分離到一株禽呼腸孤病毒，定名為NAu-8902。1993年，陳士友等從外觀正常的雞胚中分離到一株AVR病毒株。1996年，南京農業(yè)大學趙振芬分離到一株無毒株。禽呼腸孤病毒很容易從禽源細胞培養(yǎng)物中分離。常用的細胞培養(yǎng)是禽原代細胞，包括雞胚成纖維細胞、肝、肺、腎、巨噬細胞和肇丸細胞。最常用的是雛雞腎細胞(2-6周齡)，用各種方法分離本病毒的比較結果表明，以雞肝細胞最敏感，其次為雞腎細胞。感染呼腸孤病毒的雞源LL易在雞胚內生長。初次分離，一般在接種后3-5天雞胚死亡，胚體因皮下出血而呈淡紫色。

2 病毒特性和結構特點研究

禽類呼腸孤病毒(Avina:oeviruses)為無囊膜，呈球形，雙層衣殼和二十面對稱的dsRNA病毒。粒子直徑約60-80nm，外層衣殼上有92顆中空的顆粒。在CsCI梯度中，感染病毒子的密度為1.29-1.30/ml，無感染性空衣殼為1.29-1.309/ml，病毒芯髓為1.44g/ml。純化病毒只含有RNA和蛋白質，平均含量分別為18.7%和81.3%。病毒在胞漿內復制，有時呈晶格排列。對熱、pH3和DNA代謝抑制物有抵抗力。70%乙醇和0.5%有機碘可滅活病毒。一般無血凝活性。另外它還具有獨特的生物學特性:

（l）無血凝活性，能誘導細胞融合和多數(shù)毒株對自然宿主具有致病性。

(2)血清學方法證實，禽類呼腸孤病毒各毒株之間具有共同的群特異性抗原(與哺乳類RoeV無交叉抗原)，但由于存在大量的交叉反應，有些群不能作為獨立的血清型，故禽類呼腸孤病毒只能以抗原亞型存在。

(3)通過對禽類呼腸孤病毒各代表株進行SDS一隊GE核酸電泳分析，禽類呼腸孤病毒的核酸電泳圖譜明顯有別于哺乳類呼腸孤病毒株，即使在禽類呼腸孤病毒株之間也存在明顯的多態(tài)性，但目前尚未發(fā)現(xiàn)這種差異與血清型及致病性相關。

3 流行病學

禽類呼腸孤病毒廣泛存在于自然界，現(xiàn)已從許多種鳥類發(fā)現(xiàn)該病毒。目前認為雞和火雞是唯一可引起關節(jié)炎或鍵鞘炎的自然或實驗宿主。同時認為不同品系的肉雞對該病的易感性稍有差別。蛋雞偶爾也有發(fā)生。家兔、倉鼠、大鼠、小鼠、豚鼠、鴿和金絲雀對該病的實驗性感染一般不敏感。南非、法國和以色列報道鴨中有一種病毒病，死亡率很高，表現(xiàn)為全身不適并伴有腹瀉?；记荩绕涫鞘芨腥镜挠g雞和番鴨，為同舍禽群的潛在傳染源。該病還可垂直傳播，但蛋傳播率很低。該病的傳播可分為水平傳播和垂直傳播兩種，水平的傳播主要是由雞間的直接或間接引起的。垂直傳播主要是通過雞蛋傳播。在生殖器官中也己證明有病毒存在，但經卵傳播率較低。病毒可在雞體保存活289天以上，并經腸道排出，隨糞便污染飼料和飲水。所以，帶毒雞是重要的傳染源。許多試驗表明，該病毒可從試驗的攻毒雞向非直接接觸的對照雞傳播，這可能是由呼吸道排出的病毒通過空氣傳播所致。該病的潛伏期因感染的途徑不同而有所差異，實驗接種2周齡雞表明，足墊接種為1天，肌肉、皮下、靜脈、竇內接種為11天，氣管接種為9天，接觸感染可達13天。經口和呼吸道接種為4天，各器官均可見到病毒，而接種后14-15天則大大減少，25天后除骨盆和鍵部有局限性病毒外，其他器官均未見到病毒。

4 診斷方法

動物在受到病毒感染后，體內產生抗體，如果能與相應的病毒粒子特異性地結合，使后者喪失感染力，這種抗體就稱為中和抗體，中和抗體一般使針對病毒的蛋白衣殼或囊膜抗原的，并不針對病毒粒子的內部成分。應用己知的病毒或病毒抗原，可以測知病畜體內中和抗體的存在及其效價。應用己知的抗病毒血清或中和性單克隆抗體，也可以進行病毒的鑒定，因此中和實驗也常用于新分離病毒株的鑒定，中和實驗具有高度的敏感性和免疫特異性，?？捎糜趥刹炱渌鍖W反應難以測出的病毒株之間的抗原差異。應用同一病毒不同型的毒株或者應用不同型的標準血清，即可測知相應抗血清或病毒的型別。進行中和實驗，首先要選擇實驗宿主。中和實驗的宿主系統(tǒng)主要有動物、雞胚、細胞三大類。由于大多數(shù)病毒可在組織培養(yǎng)細胞內生長、增殖并產生細胞病變，而應用組織培養(yǎng)細胞進行中和實驗，又遠較實驗動物和雞胚方便，結果比較穩(wěn)定一致，不存在個體差異問題，因此目前主要應用組織培養(yǎng)細胞進行中和實驗。近年來應用微量培養(yǎng)板上培養(yǎng)的單層細胞進行微量中和實驗，又比一般的試管法簡便的多，而且易于判定實驗結果，適于進行大量實驗。

5 防制

該病毒以水平和垂直方式傳播、分布廣泛以及具有較高抵抗力的特點，因此防制上存在一定難度，為此加強綜合防制和飼養(yǎng)管理顯得十分重要。一般性的綜合防制措施有：避免各種應激因素，提供全價飼料，加強禽舍消毒和衛(wèi)生管理。一般是對禽舍徹底清洗并用堿液和.05%有機碘作徹底消毒，以杜絕病毒的水平傳播。健康禽群尤應警惕防止引進帶毒雞(鴨)胚或污染病毒的疫苗，使用抗菌素控制細菌合并或繼發(fā)感染，尚無有效疫苗進行防疫時，發(fā)病初期注射自制高免卵黃抗體有一定效果。

免疫接種時合理選用疫苗和制定免疫程序，是預防效果成敗的關鍵因素。目前預防ARV感染可用的有弱毒苗和滅活苗兩種。由于各流行毒株存在血清型的差異，不同血清型之間不能提供交叉保護作用，故應選用同型疫苗。d1雛雞對致病性ARV最易感，只有在ZW才開始有抵抗力，正因有這一易感期，所以疫苗和接種程序應針對ld雛雞來提供免疫保護。為了解決好這一矛盾，目前采用的方法是，先用滅活疫苗，對開產前(2-3W)母雞進行預防接種，以保證雛雞體內在這一易感期有保護性的母源抗體存在，這樣不僅可防止疫苗毒經卵傳播而且對限制潛在的垂直傳播有重要作用。不過這種免疫力通常對同源性的血清型效果好。因此滅活苗往往由抗原性相似的幾株病毒制備，也可考慮應用當?shù)胤蛛x株制備疫苗。