董樹林 曲文玉 王立名 王蔓

臨床自發(fā)性流產(chǎn)或胚胎停止發(fā)育發(fā)病率約占妊娠率的3.6%～5.5%，因其發(fā)病機制尚未完全闡明，有學(xué)者認為可能與解剖異常、免疫失調(diào)、內(nèi)分泌紊亂、感染、染色體異常及基因多態(tài)性有關(guān)，臨床對此病的總體療效不太理想。

近些年通過對自發(fā)性流產(chǎn)或胚胎停止發(fā)育病例分析發(fā)現(xiàn)男性因素逐漸增多，特別是對男性精子的研究逐漸成為熱點。本文通過精子核蛋白組型嚴重異常病例及治療，總結(jié)對自發(fā)性流產(chǎn)及妊娠結(jié)局的研究對照僅供同行參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料統(tǒng)計2006～2009年我院男科門診就診38例精子核蛋白組型嚴重異常(組型轉(zhuǎn)換超過50%)。臨床上其配偶有2次以上孕早期自發(fā)性流產(chǎn)或胚胎停止發(fā)育。雙方檢查未發(fā)現(xiàn)其他異常陽性體征，包括雙方染色體檢查、免疫及感染項目檢查，男女生殖內(nèi)分泌檢查、血糖、甲功及婦科檢查。但這38例患者精液檢查發(fā)現(xiàn)精子核蛋白組型存在嚴重異常。其中9例精子核蛋白組型超過60%，29例介于50%～60%之間。

1.2 研究指標按照WHO技術(shù)規(guī)范采集和處理檢測精液標本，檢測精子核蛋白成熟度。

1.3 檢測方法將洗滌后精子固定于載玻片，以0.5 g/L苯胺藍-4%醋酸溶液染色5 min后洗滌、脫色、干燥后顯微鏡下至少觀察400個精子，計算頭部染成藍色精子數(shù)量，染成藍色精子為不成熟精子，計算不成熟精子的百分比(%)。

1.4 檢測原理精子成熟過程中，與精子核DNA結(jié)合的堿性蛋白發(fā)生組型轉(zhuǎn)換，富含賴氨酸殘基的組蛋白逐漸被富含賴氨酸和胱氨酸的魚精蛋白所取代，酸性條件下苯胺藍與賴氨酸殘基結(jié)合生成藍色化合物。從而指示富含賴氨酸殘基的蛋白質(zhì)存在，臨床上常以苯胺藍染色后藍染精子的百分率為精子核蛋白成熟度的評價指標，超過30%為組型異常。本研究把超過50%以上藍染的精子定為嚴重異常。

1.5 研究方法38例患者均以中藥為主治療方法進行干預(yù)，輔以抗氧化治療，并改善生活習(xí)慣及不良環(huán)境。臨床經(jīng)過以補腎益精、清熱利濕、輔以抗氧化治療(主要成分:何首烏、桑椹、枸杞子、菟絲子、五味子、黃精、杜仲、淫羊藿等)。定期檢測精子核蛋白，直至指標恢復(fù)或接近正常，理想值25%以下。治療過程中應(yīng)采取避孕措施，直至治療正常，也可以一定劑量藥物維持至下一次受精完成。

2 結(jié)果

2.1 38例患者中，29例經(jīng)過治療恢復(fù)至精子核蛋白組型30%以下。經(jīng)2次檢查精子核蛋白檢測結(jié)果正常范圍(精子DNA碎片檢測驗證為66%以上)，已有22例正常妊娠并且現(xiàn)已分娩，4例在孕期流產(chǎn)，3例失去聯(lián)系。

2.2 9例患者治療后核蛋白接近30%后有所反復(fù)，核蛋白比率在30%～40%之間波動。藥物維持治療，其中有7例妊娠(4例流產(chǎn)、3例正常分娩)，2例失去聯(lián)系。

3 討論

胚胎停止發(fā)育常發(fā)生于孕早期，隨著生育年齡的推遲，生活環(huán)境和方式的變化及工作壓力的增加，其發(fā)病率呈上升趨勢。但目前有關(guān)男性因素的發(fā)病機制研究比較局限。比較集中且已有定論的是男性染色體異常對胚胎的影響。本次特殊患者的探討在于對男性非遺傳因素的研究，即精子DNA的穩(wěn)定性，進行研究探討，為早期自發(fā)性流產(chǎn)及胚胎停止發(fā)育的臨床診斷與治療提供依據(jù)。

所選患者均有多次流產(chǎn)或胚胎停育史。檢查發(fā)現(xiàn)精子組型嚴重異常，不成熟核蛋白過多(排除男性其他異常及其配偶女性檢查未見其他異常)，經(jīng)過藥物治療干預(yù)并改善其他生活習(xí)慣直至核蛋白成熟度達到正常水平以下。連續(xù)監(jiān)測患者發(fā)現(xiàn)核蛋白恢復(fù)正常后，其配偶自發(fā)性流產(chǎn)或胚胎停育發(fā)生概率明顯下降，正常分娩率顯著提高，從而證明了精子核蛋白不成熟是導(dǎo)致自發(fā)性流產(chǎn)和胚胎停止發(fā)育的危險因素。更重要的是通過藥物治療途徑可以得到改善。

[1]熊承良，吳明章，周繼紅，等.人類精子學(xué).湖北科學(xué)技術(shù)出版社，2002:429-432.

[2]劉瑜，陳曉蘭，陳小蔓，等.孕早期自發(fā)性流產(chǎn)與胚胎停育男性因素病例對照研究.中國男科學(xué)雜志，2010，24(7).

[3]李濤國，褚勁松，吳明辛，等.不明原因自發(fā)流產(chǎn)婦女配偶射出精子核堿性蛋白組型的電泳分析.生殖醫(yī)學(xué)，1996，16(1):59-60.