王騰

本文于2010年發(fā)表在《Clinical Chemistry》雜志上。

利用母體血液中的胎兒DNA進(jìn)行21－三體的產(chǎn)前診斷是當(dāng)前的重點(diǎn)研究對象，本文給出了一種結(jié)合遺傳標(biāo)記與胚胎特異的表觀遺傳標(biāo)記的檢驗(yàn)方法。用亞硫酸鹽測序法在胎盤與母體血細(xì)胞中尋找在21號染色體上不同甲基化情況的標(biāo)記。然后用甲基化敏感性限制性內(nèi)切酶消化繼之以微流控?cái)?shù)字PCR分析來研究檢出的標(biāo)記。染色體劑量分析以比較表觀遺傳標(biāo)記與X染色體上的鋅指蛋白基因（ZFX）或Y染色體上的鋅指蛋白基因（ZFY）進(jìn)行。推定的 HLCS（holocarboxylase synthetase，羧化全酶合成酶）基因啟動(dòng)子在胎盤高甲基化，在母體血細(xì)胞中低甲基化。分析結(jié)果顯示，在整倍體與21－三體之間，HLCS與RASSF1A陽性結(jié)果數(shù)目比值有顯著性差異（P＝0.005，Mann－Whitney秩和檢驗(yàn)），HLCS與ZFY的陽性結(jié)果數(shù)目比值也有顯著性差異（P＜0.001，Mann－Whitney秩和檢驗(yàn)）。高甲基化的HLCS和ZFY基因座的染色體劑量比較能夠區(qū)別出21－三體和整倍體胎盤DNA。分析了整倍體胎兒的母親血漿24例與21－三體胎兒的母親血漿5例。除了1例以外全部的整倍體樣本都被正常地分類。結(jié)論是由于特異性的標(biāo)志物充足，大規(guī)模人群覆蓋應(yīng)該容易達(dá)到，從而表觀遺傳學(xué)的染色體劑量分析有相當(dāng)?shù)淖鳛?1－三體的非侵入性產(chǎn)前診斷手段的潛力。