董永和 邱敏 龐海 劉欣媛 武海軍 楊玉梅

青風(fēng)藤來(lái)源于防己科植物青藤及毛青藤的干燥藤莖[1，2]，含有清風(fēng)藤堿甲等多種生物堿，能祛風(fēng)通絡(luò)，治療風(fēng)濕骨痛，氣微，味苦[3，4]。以往研究已證實(shí)青風(fēng)藤制劑具有祛風(fēng)除濕、活血化瘀、溫經(jīng)止痛、免疫調(diào)節(jié)等作用，且毒性小，副作用少等優(yōu)點(diǎn)，但對(duì)其免疫調(diào)節(jié)功能文獻(xiàn)報(bào)道較少。本文主要觀察了青風(fēng)藤對(duì)小鼠非特異性免疫功能的影響，以期進(jìn)一步為青風(fēng)藤開(kāi)發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 藥品與試劑青風(fēng)藤提取物(每克提取物相當(dāng)于生藥1.4 g):青風(fēng)藤，加水煎煮二次，煎液濾過(guò)，濾液合并，靜置使沉淀，濾過(guò)，濾液濃縮，干燥。臨用時(shí)用蒸餾水配成所需濃度。醋酸地塞米松片，新鄉(xiāng)市常樂(lè)制藥有限責(zé)任公司生產(chǎn)，批號(hào)070114。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 青風(fēng)藤對(duì)非特異性免疫功能的影響-碳粒廓清法檢測(cè)小鼠單核巨噬細(xì)胞吞噬功能小鼠50只，雌雄各半，體重18～22 g，隨機(jī)分為5組:第1組，生理鹽水組;第2組，陽(yáng)性對(duì)照組，地塞米松0.004 g/kg;第3～5組，青風(fēng)藤大、中、小劑量組，分別為0.9 g/kg(相當(dāng)于生藥量1.26 g)、0.45 g/kg(相當(dāng)于生藥量0.63 g)、0.225 g/kg(相當(dāng)于生藥量0.315 g)。各組皆灌胃給藥，0.2 ml/10 g，1次/d，連續(xù)灌胃7 d。末次給藥1 h后，各組小鼠均尾靜脈注射印度墨汁(按1∶5稀釋)，立即計(jì)時(shí)，注射2 min、20 min用玻璃毛細(xì)吸管分別從眼眶內(nèi)眥靜脈叢準(zhǔn)確取血20 μl。將取得的血液加到2 ml的0.1%碳酸鈉溶液中，用721B型分光光度計(jì)在650 nm波長(zhǎng)處測(cè)定光密度(A值)，取0.1%碳酸鈉溶液校正零點(diǎn)。取血完畢，用頸椎脫臼法處死小鼠，剖開(kāi)小鼠腹腔，取其肝臟和脾臟，用濾紙吸干臟器血污，稱重，計(jì)算廓清指數(shù)K和吞噬指數(shù)α，以吞噬指數(shù)α值表示小鼠MΦ的吞噬功能。K=(lgA1-lgA2)/(t1-t2)(A1、A2分別代表注射墨汁2 min和20 min時(shí)的A值;t為采血時(shí)間)α=(K1/3)(W/WLS)(W是體重，WLS是肝脾和重)。

1.2.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)資料應(yīng)用SPSS 11.5進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

青風(fēng)藤提取物大劑量組能夠明顯抑制腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬百分率和吞噬指數(shù)，而中、低劑量組具有降低趨勢(shì)但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，(P＜0.05，＊＊P＜0.01)(見(jiàn)表1)。

表1 青風(fēng)藤提取物對(duì)小鼠單核巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響(±s，n=15)

表1 青風(fēng)藤提取物對(duì)小鼠單核巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響(±s，n=15)

注:與對(duì)照組比較*P＜0.05，＊＊P＜0.01

分組劑量(g/kg)廓清指數(shù)(K)吞噬指數(shù)(α)生理鹽水組0.03±0.015.67±1.09地塞米松組0.0040.01±0.01＊＊4.03±2.40*青風(fēng)藤提取物小劑量組0.90.02±0.015.40±0.85青風(fēng)藤提取物中劑量組0.450.02±0.014.95±1.39青風(fēng)藤提取物大劑量組0.2250.01±0.01＊＊4.38±2.23-*

3 討論

青風(fēng)藤是常用中藥，該藥藥理功效明確，化學(xué)成分穩(wěn)定，提取方法簡(jiǎn)單，臨床應(yīng)用廣泛，是一個(gè)很有醫(yī)用價(jià)值和開(kāi)發(fā)前景的中藥。目前對(duì)于青風(fēng)藤藥理作用的研究多集中在中樞神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)[5]和心血管系統(tǒng)。此外，青風(fēng)藤及青藤堿是很有研究?jī)r(jià)值和前景的天然戒毒藥物，它們對(duì)阿片類戒斷綜合征療效確切，而藥物本身無(wú)成癮性。對(duì)其抗嗎啡依賴作用及機(jī)理的深入研究，將有助于全面評(píng)價(jià)青風(fēng)藤和青藤堿在戒毒方面的應(yīng)用[6，7]。隨著對(duì)青風(fēng)藤有效成分提取分離、含量檢測(cè)以及藥理機(jī)制的深入研究，青風(fēng)藤及其有效成分在臨床將會(huì)得到更廣泛的應(yīng)用。

巨噬細(xì)胞的吞噬作用是機(jī)體維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的重要因素，是構(gòu)成非特異性免疫的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，也是機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答的基礎(chǔ)。大多數(shù)抗原經(jīng)巨噬細(xì)胞處理后，免疫原性會(huì)大大增強(qiáng)，從而刺激機(jī)體產(chǎn)生良好的免疫應(yīng)答[8]。青風(fēng)藤提取物能降低小鼠的單核-腹腔巨噬細(xì)胞吞噬和碳廓清能力。結(jié)果提示:青風(fēng)藤提取物具有降低小鼠非特異性免疫功能的作用。

[1]黃筑艷，張?jiān)?，周?青風(fēng)藤化學(xué)成分的研究(Ⅱ).中草藥，2009，40(2):193-196.

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[8]柳翰凌，康小紅.灌胃雙歧桿菌BB1對(duì)免疫低下小鼠非特異性免疫功能的影響.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)，2008，25(1):6-7.