雷 萍，張文雋，吳亞召，孫小娟，劉博文，黎 濤

（1.陜西省微生物研究所，陜西 西安 710043；2.陜西三原玉圓食用菌專業(yè)合作社，陜西 三原 713800）

巨大口蘑 （Tricholoma giganteum Massee）， 別名洛巴伊口蘑、大白口蘑，商品名為白色松茸、洛巴口蘑、金福菇等，是珍稀的食用菌品種，屬擔(dān)子菌亞門(mén)、層菌綱、傘菌目、白蘑科、口蘑屬，是熱帶地區(qū)的大型真菌，在非洲、南亞大陸和我國(guó)臺(tái)灣、香港、云南、福建、廣東等地自然分布[1]。

巨大口蘑營(yíng)養(yǎng)豐富，據(jù)分析每100克干品中含有蛋白質(zhì)27.56%、粗脂肪9.58%、總糖38.44%、粗纖維8.20%，其子實(shí)體肥厚脆嫩，味微甜而鮮美，耐貯性好，適于鮮銷(xiāo)與干制加工，深受市場(chǎng)青睬。通過(guò)對(duì)巨大口蘑Tsw－06的生物學(xué)特性進(jìn)行系統(tǒng)的研究，為其菌種生產(chǎn)、人工栽培提供了科學(xué)依據(jù)[2]。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

巨大口蘑Tsw－06菌種來(lái)自于陜西省微生物研究所微生物資源中心第三研究室。

1.2 培養(yǎng)基

1.2.1 母種培養(yǎng)基

采用綜合PDA培養(yǎng)基。

1.2.2 碳源測(cè)定基礎(chǔ)培養(yǎng)基

蛋白胨0.5%、KH2PO40.1%、MgSO40.05%、VB110 mg·L－1、瓊脂2%，pH自然。用蒸餾水配制。

1.2.3 氮源測(cè)定基礎(chǔ)培養(yǎng)基

葡萄糖 2%、 KH2PO40.1%、 MgSO40.05%、 VB110 mg·L－1、瓊脂2%，pH自然。用蒸餾水配制。

1.2.4 栽培料培養(yǎng)基

木屑78%、麥麩20%、蔗糖1%、石膏1%、石灰0.5%。

1.3 方法

1.3.1 菌絲對(duì)溫度的選擇試驗(yàn)

以綜合PDA培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，分別設(shè)置10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、40℃、45℃八個(gè)處理。采用平板培養(yǎng)法，接入巨大口蘑Tsw－06菌種后，培養(yǎng)6 d，以平板培養(yǎng)基上菌落直徑為菌絲生長(zhǎng)量的指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)重復(fù)5次，取其菌落直徑的平均值，比較菌絲生長(zhǎng)情況，選擇菌絲最適生長(zhǎng)溫度。

1.3.2 菌絲對(duì)pH值的選擇試驗(yàn)

以綜合PDA培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH值分別為4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0六個(gè)處理。采用平板培養(yǎng)法，接入巨大口蘑Tsw－06菌種后，于28℃下恒溫培養(yǎng)6 d，以平板培養(yǎng)基上菌落直徑作為菌絲生長(zhǎng)量的指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)重復(fù)5次，取其菌落直徑的平均值，比較菌絲生長(zhǎng)情況，選擇菌絲最適pH值。

1.3.3 菌絲對(duì)碳源的選擇試驗(yàn)

碳源測(cè)定基礎(chǔ)培養(yǎng)基7份，分別添加蔗糖2%、麥芽糖2%、乳糖2%、葡萄糖2%、甘露糖2%、淀粉2%、玉米粉2%。每個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)分別加入20 mL培養(yǎng)基，每組由5個(gè)平板組成，將巨大口蘑Tsw－06菌種接入制備好的平板中，于28℃下恒溫培養(yǎng)6 d，以平板培養(yǎng)基上菌落直徑作為菌絲生長(zhǎng)量的指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)重復(fù)5次，取其菌落直徑的平均值，比較菌絲生長(zhǎng)情況，選擇菌絲最適碳源。

1.3.4 菌絲對(duì)氮源的選擇試驗(yàn)

碳源測(cè)定基礎(chǔ)培養(yǎng)基6份，分別添加蛋白胨0.5%、酵母粉0.5%、 (NH4)2SO40.5%、NH4NO30.5%、麥麩0.5%、黃豆粉0.5%。每個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)分別加入20 mL培養(yǎng)基，每組由5個(gè)平板組成，將巨大口蘑Tsw－06菌種接入制備好的平板中，于28℃下恒溫培養(yǎng)6 d，以平板培養(yǎng)基上菌落直徑作為菌絲生長(zhǎng)量的指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)重復(fù)5次，取其菌落直徑的平均值，比較菌絲生長(zhǎng)情況，選擇菌絲最適氮源。

1.3.5 菌絲對(duì)培養(yǎng)基含水量的選擇試驗(yàn)

取烘干的栽培料 （原料均在60℃下烘干至衡重），分別按培養(yǎng)基含水量50%、55%、60%、65%、70%、75%配料，裝入30 mm×200 mm試管。每只試管裝入干料20 g，每組由10個(gè)試管組成，將巨大口蘑Tsw－06菌種接入制備好的試管中，于28℃下恒溫培養(yǎng)7 d，進(jìn)行菌絲生長(zhǎng)情況測(cè)定。實(shí)驗(yàn)重復(fù)5次，以菌絲在10個(gè)試管中平均生長(zhǎng)速度作為菌絲生長(zhǎng)量指標(biāo)，選擇菌絲最適培養(yǎng)基含水量。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同溫度對(duì)巨大口蘑Tsw-06菌絲生長(zhǎng)的影響

巨大口蘑Tsw－06菌絲體的生長(zhǎng)速度對(duì)溫度變化很敏感，菌絲生長(zhǎng)速度隨著溫度的升高而加快，在25℃和30℃均達(dá)到最大，然后又逐漸降低，結(jié)果見(jiàn)表1。

從表1中的數(shù)據(jù)可以看出，巨大口蘑Tsw－06菌絲在溫度10℃～40℃均能生長(zhǎng)，適宜生長(zhǎng)溫度為20℃～30℃，在45℃下基本不生長(zhǎng)，在溫度30℃生長(zhǎng)速度最快，但與溫度25℃不存在顯著性差異。

2.2 不同pH值對(duì)巨大口蘑Tsw-06菌絲生長(zhǎng)的影響

巨大口蘑Tsw－06菌絲體在不同的pH值下生長(zhǎng)情況見(jiàn)表 2。

表1 不同溫度對(duì)巨大口蘑Tsw-06菌絲生長(zhǎng)的影響

表2 不同pH值對(duì)巨大口蘑Tsw-06菌絲生長(zhǎng)的影響

從表2中的數(shù)據(jù)可以看出，巨大口蘑Tsw－06菌絲體在pH值4～8內(nèi)均能生長(zhǎng)，適宜生長(zhǎng)的pH值為5～6，在pH為9時(shí)基本不生長(zhǎng)，在pH值6時(shí)生長(zhǎng)速度最快，且與其它pH值相比達(dá)到極顯著性差異。

2.3 不同碳源對(duì)巨大口蘑Tsw-06菌絲生長(zhǎng)的影響

巨大口蘑Tsw－06菌絲體在不同的碳源下生長(zhǎng)情況見(jiàn)表3。

表3 不同碳源對(duì)巨大口蘑Tsw-06菌絲生長(zhǎng)的影響

從表3中的數(shù)據(jù)可以看出，巨大口蘑Tsw－06菌絲體在供試的7種碳源上均能生長(zhǎng)，生長(zhǎng)最慢的是乳糖，生長(zhǎng)速度低于CK；而生長(zhǎng)最快的是玉米粉，其次是淀粉，且菌絲濃密健壯，生長(zhǎng)勢(shì)旺盛。因此，巨大口蘑Tsw－06菌絲體生長(zhǎng)的最適碳源是玉米粉。

2.4 不同氮源對(duì)巨大口蘑Tsw-06菌絲生長(zhǎng)的影響

巨大口蘑Tsw－06菌絲體在不同的氮源下試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 不同氮源對(duì)巨大口蘑Tsw-06菌絲生長(zhǎng)的影響

從表4中的數(shù)據(jù)可以看出，巨大口蘑Tsw－06菌絲體在以黃豆粉為氮源的培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)最快，其次是麥麩和酵母粉，且菌絲濃密，生長(zhǎng)勢(shì)旺盛；在 (NH4)2SO4上不生長(zhǎng)。因此，巨大口蘑Tsw－06菌絲體生長(zhǎng)的最適氮源是黃豆粉。

2.5 培養(yǎng)基不同含水量對(duì)巨大口蘑Tsw-06菌絲生長(zhǎng)的影響

巨大口蘑Tsw－06菌絲體在不同的含水量下生長(zhǎng)情況見(jiàn)表5。

從表5中的數(shù)據(jù)可以看出，巨大口蘑Tsw－06菌絲體生長(zhǎng)的含水量范圍為55%～75%，含水量為50%時(shí)不生長(zhǎng)。較合適的含水量為70%～75%，在含水量70%時(shí)菌絲生長(zhǎng)速度最快。

3 討論

從試驗(yàn)結(jié)果可知，巨大口蘑Tsw－06生長(zhǎng)的最適溫度為25℃～30℃，最適pH值為6.0，最適碳源是玉米粉，最適氮源是黃豆粉，較合適培養(yǎng)基含水量為70%～75%。本項(xiàng)目研究的數(shù)據(jù)為巨大口蘑Tsw－06菌的菌種生產(chǎn)、栽培工藝的確定，提供了基本條件。

表5 不同含水量對(duì)巨大口蘑Tsw-06菌絲生長(zhǎng)的影響

對(duì)巨大口蘑Tsw－06菌絲生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)條件探索時(shí)發(fā)現(xiàn)，缺少碳源或氮源，菌絲生長(zhǎng)都很差，尤其是缺少氮源時(shí)，菌絲不生長(zhǎng)；巨大口蘑Tsw－06在以天然物質(zhì)玉米粉作碳源或以非動(dòng)物蛋白黃豆粉作氮源時(shí)，菌絲生長(zhǎng)速度最快，可能是這些大分子有機(jī)物水解后可以提供多種形式的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，同時(shí)這些有機(jī)物中可能含有一些生長(zhǎng)促進(jìn)因子，刺激菌絲生長(zhǎng)；而碳源為乳糖和氮源為 (NH4)2SO4時(shí)，菌絲生長(zhǎng)受到抑制。

[1]黃年來(lái).中國(guó)食用菌百科[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，1993.

[2]應(yīng)建浙，卯曉嵐，馬啟明.中國(guó)藥用真菌圖鑒[M].北京：科學(xué)出版社，1987.