肖小平，鄧發(fā)正，蔣國成，吳指揮，堯國福，皮燦輝

（1.廣州和仕康生物技術(shù)有限公司，廣州 510663；2. 吳川市燕來農(nóng)牧有限公司，廣東 吳川 524001）

0 引言

我國的養(yǎng)殖模式正在由散養(yǎng)模式向規(guī)模化養(yǎng)殖轉(zhuǎn)變，但是目前總體水平比較低，與發(fā)達(dá)國家相比，差距很大。例如國外1頭母豬一年能夠提供23頭肉豬上市，而我國只能提供15頭。這種差距發(fā)生的根本原因是我國豬群健康狀態(tài)不佳。而抗生素的過度使用造成豬群整體免疫力低下可能是導(dǎo)致豬群健康水平低下的主要原因之一。樊福好博士最近通過調(diào)查發(fā)現(xiàn)，我國豬群有接近60%處于機(jī)體中毒狀態(tài)[1]，并分析藥物的過度使用是導(dǎo)致中毒的重要原因。

在我國，長期將抗生素作為飼料添加劑，抗生素在畜禽疾病預(yù)防和促生長方面的確發(fā)揮過重要作用，但是抗生素的過度使用也造成了很多耐藥病原微生物的產(chǎn)生，而且抗藥菌出現(xiàn)的速度大大超過了抗生素的研發(fā)速度。有研究人員擔(dān)心在不久的將來，可能會面臨無抗生素可用的境地。另外，抗生素的濫用破壞了豬自身的免疫系統(tǒng)，使豬抵抗病原微生物的能力降低。同時，將抗生素作為飼料添加劑，藥物殘留對公眾的健康也存在潛在危害。歐洲早在2006年就開始全面禁止抗生素在飼料中添加，可以預(yù)測在未來幾年抗生素在我國飼料行業(yè)中的使用也會越來越嚴(yán)格，因此合理降低或取代抗生素的使用已成為飼料行業(yè)科學(xué)研究的熱點(diǎn)。

防御素是一類可殺死細(xì)菌、真菌或者病毒等病原微生物并且具有免疫調(diào)節(jié)作用的多肽。天然的防御素分布在從植物、低等動物到哺乳動物等幾乎所有的生物類群中，是生物長期與疾病斗爭中進(jìn)化而來的，也是其自身防御體系的重要組成部分。由于防御素的作用機(jī)理獨(dú)特，主要通過與病原微生物的膜結(jié)合，破壞膜結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致病原微生物死亡。因此，防御素的抗菌機(jī)制與抗生素不一樣，不容易產(chǎn)生耐藥性。另外，防御素在機(jī)體內(nèi)蛋白酶的作用下，能夠降解成氨基酸，被機(jī)體吸收。因此，防御素對環(huán)境沒有任何影響，在機(jī)體內(nèi)也不會殘留。正是由于防御素具有諸多優(yōu)點(diǎn)，受到越來越多研究人員的關(guān)注[2]。因此，開發(fā)基因工程防御素代替抗生素作為新型飼料添加劑，具有巨大的經(jīng)濟(jì)效益和現(xiàn)實(shí)意義。

本公司在多年研究的基礎(chǔ)之上，有針對性地克隆了多種哺乳動物的防御素基因，并通過基因工程技術(shù)轉(zhuǎn)化到酵母中進(jìn)行生產(chǎn)，得到基因工程防御素。本研究將基因工程防御素在規(guī)模化豬場作為飼料添加劑的替代品，在母豬和仔豬飼料中添加使用，觀察母豬的生產(chǎn)性能和仔豬的健康狀況，取得了良好效果，為將來防御素在畜牧行業(yè)大規(guī)模使用提供數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

防御素飼料添加劑由廣州和仕康生物技術(shù)有限公司提供，商品名為防御素H60。

1.2 試驗(yàn)動物與實(shí)驗(yàn)方案

實(shí)驗(yàn)在燕來農(nóng)牧有限公司豬場進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)分2個階段進(jìn)行。第1階段：選擇健康水平良好，年齡、體況、胎次相近的妊娠母豬（長白與大白二元雜交）48頭，隨機(jī)分成2組，其中實(shí)驗(yàn)組24頭，對照組24頭，每組3個重復(fù)，每個重復(fù)8頭母豬。仔豬為上述母豬與杜洛克公豬雜交所產(chǎn)三元雜交豬，共計546頭。實(shí)驗(yàn)組在日糧中添加基因工程防御素2 kg/t，從產(chǎn)前30 d開始使用，試驗(yàn)期42 d。實(shí)驗(yàn)期間所有母豬和仔豬用藥、免疫程序、管理按豬場原有方案實(shí)行。第2階段：選擇健康水平良好，年齡、體況、胎次相近的長大二元雜交妊娠母豬24頭，隨機(jī)分成2組，其中實(shí)驗(yàn)組12頭，對照組12頭，每組3個重復(fù)，每個重復(fù)4頭母豬。仔豬為上述母豬與杜洛克公豬雜交所產(chǎn)三元雜交豬，24頭雜交母豬共產(chǎn)仔286頭。其他飼養(yǎng)條件同第1階段。

1.3 觀測指標(biāo)

第1階段觀察對照組與實(shí)驗(yàn)組的總產(chǎn)仔數(shù)、窩產(chǎn)仔數(shù)、初生成活率、死胎率、弱仔率、木乃伊胎率。第2階段觀察仔豬初生窩重、初生均重、斷奶均重、日增重、發(fā)病率、斷奶成活率。

1.4 數(shù)據(jù)處理

運(yùn)用SPSS11．0統(tǒng)計軟件，做單因素方差分析，以P＜0．05作為有顯著性差異標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果分析

2.1 基因工程防御素對母豬生產(chǎn)性能的影響

從實(shí)驗(yàn)結(jié)果（見表1）可以看出，對照組初生死亡率為9．79%，實(shí)驗(yàn)組初生死亡率為4．92%，降低了49．74%，差異具有顯著意義（P＜0．05）；死胎率降低了48．94%，差異具有顯著意義（P＜0．01）；弱仔率降低48．64%，差異具有顯著意義（P＜0．01）；木乃伊胎率降低43．84%，差異具有顯著意義（P＜0．01）。由此可見，在母豬日糧中添加基因工程防御素，可以明顯提高初生仔豬成活率，降低弱仔率、木乃伊胎率、弱仔率。

2.2 基因工程防御素對仔豬初生窩重、初生均重、斷奶均重、日增重的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。實(shí)驗(yàn)組與對照組相比，初生窩重增加6．15%、初生均重增加6．79%，差異有顯著意義（P＜0．05）；斷奶均重增加14．39%，差異具有顯著意義（P＜0．01）；日增重增加19．97%，差異有明顯差異（P＜0．05）。由此可見，在母豬日糧中添加基因工程防御素，可以明顯增加小豬的初生重、斷奶均重、日增重。

2.3 基因工程防御素對仔豬健康水平的影響

實(shí)驗(yàn)階段仔豬的健康狀況見表3。實(shí)驗(yàn)組與對照組相比，仔豬發(fā)病率降低52．49%，差異有顯著意義（P＜0．01）；斷奶成活率提高4．40%，死亡率降低34．21%，差異有顯著意義（P＜0．05）。本實(shí)驗(yàn)中未出現(xiàn)其他病癥，仔豬整齊度高，精神狀態(tài)良好。由此可見，基因工程防御素能夠明顯提高仔豬的健康水平。

表1 基因工程防御素對母豬總產(chǎn)仔數(shù)、窩產(chǎn)仔數(shù)、初生仔豬成活率、死胎率、弱仔率、木乃伊胎率的影響

表2 基因工程防御素對母豬生產(chǎn)性能的影響

表3 基因工程防御素對仔豬健康水平的影響%

3 討論

防御素是生物體的天然免疫系統(tǒng)的重要組成成分之一[3]。在當(dāng)今耐藥菌層出不窮的現(xiàn)實(shí)背景下，防御素由于其獨(dú)特的抗菌機(jī)理，不易產(chǎn)生耐藥性[4]，因此對它的研究及應(yīng)用成為熱點(diǎn)，被認(rèn)為是抗生素的最佳替代品[5]。

防御素對于大腸桿菌、鼠傷寒沙門菌、埃氏細(xì)菌、白色念珠菌、單核細(xì)胞增多性李氏菌、豬鏈球菌、金黃色葡萄球菌等具有殺滅作用[6]。防御素對一些被膜病毒如HIV、皰疹病毒等有顯著抑制甚至殺滅作用[7]。除此之外，防御素還具有免疫調(diào)節(jié)的保健作用，能夠促進(jìn)B淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的分化，提高二者的數(shù)量和活性，增強(qiáng)母豬的抗病能力和提高抗體水平。

母豬生產(chǎn)過程中發(fā)生死胎、木乃伊胎、弱仔等情況，與母豬自身處于亞健康狀態(tài)有關(guān)。一般來說，母豬感染乙型腦炎、細(xì)小病毒病、偽狂犬病、藍(lán)耳病、豬瘟等疫病及寄生蟲等病原微生物容易引起母豬流產(chǎn)和木乃伊胎，造成仔豬成活率下降。燕來農(nóng)牧有限公司豬場在母豬的日糧中添加基因工程防御素2 kg/t，與對照組相比，木乃伊胎率、死胎率、弱仔率明顯下降，提高了母豬的生產(chǎn)性能，表明基因工程防御素對于母豬體況的改善作用已經(jīng)開始顯現(xiàn)，能夠在相當(dāng)程度上減少死胎、弱仔的出現(xiàn)幾率，為仔豬創(chuàng)造良好生存內(nèi)環(huán)境提供了一個基礎(chǔ)。

母豬的身體狀況與仔豬的初生重和成活率有密切關(guān)系，而且初生體重大的仔豬成活率高，初生體重小的仔豬成活率低。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)組仔豬的初生重和成活率明顯優(yōu)于對照組，仔豬斷奶重和斷奶成活率也相應(yīng)提高。同時，由于防御素能夠凈化母豬體內(nèi)病原微生物，提升其健康水平，改善精神狀態(tài)，從而使泌乳能力增強(qiáng)，母豬奶水更充足，這可能也是仔豬斷奶重增加的一個因素。

仔豬的健康水平與母豬健康狀態(tài)密切相關(guān)。從表2也可以看出，使用基因工程防御素以后，仔豬的健康水平明顯提高。影響斷奶前仔豬死亡的一個關(guān)鍵因素就是初乳中母源抗體IgG的含量不足，使新生仔豬免疫力低下易感染疾病而死亡[8]。張家崢等[9]經(jīng)過在實(shí)踐中探索，用給妊娠母豬加強(qiáng)免疫的方法來提高初乳的抗體滴度，可給仔豬提供良好的初始保護(hù)，能成功的使仔豬安全度過生命的前幾周。因此，仔豬的健康主要還是來源于母源抗體的保護(hù)。飼喂了基因工程防御素的母豬，體內(nèi)病原被殺滅，免疫力增強(qiáng)，抗體水平高，通過哺乳的方式傳遞到仔豬身上。因此，飼喂了基因工程防御素的母豬其所產(chǎn)仔豬不僅發(fā)病率低，而且斷奶成活率也高。

綜上，基因工程防御素在改善母豬妊娠過程中流產(chǎn)、死胎、弱仔的發(fā)生率，仔豬出生體重、斷奶體重等方面具有非常明顯的效果。就整體來說，防御素是通過殺滅母豬體內(nèi)病原微生物，調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)，提高免疫力來發(fā)揮作用的。因此，防御素可以在相當(dāng)程度上改善母豬的體況，提高其健康水平。

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