周 波 張春林 文 敏 焦 玲 (貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院人體解剖學(xué)教研室，貴州 貴陽(yáng) 550004)

我國(guó)帕金森病(PD)患病人數(shù)已超過200萬(wàn)。目前臨床上對(duì)PD的診斷尚無(wú)準(zhǔn)確、特異的生物診斷標(biāo)記〔1，2〕。近年來研究發(fā)現(xiàn)α-synuclein的異常聚集與PD密切相關(guān)，以血漿α-synuclein表達(dá)水平作為PD診斷的生物標(biāo)記已經(jīng)成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)，但國(guó)內(nèi)外研究結(jié)果不盡相同，甚至出現(xiàn)了相反結(jié)果。因此，本研究擬通過對(duì)國(guó)內(nèi)外公開發(fā)表的以及本課題組尚未發(fā)表的有關(guān)血漿α-synuclein表達(dá)水平與PD關(guān)系的研究文獻(xiàn)進(jìn)行Meta分析，以期綜合評(píng)價(jià)兩者間的聯(lián)系。

1 資料與方法

1.1 資料來源 分別以“α-synuclein/α-突觸核蛋白”、“parkinson/PD/帕金森”與“blood/plasm/血漿”結(jié)合以“主題、關(guān)鍵詞、主題詞”途徑，聯(lián)合檢索中國(guó)生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫(kù)(CMB)和中國(guó)學(xué)術(shù)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù)(CNKI)獲得全部相關(guān)的中文文獻(xiàn)，運(yùn)用Endnote檢索Medline、Pubmed等外文數(shù)據(jù)庫(kù)，收集1990～2010年國(guó)內(nèi)外公開發(fā)表的以及本課題組尚未發(fā)表的有關(guān)人血漿α-synuclein表達(dá)水平與PD關(guān)系的研究文獻(xiàn)。

1.2 文獻(xiàn)納入標(biāo)準(zhǔn) ①1990～2010年以前國(guó)內(nèi)外發(fā)表的一次文獻(xiàn)及本課題組尚未發(fā)表的數(shù)據(jù);②獨(dú)立性研究，目的一致;③各文獻(xiàn)研究對(duì)象來源明確，病例診斷明確，病例和對(duì)照的例數(shù)明確;④原始數(shù)據(jù)提供了樣本量、均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差;⑤資料收集方法科學(xué)、資料分析方法正確。

1.3 文獻(xiàn)排除標(biāo)準(zhǔn) ①動(dòng)物實(shí)驗(yàn);②α-synuclein在血漿外表達(dá)。③剔除重復(fù)報(bào)告、質(zhì)量差、報(bào)道信息太少(未給出α-synuclein均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差)及無(wú)法利用的文獻(xiàn)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 運(yùn)用RevMan5.0分析軟件進(jìn)行異質(zhì)性檢驗(yàn)，如果各研究結(jié)果之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義則用固定效應(yīng)模型，若有則采用隨機(jī)效應(yīng)模型，計(jì)算合并效應(yīng)指標(biāo)值及95%CI，畫出森林圖，并進(jìn)行敏感度分析和漏斗分析。

2 結(jié)果

2.1 研究資料基本情況表 共收集到符合納入標(biāo)準(zhǔn)的文獻(xiàn)4篇，累計(jì)病例共444人，累計(jì)對(duì)照共252人。各項(xiàng)研究結(jié)果差異較大，認(rèn)為PD患者血漿α-synuclein表達(dá)水平與正常對(duì)照差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義且高于對(duì)照的有兩篇(Lee〔3〕和焦玲)。認(rèn)為PD患者血漿α-synuclein表達(dá)水平與正常對(duì)照差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義且低于對(duì)照的有一篇(Neumayer〔4〕)，認(rèn)為兩者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的有一篇(Min Shi〔5〕)。見表1。

表1 納入Meta分析文獻(xiàn)的基本情況

2.2 資料的異質(zhì)性分析 對(duì)納入分析的各研究結(jié)果進(jìn)行異質(zhì)性檢驗(yàn)。結(jié)果顯示，χ2=86.47，P ＜ 0.00，I2=97%，因此，認(rèn)為各獨(dú)立研究存在異質(zhì)性，可能與患者年齡、性別、病程等不同有關(guān)，故采用隨機(jī)效應(yīng)模型對(duì)效應(yīng)指標(biāo)值進(jìn)行合并統(tǒng)計(jì)分析。RevMan軟件繪制森林圖(圖1)，結(jié)果顯示，總體效應(yīng)檢驗(yàn)Z=0.57，P=0.57，標(biāo)準(zhǔn)化均數(shù)差(S)為0.26，95%CI= －0.64～1.17，在森林圖中，其95%CI橫線與無(wú)效豎線相交，提示尚無(wú)充分證據(jù)說明血漿α-synuclein表達(dá)水平與PD相關(guān)。

2.3 敏感性分析 逐一剔除其中一組數(shù)據(jù)后，再行Meta分析，結(jié)果顯示，合并后95%CI橫線仍與無(wú)效豎線相交，與上述結(jié)果一致，說明敏感性低，研究結(jié)果較為穩(wěn)定可信。

圖1 血漿α-synuclein表達(dá)水平與PD關(guān)系Meta分析森林圖

2.4 偏倚的評(píng)估 圖2，分布呈倒漏斗形，近似對(duì)稱，小樣本研究分布在漏斗底部，發(fā)表偏倚較小。

圖2 血漿α-synuclein表達(dá)水平與PD關(guān)系Meta分析漏斗圖

3 討論

在篩選文獻(xiàn)過程中發(fā)現(xiàn)，關(guān)于人血漿α-synuclein表達(dá)水平與PD關(guān)系國(guó)內(nèi)尚無(wú)文獻(xiàn)發(fā)表，而國(guó)外發(fā)表的文獻(xiàn)中大部分研究并沒有提供均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差等原始數(shù)據(jù)，使得很多研究難以用于分析和驗(yàn)證，建議今后在病例對(duì)照研究的文章中盡可能提供基本的原始數(shù)據(jù)，增加納入分析的文獻(xiàn)數(shù)量，減少偏倚。

本研究利用Meta分析，對(duì)人血漿α-synuclein表達(dá)水平與PD的關(guān)系做綜合定量評(píng)價(jià)，通過聯(lián)合使用多種文獻(xiàn)檢索途徑，盡可能全的檢索到相關(guān)文獻(xiàn)，以減少偏倚。對(duì)4篇不同研究背景下人血漿α-synuclein表達(dá)水平與PD關(guān)系的分析結(jié)果表明，PD組與健康對(duì)照組血漿α-synuclein表達(dá)水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。排除權(quán)重較大或較小的文獻(xiàn)后，Meta分析結(jié)果合并效應(yīng)量變化不大，說明敏感性低，結(jié)果較為穩(wěn)定可信。

Shi等〔5，6〕研究發(fā)現(xiàn)，α-synuclein 廣泛存在于血液的各種成分之中，紅細(xì)胞中約占99%，血小板、白細(xì)胞和血漿中含量?jī)H占1%，血漿中α-synuclein表達(dá)水平易受溶血及血小板污染等因素的影響，因此，檢測(cè)血漿中α-synuclein表達(dá)水平存在許多不穩(wěn)定因素，這可能是各研究結(jié)果不一致的原因之一。

近年對(duì)α-synuclein蛋白纖維化過程的生理物理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，α-synuclein主要以單體、寡聚體和多聚體三種形式存在〔7〕，Wakabayashi等〔8〕進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)對(duì)神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用的主要是可溶性的寡聚體，提示α-synuclein寡聚體可能是帕金森發(fā)病機(jī)制的關(guān)鍵。因此，檢測(cè)人血漿中α-synuclein寡聚體的表達(dá)水平在總α-synuclein中所占比例可能會(huì)更有意義〔9〕。本課題組檢測(cè)了貴州地區(qū)人血漿中α-synuclein寡聚體的表達(dá)水平在總α-synuclein中所占比例，證實(shí)了上述推斷。但要將這一結(jié)論推廣，尚需更多的研究數(shù)據(jù)支持。

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