鞠 鐸 姚 華 (浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院口腔中心,浙江 杭州 310003)

牙周炎是侵犯牙齦以及牙周組織的慢性炎癥,其主要病理特征為牙周袋的形成、袋壁炎癥、牙槽骨吸收以及牙齒逐漸松動等,是導(dǎo)致成人牙齒缺失的主要原因之一〔1,2〕。牙周炎分為慢性牙周炎、侵襲性牙周炎等類型,侵襲性牙周炎的臨床表現(xiàn)以及實驗室檢查等方面均有別于慢性牙周炎〔3〕。侵襲性牙周炎多伴隨有咀嚼功能障礙,主要由放線桿菌感染引起,該細(xì)菌在侵襲性牙周炎患者牙齦下菌斑中的分離培養(yǎng)陽性率高達(dá)90%～100%〔4〕。牙周基礎(chǔ)治療是目前治療牙周炎的主要手段之一,如今已在臨床上推廣應(yīng)用〔5〕。據(jù)報道,牙周基礎(chǔ)治療可導(dǎo)致侵襲性牙周炎患者血清及齦溝液中多種細(xì)胞因子的濃度發(fā)生變化〔6〕。本研究旨在探討牙周基礎(chǔ)治療對重度侵襲性牙周炎患者血清及齦溝液中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-4(IL-4)水平的影響。

1 資料與方法

1.1 研究對象 2009年1月至2011年4月,我科共收治重度侵襲性牙周炎患者53例,其中男性37例,女性16例;年齡22～35〔平均(26.3±1.4)〕歲。所有患者均無嚴(yán)重的慢性系統(tǒng)性疾病;近期未服用過任何抗生素;就診前6個月內(nèi)未接受過牙周治療;女性患者未懷孕。

1.2 牙周基礎(chǔ)治療方法 牙周基礎(chǔ)治療包括如下內(nèi)容:①菌斑控制:應(yīng)使菌斑牙面數(shù)控制在20%以下;②齦上潔治術(shù):使用潔治器械去除齦上牙石、色漬、菌斑,并磨光牙面,以延遲菌斑和牙石的沉積。③齦下刮治術(shù)(根面平整術(shù)):使用比較精細(xì)的齦下刮治器刮除位于牙周袋內(nèi)根面上的牙石、菌斑。④咬合調(diào)整法(選磨法):通過磨改牙齒外形消除創(chuàng)傷性咬合和食物嵌塞。⑤松牙固定術(shù)。

1.3 TNF-α、IL-4測定方法 TNF-α測定采用BioELISA技術(shù):①取出試劑盒,恢復(fù)至室溫。②將待測血清、不同濃度的TNF-α標(biāo)準(zhǔn)品分別加至相應(yīng)微孔中,每孔100 μ l,箔紙封板,37℃孵育1 h。③甩盡微孔中的液體,每孔注入事先配好的洗液至少300 μ l,洗孔,重復(fù)此步驟4次,甩盡孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。④每孔加入工作濃度的生物素化抗TNF-α單克隆抗體100 μ l,37℃孵育1 h;洗板,方法同上。⑤每孔加入工作濃度的辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的鏈霉親合素100 μ l,37℃孵育1 h;洗板,方法同上。⑥每孔加酶底物溶液100 μ l,37℃避光反應(yīng)10～15 min,每孔加入終止液100 μ l,輕輕混勻,30 min內(nèi)于酶標(biāo)儀450 nm波長測吸光度。⑦以TNF-α標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo),相應(yīng)吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。⑧根據(jù)待測血清的吸光度、標(biāo)準(zhǔn)曲線計算待測血清中的TNF-α濃度。IL-4的測定方法同TNF-α。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析,計量資料采用±s表示,采用t檢驗。

2 結(jié) 果

2.1 重度侵襲性牙周炎患者牙周基礎(chǔ)治療前后牙周探診深度(PD)、附著水平(AL)、探診出血指數(shù)(BOP)的比較 重度侵襲性牙周炎患者經(jīng)牙周基礎(chǔ)治療后,PD、AL、BOP顯著低于治療前,兩者相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(均 P＜0.05)。見表1。

2.2 重度侵襲性牙周炎患者牙周基礎(chǔ)治療前后血清TNF-α、IL-4水平的比較 重度侵襲性牙周炎患者經(jīng)牙周基礎(chǔ)治療后,血清中 TNF-α、IL-4與治療前相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(均 P＞0.05)。見表2。

2.3 重度侵襲性牙周炎患者牙周基礎(chǔ)治療前后齦溝液TNF-α、IL-4水平的比較 重度侵襲性牙周炎患者經(jīng)牙周基礎(chǔ)治療后,齦溝液中TNF-α顯著低于治療前,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);而IL-4顯著高于治療前,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。見表3。

表1 重度侵襲性牙周炎患者牙周基礎(chǔ)治療前后PD、AL、BOP 的比較( ±s)

表1 重度侵襲性牙周炎患者牙周基礎(chǔ)治療前后PD、AL、BOP 的比較( ±s)

時間 PD(mm) AL(mm) BOP治療前 4.34±0.69 2.59 ±1.17 3.06±0.56治療后 2.56±0.42 1.34 ±0.95 2.08±041 t值 10.364 8.351 11.057 P值 0.015 0.026 0.034

表2 重度侵襲性牙周炎患者牙周基礎(chǔ)治療前后血清 TNF-α、IL-4水平的比較( ±s,ng/L)

表2 重度侵襲性牙周炎患者牙周基礎(chǔ)治療前后血清 TNF-α、IL-4水平的比較( ±s,ng/L)

時間 TNF-α IL-4治療前 1.94±0.35 41.3±7.9治療后 1.89±0.38 40.9±8.1 t值 3.267 2.304 P值 0.126 0.072

表3 重度侵襲性牙周炎患者牙周基礎(chǔ)治療前后齦溝液TNF-α、IL-4 水平的比較±s)

表3 重度侵襲性牙周炎患者牙周基礎(chǔ)治療前后齦溝液TNF-α、IL-4 水平的比較±s)

時間 TNF-α(μ g/L) IL-4(ng/L)治療前 7.3±1.9 29.4±5.1治療后 3.5±1.3 67.3±12.7 t值 9.3640 8.109 P值 0.016 0.042

3 討 論

TNF,又稱淋巴毒素,包括 TNF-α、TNF-β兩個亞型,其中TNF-α相對分子質(zhì)量為17 000,常以二聚體的形式存在。TNF-α主要由活化的單核-巨噬細(xì)胞、活化的自然殺傷細(xì)胞、抗原刺激的 T細(xì)胞、肥大細(xì)胞分泌〔7〕。TNF-α具有廣泛的生物學(xué)活性,能促進(jìn)急性期反應(yīng)物質(zhì)、IL-1、IL-6以及 IL-8的合成,增強主要組織相容性復(fù)合體(MHC)Ⅰ類抗原表達(dá)以及細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞的活性,引起內(nèi)皮細(xì)胞的黏附性增強以及白細(xì)胞增多,此外還對多種病毒感染細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞具有細(xì)胞毒或抑制生長作用〔8〕。IL-4是一種由活化 T細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子,相對分子治療18 000～20 000,在B細(xì)胞生長的早期可使其活化進(jìn)入G1期,在B細(xì)胞對蛋白質(zhì)性抗原發(fā)生免疫應(yīng)答時起不可或缺的作用〔9〕。此外,IL-4可以增強B細(xì)胞膜上表達(dá)CD23以及MHCⅡ類抗原,誘導(dǎo)抗體的同種型轉(zhuǎn)換,增強單核-巨噬細(xì)胞表達(dá)MHCⅡ類抗原,與IL-3協(xié)同刺激肥大細(xì)胞增殖、活化細(xì)胞毒性 T 淋巴細(xì)胞〔10〕。

在本研究中,經(jīng)牙周基礎(chǔ)治療后,重度侵襲性牙周炎患者PD、AL、BOP顯著低于治療前,因此牙周基礎(chǔ)治療對重度侵襲性牙周炎患者的療效較好。另外,重度侵襲性牙周炎患者經(jīng)牙周基礎(chǔ)治療后,血清中TNF-α、IL-4與治療前相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(均P＞0.05);這可能是因為侵襲性牙周炎為局限性炎癥,牙周基礎(chǔ)治療是針對局限性炎癥的治療,因此對重度侵襲性牙周炎患者血清中細(xì)胞因子濃度的影響不大。最后,重度侵襲性牙周炎患者經(jīng)牙周基礎(chǔ)治療后,齦溝液中TNF-α顯著低于治療前,而IL-4顯著高于治療前,這主要是因為經(jīng)過牙周基礎(chǔ)治療后,重度侵襲性牙周炎患者牙周局部的炎癥強度減弱,進(jìn)一步導(dǎo)致齦溝液中 TNF-α濃度降低、IL-4濃度升高。

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