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        荔枝殼多糖傳統(tǒng)水提法最佳工藝優(yōu)化研究

        2011-07-28 03:29:38盧夢驍林大專張凌贏曾憲東
        中國醫(yī)藥導(dǎo)報 2011年28期
        關(guān)鍵詞:荔枝容量瓶多糖

        惠 春,盧夢驍,林大專,張凌贏,曾憲東

        1.長春醫(yī)學(xué)高等??茖W(xué)校,吉林長春 130031;2.同濟大學(xué)數(shù)學(xué)系,上海 200092

        荔枝(Litchi chinesis Sonn.)屬于無患子科植物,因具有較高的營養(yǎng)價值和養(yǎng)顏滋補作用,被視為“果中珍品”。據(jù)《本草綱目》記載:“常食荔枝能補腦健身,治療瘰疬,開胃益脾[1]?!崩笾ぷ鳛槔笾κ秤煤蟮膹U棄物被扔掉,造成了資源浪費和環(huán)境污染。有報道[2]荔枝殼中含有多種活性成分,如黃酮、酚酸和多糖類物質(zhì),有較高的加工利用價值?;钚远嗵菍笛獕骸⒔笛扔幸欢üπ3]。目前對荔枝核、肉中多糖的提取方法研究較多,而對荔枝殼中多糖的提取方法研究鮮見報道,本研究立足荔枝殼廢棄物的再利用,并對其活性成分多糖提取條件進行優(yōu)化,以最大限度提高荔枝殼中多糖的提取率。

        1 儀器與材料

        1.1 儀器

        TU1800雙光束紫外可見分光光度計 (北京普西通用儀器責(zé)任有限公司)。電子天平BS224S(賽多利斯科學(xué)儀器北京有限公司)。

        1.2 材料

        荔枝殼(購于長春藥材公司)、苯酚(開原市化學(xué)試劑一廠)、硫酸(北京化工廠)、95%乙醇(北京化工廠)、無水乙醇(北京化工廠)等均為分析純試劑。D-無水葡萄糖 (批號:110833-200904,中國藥品生物制品檢定所)

        2 方法與結(jié)果

        2.1 方法

        2.1.1 供試品溶液的制備 精密稱取干燥至恒重的荔枝殼5.0 g,水提濃縮后定容于100 ml的容量瓶中。精密吸取上述提取液10 ml,用5倍量95%的乙醇醇沉過夜,離心(4000 r/min)后用95%乙醇洗滌醇沉物,用水定容于25 ml容量瓶中,即制備得荔枝殼多糖供試品溶液。

        2.1.2 荔枝殼多糖的測定方法 依據(jù)以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)品的硫酸-苯酚比色法[4]。

        2.1.3 對照品溶液的配制 精密稱取干燥至恒重的無水葡萄糖0.0146 g,定量轉(zhuǎn)移至100 ml容量瓶中,用水稀釋至刻度,即得0.146 mg/ml的對照品溶液。

        2.1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備[5]精密吸取 0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 ml上述對照品溶液至5支具塞試管中,然后依次加入蒸餾水至2 ml,再各加6%苯酚試劑1.0 ml,搖勻后精密加入濃硫酸5 ml,放置。5 min后置沸水浴中加熱,15 min后立即轉(zhuǎn)入冷水浴中。至室溫后在490 nm波長處測定吸收度,即得標(biāo)準(zhǔn)曲線,以質(zhì)量M對吸收度A作線性回歸,得回歸方程:A=0.007788M-0.05088,r=0.9999。

        2.1.5 精密度試驗 精密量取微波提取法項下“5號”樣品(精密稱取干燥至恒重的荔枝殼0.5040 g,用95%乙醇索式提取,脫脂后,將預(yù)處理后的樣品加1∶20倍的水,在100℃、3 min、900 W功率下于微波萃取儀內(nèi)提取,合并提取液,定容于100 ml容量瓶中,即得),共制備6份,按標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項下的方法測定吸光度,結(jié)果RSD為0.642%(n=6),表明精密度符合要求。

        2.1.6 穩(wěn)定性試驗 精密量取對照品溶液0.6 ml,照“2.1.4”項下的方法測定吸光度,每隔30 min測定一次,至2.5 h時,測得RSD為0.585%(n=6),說明吸光度在150 min內(nèi)穩(wěn)定。

        2.1.7 重現(xiàn)性試驗 精密量取微波提取法 (功率單因素影響)項下“5號”樣品1.0 ml,按標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項下的方法測定吸光度,重復(fù)操作6次,測得RSD為0.902%(n=6)。

        2.1.8 加樣回收率試驗 精密吸取微波提取法(功率單因素影響)項下“5號”樣品液 0.5 ml(6份),分別加入對照品溶液0.5 ml,照樣品測定項下方法測定吸光度,計算回收率,結(jié)果測得 RSD=0.463%(n=6)。

        2.1.9 荔枝殼多糖樣品液的測定 精密吸取1.0 ml荔枝殼多糖樣品液,按“2.1.4”標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項下的方法操作。

        2.2 結(jié)果

        2.2.1 單因素試驗結(jié)果 單因素中的提取次數(shù)、提取時間、料液比、提取溫度對多糖得率的影響,見圖1~4。

        圖1 提取次數(shù)對多糖得率的影響

        圖2 提取時間對多糖得率的影響

        2.2.2 正交試驗結(jié)果 選擇正交表L9(34),以提取時間、溫度和料液比做如下三因素、三水平的正交實驗。因素—水平設(shè)計,見表 1;正交試驗結(jié)果,見表 2、3。

        3 討論

        3.1 單因素試驗結(jié)果討論

        3.1.1 提取次數(shù)對多糖得率的影響 圖1顯示,隨著提取次數(shù)的增加,樣品多糖得率無顯著性遞增,考慮時間和能源的節(jié)儉不浪費,以選擇提取2次較為合適。

        3.1.2 提取時間對多糖得率的影響 圖2顯示,3 h以前,隨著提取時間的延長多糖得率上升較大,3 h以后,多糖得率隨著時間的變化不顯著。

        表1 因素水平表

        表2 L9(34)正交試驗極差分析結(jié)果

        3.1.3 料液比對多糖得率的影響 圖3顯示,當(dāng)料液比為1∶30時,多糖得率達到最高點。

        3.1.4 提取溫度對多糖得率的影響 圖4顯示,當(dāng)提取溫度達到90℃以后,溫度提高對多糖得率的影響顯著。

        表3 正交試驗方差分析結(jié)果

        3.2 正交試驗結(jié)果討論

        從以上實驗結(jié)果和方差分析,可以得出以下結(jié)論:

        3.2.1 由RC<RA<RB可以依次排列出影響荔枝殼中多糖得率的因素順序為提取溫度、提取時間和料液比。

        3.2.2 由 k1A<k2A<k3A、k1B<k2B<k3B和 k3C<k2C<k1C可以得出 A3B3C1為荔枝殼多糖提取的最佳工藝條件,即提取時間為3 h、提取溫度為 100℃、料液比為1∶20。

        3.3.3 在 α=0.05 水平下,F(xiàn)0.05(2,2)=19,由于 F 均小于 F0.05(2,2)=19,故A、B、C三因素對荔枝殼中多糖得率影響均不顯著。

        [1]唐小俊,池建偉,張名位,等.荔枝多糖的提取條件及含量測定[J].華南師范大學(xué)學(xué)報,2005,4(2):27-31.

        [2]楊寶,趙謀明,李寶珍,等.荔枝殼活性成分提取工藝條件研究[J].食品與機械,2004,20(6):28-30.

        [3]吳仲梁,韓偉,陶軍,等.快速檢測食品中金黃葡萄球菌的檢測方法[J].中國食品工業(yè),2003,(6):56-57.

        [4]董周勇,池建偉,楊公明,等.荔枝多糖微波提取工藝研究[J].食品工業(yè)科技,2006,(3):118-121.

        [5]吳雅靜,張名位,孫遠明,等.荔枝多糖的超聲輔助提取工藝優(yōu)化研究[J].華南師范大學(xué)學(xué)報:自然科學(xué)版,2007,(7):119-124.

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