劉莉紅，楊建新，范艷霞

(保定市第二醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科，河北保定071051)

隨著人民生活水平的提高，生活方式的改變，糖尿病患病率呈逐年上升趨勢(shì)，目前已成為危害人類健康的一個(gè)重要疾病。而糖尿病腎病是糖尿病最常見、最嚴(yán)重的微血管并發(fā)癥之一。因此，探討糖尿病發(fā)生糖尿病腎病的發(fā)病機(jī)制及相關(guān)危險(xiǎn)因素已經(jīng)成為研究熱點(diǎn)。炎癥學(xué)說越來越受到重視，而白細(xì)胞介素(interleukin，IL)和C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein，CRP)是體內(nèi)產(chǎn)生最廣泛的炎性標(biāo)志物，在免疫調(diào)節(jié)和多種疾病發(fā)病過程中發(fā)揮著作用。目前，關(guān)于IL-8、IL-10及CRP在糖尿病腎病發(fā)生發(fā)展機(jī)制中的研究較少。因此，本研究主要探討炎性因子IL-8、IL-10和CRP在糖尿病微血管病變和糖尿病腎病中的變化。

1 資料和方法

1.1 一般資料 病例取自2008年1月至2010年12月間保定市第二醫(yī)院內(nèi)分泌腎病科的住院患者171例，其中男82例，女89例，平均年齡54歲。根據(jù)1999年WHO的糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)及糖尿病腎病的診斷標(biāo)準(zhǔn)將所有病例分為兩組:糖尿病無糖尿病腎病組86例，男42例，女44例，平均年齡52歲，糖尿病病程2～12年;糖尿病并發(fā)糖尿病腎病組85例，男40例，女45例，平均年齡55歲，糖尿病病程3～15年。所有病例均符合1999年世界衛(wèi)生組織的診斷標(biāo)準(zhǔn):空腹血糖＞7.0 mmol/L，隨 機(jī) 血 糖≥11.1 mmol/L。糖尿病腎病的診斷標(biāo)準(zhǔn)符合尿白蛋白排泄率 ＞20 μg/min。病例排除標(biāo)準(zhǔn):排除其他可能引起尿白蛋白排泄率增加的因素。健康對(duì)照組選擇健康查體的志愿者90例，男45例，女45例，平均年齡50歲，血尿便常規(guī)正常，肝腎功能血糖血脂均正常。所有研究對(duì)象入組前均排除糖尿病急性代謝并發(fā)癥，近3個(gè)月無感染、腫瘤、風(fēng)濕、類風(fēng)濕、結(jié)核、心腦血管疾病。

1.2 檢測(cè)方法 所有受檢者血清IL-8、IL-10采用放射免疫分析法檢測(cè)，患者空腹取靜脈血4 mL，水浴箱放置30 min后使用低速離心機(jī)3600 r/min的速度分離血清，將血清樣本密封后，置于-20℃儲(chǔ)存(不超過2個(gè)月)。取圓底聚苯乙烯試管若干，用記號(hào)筆編號(hào)標(biāo)準(zhǔn)線和待測(cè)樣本管，用微量加樣器加樣，混勻，4℃溫育18 h以上，加分離劑后混勻，室溫放置15 min，3500 r/min離心15 min，吸棄上清液，測(cè)定各沉淀管的放射性計(jì)數(shù)。聯(lián)機(jī)處理，使用logit-log數(shù)據(jù)處理模式由電腦自動(dòng)處理得出結(jié)果。儀器為中佳科技有限公司的GC-2010γ免疫計(jì)數(shù)器;試劑由北京北方生物技術(shù)研究所生產(chǎn)的IL-8和IL-10放射免疫分析試劑。

CRP采用金標(biāo)法，同樣空腹取靜脈血2 mL，水浴箱放置半小時(shí)后使用低速離心機(jī)3600 r/min的速度分離血清，用挪威 Axis-shield Poc AS生產(chǎn)的 Nyco Card ReaderⅡ多功能全定量金標(biāo)檢測(cè)儀及Ⅱ型高敏感CRP檢測(cè)試劑盒直接檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，三組比較采用方差分析，兩兩比較采用q檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

三組血清CRP、IL-8、IL-10比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。兩兩比較結(jié)果顯示，糖尿病腎病組患者血清IL-8、CRP明顯高于糖尿病無腎病組，IL-10水平低于糖尿病無腎病組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=-4.93、-4.82、3.97，P ＜0.05);糖尿病腎病組患者血清IL-8、CRP與健康對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=-4.25、-5.02，P ＜0.05)，IL-10 與健康對(duì)照組水平接近(P＞0.05)，說明隨著疾病進(jìn)展到糖尿病腎病階段時(shí)，也就是病情加重時(shí)，IL-10的水平反而會(huì)下降。

糖尿病無腎病組血清CRP、IL-8、IL-10與健康對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=-4.75、-3.82、-3.98，P ＜0.05)。CRP 在兩兩對(duì)比中的差異更加顯著，說明CRP隨著疾病的進(jìn)展發(fā)生變化更明顯(表1)。

表1 三組患者IL-8、IL-10和CRP水平的比較

3 討論

關(guān)于糖尿病腎病，近年來炎癥學(xué)說備受關(guān)注，2型糖尿病被認(rèn)為是一種先天性免疫低度慢性炎癥性疾病［1］，2型糖尿病及并發(fā)癥可能是細(xì)胞因子介導(dǎo)的炎性反應(yīng)，通過引起胰島素抵抗和胰島B細(xì)胞凋亡導(dǎo)致2型糖尿病的發(fā)生、發(fā)展。

3.1 IL-8與糖尿病腎病 IL-8主要是由單核-巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的一種細(xì)胞因子，是近端腎小管上皮細(xì)胞分泌的主要趨化因子。Tashiro等［2］證實(shí)尿IL-8水平與糖尿病腎病呈正相關(guān)，在糖尿病腎病早期階段，尿IL-8水平開始增加，在糖尿病腎病的后期，患者尿IL-8水平已明顯增高。

本研究結(jié)果顯示，IL-8在糖尿病無腎病組、糖尿病腎病組與健康對(duì)照組的對(duì)比中有顯著性差異(P＜0.05)，并且是逐漸增高的，充分說明炎性因子IL-8在糖尿病腎病的發(fā)生中起到一定作用。同時(shí)從統(tǒng)計(jì)結(jié)果可知，IL-8的水平逐漸升高，與另一炎性因子CRP的變化是一致的。

3.2 IL-10與糖尿病腎病 IL-10作為抗炎因子具有抑制白細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞間的作用，抑制致炎因子釋放，誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞由Th1向Th2轉(zhuǎn)化。IL-10能夠抑制炎癥基因，如一氧化氮合成酶和環(huán)氧酶，斑塊中富含IL-10的區(qū)域可以看到細(xì)胞凋亡減少及一氧化氮合成酶減少，IL-10有強(qiáng)大的抗感染能力并能減少血管壁的炎癥［3，4］。在全身炎性反應(yīng)綜合征的研究中發(fā)現(xiàn)，IL-10水平降低，與預(yù)后不良相關(guān)，提示過度和不足的抗炎反應(yīng)會(huì)使患者預(yù)后不佳，這可能與IL-10過度表達(dá)阻止了細(xì)菌清除和免疫抑制相關(guān)［5，6］。

本研究結(jié)果顯示，IL-10在健康對(duì)照組、糖尿病無腎病組中有明顯差異，其中糖尿病無腎病組比健康對(duì)照組中數(shù)值高，說明糖尿病的發(fā)生與炎性反應(yīng)相關(guān)，IL-10在糖尿病早期未發(fā)生血管并發(fā)癥時(shí)，促進(jìn)炎性反應(yīng)發(fā)生，而在糖尿病腎病組中，數(shù)值是降低的，和健康對(duì)照組水平接近，說明在糖尿病發(fā)展的過程中，隨著并發(fā)癥的發(fā)生和糖尿病的進(jìn)展，IL-10的升高起到了保護(hù)作用。糖尿病早期無腎病等并發(fā)癥時(shí)，IL-10在炎性因素的刺激下水平升高，而隨著糖尿病并發(fā)癥的出現(xiàn)，IL-10水平下降，說明IL-10在并發(fā)癥糖尿病腎病發(fā)展過程中的保護(hù)性作用，IL-10水平越高，糖尿病發(fā)生糖尿病腎病的可能性越低。

3.3 CRP與糖尿病腎病 長(zhǎng)期以來，CRP被看作急性時(shí)相反應(yīng)的標(biāo)志物，臨床上常用于急性炎癥疾病的輔助診斷。有研究表明，CRP是2型糖尿病發(fā)病最強(qiáng)的預(yù)測(cè)因子［7］。一方面，反映了廣泛血管內(nèi)皮功能紊亂和血管的損傷;另一方面，CRP本身可直接作用于腎小球的小動(dòng)脈，加重腎小球高濾過和高灌注狀態(tài)，引起腎臟損傷。

本研究結(jié)果顯示，CRP在糖尿病無腎病組、糖尿病腎病組中均有不同程度升高，與健康對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，充分說明糖尿病的微血管病變與炎性反應(yīng)密切相關(guān)，且病變程度越重，CRP水平越高，CRP水平的高低直接反映糖尿病及其并發(fā)癥的病變程度，在一定程度上可作為判斷患者病情，預(yù)測(cè)預(yù)后的指標(biāo)。

綜上可知炎性因子CRP、IL-8、IL-10在糖尿病無腎病和糖尿病腎病中的變化，以及在糖尿病腎病不同階段中水平高低的改變，充分說明炎性反應(yīng)在糖尿病腎病的發(fā)生、發(fā)展過程中起著重要作用。研究炎性因子與糖尿病腎病的關(guān)系，分析各種炎性因子間的相互作用，深化人們對(duì)糖尿病腎病炎性反應(yīng)的認(rèn)識(shí)尤為重要，積極消除或控制上述促炎因素，改善早期糖尿病腎病患者的免疫功能，達(dá)到對(duì)糖尿病腎病的早期診斷和預(yù)防，并積極采取有效措施，為糖尿病腎病的預(yù)防和治療提供更多的線索。

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