宋玉民，卞常鑫，王璞玉

(西北師范大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院，甘肅 蘭州 730070)

近年來(lái)，血栓栓塞性疾病越來(lái)越受到人們的關(guān)注[1～3]，抗血栓藥物研究迅速發(fā)展。阿魏酸具有抗氧化、消除自由基、抗菌消炎、抗腫瘤、抗血小板凝聚和抗血栓等多種藥理作用，在化妝品和醫(yī)藥衛(wèi)生行業(yè)應(yīng)用廣泛[4～8]。稀土離子也同阿魏酸一樣具有抗炎、抗凝血作用，且對(duì)于不同配位數(shù)的配位空間有著較大的適應(yīng)性，可以與屬于硬堿的氧原子、氮原子結(jié)合[9，10]。為此，作者將阿魏酸與稀土離子Nd3+、Ce3+、Eu3+進(jìn)行配合，以期在藥理上達(dá)到協(xié)同作用，擬為治療血栓栓塞性疾病提供更多療效好的潛在藥物。

1 實(shí)驗(yàn)

1.1 試劑與儀器

阿魏酸，上海中秦化學(xué)試劑有限公司；CeCl3·6H2O，上海躍龍化工廠；氧化銪、氧化釹(將其用鹽酸溶液溶解，即得氯化物)，甘肅稀土公司；無(wú)水乙醇；二甲基亞砜(DMSO);六次甲基四胺。

Agilent-8453型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，美國(guó)Agilent公司；FTS-3000型紅外光譜儀(KBr壓片，攝譜范圍4000～400 cm-1)；TG/DTA-6300型差熱-熱重分析儀，美國(guó)PE公司；數(shù)顯智能控溫磁力攪拌器，鞏義市英峪予華儀器廠；恒溫水浴鍋，鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司；KQ-100M型超聲波清洗器，東莞科橋超聲波設(shè)備有限公司。

1.2 配合物的合成

稱(chēng)取0.5 mmol阿魏酸和0.5 mmol六次甲基四胺于圓底燒瓶中，用95%的乙醇溶液溶解，在60 ℃下攪拌，然后緩慢滴加0.25 mmol稀土離子的溶液，加熱回流持續(xù)攪拌12 h，所得沉淀經(jīng)過(guò)濾、洗滌、烘干，即得阿魏酸稀土配合物。

1.3 全血凝血時(shí)間的測(cè)定

取4組干凈的試管(每組3個(gè)平行樣)，依次為空白對(duì)照組、、阿魏酸釹組、阿魏酸鈰組、阿魏酸銪組。將試管放入37 ℃水浴中恒溫，沿試管壁加入1 mL兔血，繼續(xù)恒溫2 min，而后每隔10 s以30°傾斜度輕輕傾斜試管，記錄血液不再流動(dòng)的時(shí)間，即為全血凝血時(shí)間[11]。

1.4 復(fù)鈣化凝血時(shí)間的測(cè)定

取4組潔凈試管(每組3個(gè)平行樣)，37 ℃恒溫后，將經(jīng)0.9%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))NaCl溶液浸泡24 h的3種待測(cè)樣品分別轉(zhuǎn)移到3組潔凈試管中，另一組為空白樣；然后各加入0.3 mL兔血、0.3 mL 0.025 mol·L-1CaCl2溶液，37 ℃恒溫；之后用不銹鋼小鉤均勻緩慢地?cái)噭?dòng)溶液，檢查是否有纖維蛋白的形成。記錄小鉤上剛開(kāi)始出現(xiàn)絲狀物的時(shí)間，即為復(fù)鈣化凝血時(shí)間(簡(jiǎn)稱(chēng)復(fù)鈣時(shí)間)[3]。

2 結(jié)果與討論

2.1 配合物的組成

通過(guò)分析，確定配合物的組成為(C10H9O4)3RE·3H2O，其中結(jié)晶水?dāng)?shù)目由元素分析和差熱-熱重分析測(cè)得。配合物不溶于水、乙醇和丙酮溶劑，微溶于DMSO。

2.2 紅外光譜分析(圖1)

圖1 阿魏酸(a)、阿魏酸釹(b)、阿魏酸鈰(c)、阿魏酸銪(d)的紅外光譜

由圖1可知，阿魏酸稀土配合物的紅外圖譜與配體相比，某些特征吸收峰發(fā)生了明顯的位移，強(qiáng)度也有一定的變化，說(shuō)明阿魏酸與稀土離子存在配位作用。以阿魏酸鈰(c曲線)為例，配體阿魏酸在1690 cm-1處的羰基振動(dòng)峰消失，而在1595 cm-1和1508 cm-1處分別出現(xiàn)羧酸根的特征反對(duì)稱(chēng)振動(dòng)峰和對(duì)稱(chēng)振動(dòng)峰，說(shuō)明羧酸根失去質(zhì)子與Ce2+發(fā)生了配位作用；在3425 cm-1處出現(xiàn)的寬峰是配合物中水分子羥基的對(duì)稱(chēng)和反對(duì)稱(chēng)伸縮振動(dòng)，說(shuō)明水分子參與了配位[12]；在410 cm-1左右出現(xiàn)Ce-O振動(dòng)峰，進(jìn)一步說(shuō)明阿魏酸與Ce2+確實(shí)發(fā)生了配位。阿魏酸銪和阿魏酸釹的紅外譜圖與阿魏酸鈰具有相似的峰形，表明3種物質(zhì)結(jié)構(gòu)相似。

2.3 差熱-熱重分析

以α-Al2O3為參比，以10 ℃·min-1的升溫速率在氮?dú)夥諊杏谑覝亍?50 ℃條件下進(jìn)行掃描，得差熱-熱重曲線。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，3種配合物的差熱-熱重曲線基本相似，說(shuō)明它們可能具有相似的結(jié)構(gòu)[13]。具體差熱-熱重分析數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。

表1 配合物的差熱-熱重分析數(shù)據(jù)

實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，阿魏酸稀土配合物在120～150 ℃之間有失重現(xiàn)象，該失重為配合物中水分子的失去，從失重的溫度推測(cè)該水分子可能是配合物中的配位水，通過(guò)計(jì)算可知失重量近似于3個(gè)水分子的質(zhì)量；隨著溫度的繼續(xù)升高，配合物開(kāi)始分解，在300 ℃左右出現(xiàn)一放熱峰并且伴隨有失重現(xiàn)象；到650 ℃左右時(shí)，熱重曲線趨于恒定。實(shí)驗(yàn)值與理論值基本相符，說(shuō)明配合物最終轉(zhuǎn)變?yōu)镹d2O3、Ce2O3、Eu2O3。

2.4 紫外可見(jiàn)吸收光譜分析

以DMSO為溶劑，測(cè)定了阿魏酸及其稀土配合物的紫外可見(jiàn)吸收光譜，結(jié)果見(jiàn)圖2。

圖2 阿魏酸(a)、阿魏酸釹(b)、阿魏酸鈰(c)、阿魏酸銪(d)的紫外可見(jiàn)吸收光譜

由圖2可知，阿魏酸在近紫外區(qū)276 nm和329 nm處有最大吸收峰，可認(rèn)為是苯環(huán)共軛體系及羰基π→π*躍遷引起的[14]。阿魏酸稀土配合物與配體阿魏酸相比，紫外吸收峰的波長(zhǎng)和強(qiáng)度均發(fā)生了變化，說(shuō)明阿魏酸與稀土離子發(fā)生了配位作用。以阿魏酸釹(b曲線)為例，其紫外吸收峰較阿魏酸分別藍(lán)移了23 nm、7 nm。這可能是由于阿魏酸和稀土離子發(fā)生配位時(shí)，配位原子周?chē)碾娮釉泼芏劝l(fā)生變化，從而影響了相關(guān)共軛分子軌道的能級(jí)狀態(tài)[15]。

2.5 全血凝血時(shí)間

配體阿魏酸及其稀土配合物對(duì)全血凝血時(shí)間的影響見(jiàn)表2。

表2 配體及配合物對(duì)全血凝血時(shí)間的影響

由表2可知，與空白對(duì)照組相比，阿魏酸的凝血時(shí)間明顯延長(zhǎng)，這一現(xiàn)象與阿魏酸具有抗血小板凝聚的作用相一致；3種阿魏酸稀土配合物的凝血時(shí)間均比阿魏酸的凝血時(shí)間長(zhǎng)，即抗凝血效果優(yōu)于配體阿魏酸，其中阿魏酸釹的抗凝血性能最好。

2.6 復(fù)鈣時(shí)間

配體阿魏酸及其稀土配合物對(duì)復(fù)鈣時(shí)間的影響見(jiàn)表3。

表3 配體及配合物對(duì)復(fù)鈣時(shí)間的影響

由表3可知，不加任何物質(zhì)時(shí)，正常血液的復(fù)鈣時(shí)間為91 s，相比之下阿魏酸的復(fù)鈣時(shí)間稍長(zhǎng)，而阿魏酸稀土配合物的復(fù)鈣時(shí)間更長(zhǎng)一些。其中阿魏酸釹的復(fù)鈣時(shí)間最長(zhǎng)，達(dá)107 s，這一結(jié)果與全血凝血時(shí)間測(cè)定結(jié)果相一致。

3 結(jié)論

以阿魏酸作為配體，分別和稀土離子Nd3+、Ce3+、Eu3+反應(yīng)生成了配合物，推測(cè)其結(jié)構(gòu)為(C10H9O4)3RE·3H2O?？鼓獙?shí)驗(yàn)結(jié)果表明配合物同阿魏酸一樣具有延長(zhǎng)凝血時(shí)間的作用，且抗凝血效果更好，3種配合物中阿魏酸釹的抗凝血性能最好。

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