閆 晗,劉 靜,趙 璨,鞏新玉,張艷偉,李 蕾

(1.駐馬店市食品藥品檢驗(yàn)所,河南 駐馬店 463000;2.駐馬店市偉鑫藥業(yè)有限公司,河南 駐馬店 463000)

鹿角為鹿科動(dòng)物馬鹿或梅花鹿已骨化的角或鋸茸后翌年春季脫落的角基,分別習(xí)稱“馬鹿角”、“梅花鹿角”、“鹿角脫盤”[1]。本次實(shí)驗(yàn)所用鹿角為馬鹿角,無(wú)臭、味微咸。阿膠是將驢皮漂泡、去毛、切成小塊,再漂泡、分次水煎、濾過,合并濾液,用文火濃縮(加入適量的黃酒、冰糖和豆油)至稠膏狀,冷凝,切塊陰干[2-3]。鹿角膠、阿膠同屬膠劑,工藝相似,藥性相仿,所含組分相似。目前藥典標(biāo)準(zhǔn)中僅加入適量的黃酒、冰糖和豆油作為輔料。從歷史上、文獻(xiàn)上都有加阿膠的記載[4],不加阿膠,難以成型,影響醫(yī)療上的使用[5],而加少量阿膠,較易成型,藥性相仿且藥效穩(wěn)定,不影響藥物療效。

本文通過采用確定的添加少量阿膠制備鹿角膠實(shí)驗(yàn)工藝進(jìn)行了連續(xù)多批次的實(shí)驗(yàn),對(duì)樣品進(jìn)行了工藝參數(shù)研究和穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)。經(jīng)過加速試驗(yàn)和長(zhǎng)期試驗(yàn)考察,結(jié)果表明樣品性狀、水不溶物、含量測(cè)定和微生物限度均符合規(guī)定,表示所制備的鹿角膠比較穩(wěn)定,質(zhì)量合格。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

試劑:硫酸鉀(天津永大化學(xué)試劑開發(fā)中心),硫酸銅(天津博迪化工有限公司),硫酸(開封芳晶化學(xué)試劑有限公司),硼酸(淮南化學(xué)試劑廠),甲基紅(上海遠(yuǎn)航化學(xué)試劑廠),氫氧化鈉(天津市永大化學(xué)試劑開發(fā)中心),氯化鈉(天津市博迪化工有限公司),磷酸二氫鉀(廣東汕頭西隴化工廠),磷酸二氫鈉(上海市試劑一廠),溴甲酚綠(天津市化學(xué)試劑研究所),孟加拉紅(虎紅)瓊脂培養(yǎng)基(杭州市微生物試劑有限公司),營(yíng)養(yǎng)瓊脂(杭州微生物試劑有限公司),蛋白胨(臺(tái)灣基隆化學(xué)試劑有限公司),麥康凱瓊脂(北京奧博星生物技術(shù)有限公司),4-甲基傘型酮葡糖苷酸培養(yǎng)基(北京三藥科技開發(fā)公司)。

對(duì)照品:甘氨酸(中國(guó)藥品生物制品檢定所);樣品:河南偉鑫藥業(yè)生產(chǎn)鹿角膠及試制添加阿膠樣品。

1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備

電子天平:上海菁海儀器有限公司 FA2004A型;調(diào)熱電熱套、電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱電阻爐:北京中興偉業(yè)儀器有限公司ZDHW 型;萬(wàn)用電子爐:北京永光明儀療儀器廠;電動(dòng)離心機(jī):江蘇金壇城西曉陽(yáng)電子儀器廠800型;霉菌培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、超凈工作臺(tái):上海浦東榮豐科學(xué)儀器有限公司;不銹鋼手提式壓力滅菌鍋:寧波鎮(zhèn)海金鑫醫(yī)療器械有限公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)步驟

1.3.1 試驗(yàn)工藝

鹿角鋸段,漂泡洗凈,分次水煎,濾過,合并濾液,靜置,濾取膠液,濃縮(可加適量黃酒、冰糖、豆油和阿膠)至稠膏狀,冷凝 ,切塊,晾干 ,即得。

1.3.2 具體實(shí)施步驟

漂泡:將稱好的鹿角段置于清水池中,每料一池,并懸掛狀態(tài)標(biāo)記;加入飲用水,水面高出鹿角 5～10cm。春秋季浸泡2～3日,冬季浸泡3～5日。每日換水1～2次,將鹿角段中含有的血質(zhì)洗凈,否則收膠時(shí)易產(chǎn)生沉淀,保持水清潔無(wú)臭味,直至鹿角段徹底浸透。鋸段:取出鹿角,用刀鏟除腐肉及毛;鋸成20～30cm的段。洗:將鹿角投入轉(zhuǎn)鼓中,沖洗3～4h,至水清潔無(wú)泥沙為止。第一次提取:加飲用水1200L,密封,打開蒸汽進(jìn)汽閥加熱,使蒸球內(nèi)壓力控制在0.15～0.20MPa,轉(zhuǎn)動(dòng)蒸球使其溫度在105℃～115℃,保溫4h,將膠汁加壓經(jīng)過濾器打入貯液罐。第二次提取:加飲用水1000L,密封,打開蒸汽進(jìn)汽閥加熱,使球內(nèi)壓力控制在0.15～0.20MPa,轉(zhuǎn)動(dòng)蒸球使其溫度在105℃～115℃,保溫2h,將膠汁加壓經(jīng)過濾器打入貯液罐。提沫:吸取儲(chǔ)液罐膠汁經(jīng)200目篩過濾,轉(zhuǎn)入夾層鍋中;加熱至沸騰,保持表壓0.10～0.15MPa,繼續(xù)添加膠汁并不斷提出漂沫,每次提沫后加水約10kg,每1～1.5h提沫一次,至膠汁表面呈氣泡并有少量黃沫泛起,且膠汁呈清亮透明狀時(shí)結(jié)束提沫。將冰糖用1.5倍水溶化后過200目篩備用,可增加膠塊透明度和硬度,并有矯味作用;將大豆油過200目篩備用,可促進(jìn)鍋內(nèi)氣泡的逸散,起消泡作用,及后期便于切膠。依次加入上述備用大豆油、冰糖,攪拌使全部溶解。加入生產(chǎn)中傳遞的膠頭和阿膠,同時(shí)通入加熱蒸汽進(jìn)行濃縮。保持微沸,濃縮至膠液量為原膠液量的1/2時(shí),合并夾層鍋。將混合后的膠汁攪拌均勻,加熱至微沸,保持氣壓0.1MPa,繼續(xù)濃縮3～4h,鍋底產(chǎn)生大氣泡(發(fā)鍋)時(shí),攪拌下將黃酒加入濃縮的膠液中,可促進(jìn)濃縮過程中蛋白水解生成的大量胺類物質(zhì)的揮散,起矯臭味作用,同時(shí)利于氣泡逸散。繼續(xù)濃縮至膠液中水分在 25.0%～28.5%之間(冬季偏向26.0%～28.5%,春、秋、夏季偏向25.0%～27.0%),用鏟挑起膠液呈片狀而不墜落,俗稱“掛鏟”時(shí)出膠汁。

2 結(jié)果與討論

2.1 鹿角膠提沫時(shí)間對(duì)水不溶物的影響

對(duì)試制樣品的不同提沫時(shí)間進(jìn)行水不溶物項(xiàng)目檢測(cè),結(jié)果見表1。

表1 樣品提沫時(shí)間對(duì)水不溶物的影響

總結(jié):提沫15h以前水不溶物達(dá)不到內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)要求,18h以后水不溶物趨于穩(wěn)定,除增加能源和人力消耗外無(wú)實(shí)際意義。因此把鹿角膠提沫時(shí)間定為15.0～18.0h。

2.2 質(zhì)量分析

(1)鹿角膠與鹿角膠(加阿膠方)含量測(cè)定結(jié)果比較:按照中國(guó)藥典進(jìn)行檢驗(yàn),取我公司生產(chǎn)三批鹿角膠樣品與試制三批鹿角膠(含阿膠方)樣品,對(duì)上述試品進(jìn)行含量測(cè)定,結(jié)果見表2。

表2 鹿角膠與鹿角膠(加阿膠方)含量測(cè)定結(jié)果比較

結(jié)論:在鹿角膠(加入阿膠方)中經(jīng)檢驗(yàn)三批試制樣品含量測(cè)定項(xiàng)均達(dá)到藥典標(biāo)準(zhǔn)和企業(yè)內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)。

(2)鹿角膠與鹿角膠加阿膠方質(zhì)量檢驗(yàn)對(duì)照,見表3。

結(jié)論:鹿角膠與鹿角膠(加阿膠方)各項(xiàng)檢驗(yàn)結(jié)果均符合《中國(guó)藥典》之規(guī)定。

表3 鹿角膠與鹿角膠(加阿膠方)質(zhì)量檢驗(yàn)對(duì)照

2.3 鹿角膠的穩(wěn)定性研究

2.3.1 穩(wěn)定性研究方法和考察項(xiàng)目

根據(jù)中國(guó)藥典2010年版附錄XIXC藥物穩(wěn)定性試驗(yàn)指導(dǎo)原則,對(duì)樣品進(jìn)行加速試驗(yàn)和長(zhǎng)期試驗(yàn),以研究制劑穩(wěn)定性,除衛(wèi)生學(xué)檢查按照中國(guó)藥典2010年版附錄XⅢC微生物限度檢查法規(guī)定外,其余項(xiàng)目均按照藥物制劑穩(wěn)定性試驗(yàn)指導(dǎo)原則,對(duì)三批中試樣品(擬市銷售包裝)進(jìn)行穩(wěn)定性加速試驗(yàn)和穩(wěn)定性長(zhǎng)期試驗(yàn)?？疾祉?xiàng)目:性狀(外觀和色澤)、含氮量、微生物限度、水不溶物。

2.3.2 加速試驗(yàn)

取三批本品模擬市售包裝(試驗(yàn)用包材質(zhì)地、結(jié)構(gòu)與擬上市藥品包裝質(zhì)地、結(jié)構(gòu)一致),置(40±2)℃,相對(duì)濕度(75%±5%)的條件下放置6個(gè)月。試驗(yàn)期間分別于第1、2、3、6月末各取樣1次,進(jìn)行相關(guān)項(xiàng)目的考察,結(jié)果見表4。

表4 鹿角膠加速試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)論:本品經(jīng)(40±2)℃,相對(duì)濕度(75%±5%)的條件下考察6個(gè)月,在試驗(yàn)用包裝下質(zhì)量穩(wěn)定,直接接觸藥品的內(nèi)包材對(duì)藥品質(zhì)量不造成影響,結(jié)果三批樣品各項(xiàng)指標(biāo)均符合規(guī)定,表明本品質(zhì)量比較穩(wěn)定。因此將有效期暫定為3年。

2.3.3 長(zhǎng)期試驗(yàn)

取三批本品模擬市售包裝(試驗(yàn)用包材質(zhì)地、結(jié)構(gòu)與擬上市藥品包裝質(zhì)地、結(jié)構(gòu)一致),置(25±2)℃,相對(duì)濕度(60%±5%)的條件下放置36個(gè)月。試驗(yàn)期間分別于第0、3 、6 、9、12、18、24 、36 個(gè)月末各取樣1 次,進(jìn)行相關(guān)項(xiàng)目的考察,結(jié)果見表5。

結(jié)論:本品經(jīng)(25±2)℃,相對(duì)濕度(60%±5%)的條件下考察6個(gè)月,各項(xiàng)指標(biāo)與0月比較,基本一致,直接接觸藥品的包裝材料對(duì)藥品質(zhì)量穩(wěn)定性無(wú)影響,表明本品質(zhì)量比較穩(wěn)定。因此將有效期定為3年。

3 結(jié)論

鹿角膠是以祖國(guó)醫(yī)學(xué)理論為依據(jù),溫補(bǔ)肝腎,益精養(yǎng)血,用于血虛頭暈,腰膝酸冷,虛勞消瘦。鹿角膠原制法載于《中國(guó)藥典》2005年版一部,根據(jù)實(shí)驗(yàn)研究和古典文獻(xiàn),本文在原工藝中加入阿膠,不加阿膠難以成型,影響醫(yī)療上的使用,加少量阿膠,二者藥性相仿,不影響藥物療效。本文在鹿角膠中添加5%的阿膠作為輔料,不收入處方,收入制法項(xiàng)下。

表5 鹿角膠長(zhǎng)期試驗(yàn)結(jié)果

工藝上重點(diǎn)考察二次濃縮提沫工序,檢測(cè)水不溶物,將膠液提沫時(shí)間控制在16.5～19.5h,水不溶物即可達(dá)到內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn),同時(shí)膠液水分控制在25.0%～28.5%,便于切膠。

含量測(cè)定:藥典標(biāo)準(zhǔn)要求鹿角膠含總氮(N)量不得少于10.0%,所用阿膠含總氮量不得少于13.0%,本制劑制定內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)含氮(N)量不得少于11.0%。在試制三批樣品中,含量測(cè)定項(xiàng)均達(dá)到藥典標(biāo)準(zhǔn)和企業(yè)內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)。

穩(wěn)定性試驗(yàn):鹿角膠工藝中加入阿膠的樣品,經(jīng)過6個(gè)月的加速試驗(yàn)和36個(gè)月的長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn),鹿角膠的各項(xiàng)檢測(cè)均保持穩(wěn)定,符合《中國(guó)藥典》標(biāo)準(zhǔn)要求。

總之,本試驗(yàn)結(jié)果表明,鹿角膠工藝設(shè)計(jì)合理,制備方法簡(jiǎn)便,制劑穩(wěn)定性好。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部)[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:225-226.

[2]明?李時(shí)珍.本草綱目[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1982.

[3]明?李時(shí)珍,著.王育杰,整理.本草綱目[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1999:2222.