楊媛媛

(南陽醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校,河南 南陽 473061)

新疆赤芍(Radix Paeonia hybrida)是新疆芍藥(P.sinjiangensis K.Y.Pan)和塊根芍藥(P.anomala L.)的統(tǒng)稱,是與川赤芍同科同屬植物,資源豐富,目前在新疆地區(qū)作為赤芍的代用品大量應(yīng)用。新疆赤芍植物來源廣泛,由于受產(chǎn)地、生長條件、采收時間、炮制方法及貯藏等因素影響,藥材質(zhì)量不穩(wěn)定,臨床應(yīng)用較混亂,且偽品較多,因此有必要建立新疆赤芍的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[1]。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

卡瑪Linomat 5半自動點樣儀;卡瑪reprostar 3成像系統(tǒng);YX型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(山東甄城永興儀器廠);馬弗爐(北京煤化所煤質(zhì)儀器研制中心);OLYMPUS DP12顯微鏡(日本OLYMPUS公司);Sartorious電子天平(萬分之一);高速萬能粉碎機(jī)(北京中興偉業(yè)儀器有限公司);硅膠G板(規(guī)格:100mm×200mm;青島海洋化工廠分廠);薄層板加熱器;DHP-120型恒溫水浴鍋(北京長安科學(xué)儀器廠);CW-1Y自動控溫冷卻循環(huán)水裝置等。

1.2 試劑和藥品

甲醇;乙醇 ;乙醚;硫酸;醋酐;氯仿;乙酸乙酯 ;甲酸 ;鹽酸;正丁醇;冰醋酸;5%香草醛的硫酸溶液;茚三酮試液;氫氧化鈉;水合氯醛甘油溶液等。芍藥苷對照品(批號為110736-200630);赤芍(批號為1093-200001)和川赤芍(批號為1092-200001)對照藥材;甘氨酸(735-200102);丙氨酸(0873-9802);蘇氨酸(889-200102);絲氨酸(631-9402);組氨酸(890-200001);精氨酸(872-200203)。以上對照品和對照藥材均購自中國藥品生物制品檢定所。

新疆赤芍各批藥材樣本名稱和產(chǎn)地見表1。經(jīng)新疆藥檢所專家鑒定,各批藥材均為毛茛科植物新疆芍藥(P.sinjiangensis K.Y.Pan)或塊根芍藥(P.anomala L.)的根。

2 芍藥苷的鑒別

2.1 化學(xué)鑒別

取藥材粉末約0.5g,用乙醚加熱回流1h,濾過,濾液蒸干,加醋酐與硫酸,先顯黃色,漸變成紅色、紫色,最后呈綠色。

2.2 薄層鑒別[2]

稱取藥材粉末0.5g,用乙醇10mL超聲處理20min,過濾,濾液蒸干,殘渣加乙醇2mL使溶解,作為供試液。另取芍藥苷對照品,加乙醇制成2mg/mL的對照品溶液。吸取上述兩種溶液各4μ L,分別點于同一硅膠G薄層板上,以氯仿-甲醇-乙酸乙酯-甲酸(40∶5∶10∶0.2)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以5%香草醛硫酸溶液,加熱至斑點顯色清晰。其薄層鑒定結(jié)果見圖1。

表1 新疆赤芍各批藥材樣本

圖1 薄層鑒別圖譜

化學(xué)鑒別的結(jié)果表明實驗藥材中含有苷類成分;薄層鑒別的結(jié)果,供試品色譜中,在與對照品相同位置處均出現(xiàn)藍(lán)色斑點,這表明各批藥材樣品中均含有芍藥苷。

3 蛋白質(zhì)和氨基酸的鑒別

3.1 化學(xué)鑒別

3.1.1 雙縮脲實驗

將樣品粉末用6mol/L鹽酸溶液在110℃烘箱中水解后,過濾,在濾液中逐漸加入硫酸銅試液,隨加搖勻,溶液呈現(xiàn)紫紅色。

3.1.2 茚三酮實驗

將樣品粉末用6mol/L鹽酸溶液在110℃烘箱中水解后,過濾,在濾液中加入茚三酮試液,加熱煮沸,待其冷卻,呈現(xiàn)紅棕色。

3.2 薄層鑒別

3.2.1 供試品的制備

精密吸取供試品溶液1mL,置水解罐中,加6mol/L的鹽酸溶液約10mL,減壓抽真空30min,充入氮氣2min,密閉,置110℃烘箱中水解24h,冷卻,80℃充氮氣蒸干,用0.01mol/L的氫氧化鈉溶液定容至50mL容量瓶中,過濾,即得。

3.2.2 對照品溶液的制備

取蘇氨酸、絲氨酸、組氨酸、甘氨酸、丙氨酸和精氨酸各約7mg,精密稱定,加0.01mol/L的氫氧化鈉溶液分別定容至50mL容量瓶中,即得對照品溶液。

取供試品溶液及對照品溶液各5μ L,分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上(自然干燥),以正丁醇-冰醋酸-水(19∶5∶5)為展開劑,展開,取出,熱風(fēng)吹干,噴以茚三酮試液,在 105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,均顯紅色斑點。該薄層鑒定結(jié)果見圖2。

4 顯微鑒別

將阿勒泰小東溝產(chǎn)的新疆芍藥、奇臺碧流河鄉(xiāng)產(chǎn)的塊根芍藥粉末和赤芍對照藥材過7號篩(120目,孔徑0.125),取少許置載玻片上,用滴管滴3滴水合氯醛甘油溶液,置酒精燈上稍烤,蓋上蓋玻片,將制備好的樣品置顯微鏡上,觀察其各個組織,并拍攝特征部分。其顯微特征見圖3、圖4及表2。

表2 藥材粉末顯微特征的比較

5 水分、浸出物和總灰分的測定

5.1 水分測定

測定各新疆赤芍藥材的水分含量數(shù)據(jù),評價其質(zhì)量為進(jìn)行下一步含量研究作準(zhǔn)備。30批藥材水分含量結(jié)果見表3。

表3 藥材水分含量結(jié)果

在對30批藥材測定的同時,也測定藥典收載的赤芍,其中赤芍的水分含量是7.2%,川赤芍為7.6%,30批新疆赤芍的水分含量結(jié)果比較接近,并與藥典赤芍一致。

5.2 浸出物測定

按照中國藥典2005年版ⅨK浸出物測定法,從浸出物量評價新疆赤芍的品質(zhì)及質(zhì)量。浸出物量結(jié)果見表4。

在對30批藥材測定的同時,也測定藥典收載的赤芍,其中赤芍的浸出物含量是57.8%,川赤芍為52.6%,30批新疆赤芍的浸出物含量與藥典赤芍一致。

5.3 總灰分測定

從藥材總灰分量評價新疆赤芍的品質(zhì)及質(zhì)量?？偦曳至繙y定結(jié)果見表5。

表4 浸出物量結(jié)果

表5 總灰分測定結(jié)果

在對30批藥材測定的同時也測定藥典收載的赤芍,其中赤芍的總灰分含量是6.3%,川赤芍為6.9%,30批新疆赤芍的總灰分含量與藥典赤芍一致。

6 討論

目前在維吾爾醫(yī)院臨床應(yīng)用的芍藥藥材均為塊根芍藥或狹葉芍藥(亦稱新疆芍藥)的塊根[3],在新疆地區(qū)人們把新疆芍藥和塊根芍藥統(tǒng)稱為新疆赤芍。通過對新疆赤芍中的芍藥苷和氨基酸定性分析,我們初步了解到本課題所研究的藥材含有豐富的有效成分芍藥苷和多種氨基酸,對進(jìn)一步的研究具有指導(dǎo)意義。通過對30批藥材進(jìn)行水分、浸出物和總灰分的測定,我們發(fā)現(xiàn)浸出物的含量普遍較高,而總灰分的含量普遍較低,并且與藥典收載的赤芍一致。

[1]楊媛媛.不同產(chǎn)地新疆赤芍中芍藥苷的含量測定[J].醫(yī)藥導(dǎo)報,2008,27(7):763-764.

[2]國家藥典委員會.中國藥典[S].一部.附錄.2010.

[3]汪陽,張峻沛,張彥福,等.維吾爾藥芍藥的本草考證[J].新疆中醫(yī)藥,1998,16(3):32-33.