朱海龍 秦華麗 張 翠

(皖南醫(yī)學院病理生理學教研室 安徽 蕪湖 241002;①南京農業(yè)大學醫(yī)院內科)

眾所周知，高血壓可以損害心、腦、腎等人體的重要器官，造成中風、心肌梗死、腎功能衰竭等。糖尿病合并高血壓后更加重了心血管病變的危險性[1]。因此，對糖尿病高血壓的發(fā)病機理進行研究非常重要。本文就腫瘤壞死因子α(TNF－α)對鏈脲佐菌素(Streptozotocin，STZ)誘導糖尿病大鼠血壓的影響進行了初步探討，以期為糖尿病高血壓的發(fā)病機制研究提供資料。

1 材料與方法

1.1 材料 STZ(Sigma公司)，葡萄糖試劑盒(長春迪瑞實業(yè))，重組人Ⅱ型TNFα受體－抗體融合蛋白(上海中信國健藥業(yè))，血糖儀及血糖檢測試紙(freestyle)，酶標儀(美伯樂680型)，RM6240生物信號處理系統(tǒng)(成都儀器廠)。健康SD(Sprayue Dawley)大鼠32只，體重(185±10)g，由南京青龍山實驗動物繁殖場提供。

1.2 方法 建立糖尿病大鼠模型，見[2]，方法略有改動。將32只SD大鼠隨機分為對照組、觀察組及預防組。其中觀察組及預防組各11只，經腹腔一次性注射STZ 45mg/kg，并以高脂飼料喂養(yǎng)。對照組大鼠10只，腹腔注射同體積的檸檬酸鈉－檸檬酸緩沖液，予基礎飼料。第3周開始，每隔3天為預防組大鼠腹腔注射1次TNFα受體－抗體融合蛋白(0.4mg/kg)，連續(xù)用藥4周，其它各組每次注射同體積的生理鹽水對照。

1.3 檢測項目 用藥結束后，存活大鼠禁食12小時，25%烏拉坦(4mL/kg)，麻醉后行頸總動脈插管，并與RM6240生物信號處理系統(tǒng)相連，記錄血壓。另取血測定大鼠空腹血糖(FBG)，方法采用葡萄糖氧化酶法。

1.4 統(tǒng)計學處理 數(shù)據(jù)采用SPSS10.0軟件處理，計量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差()表示，兩組比較采用t檢驗。

2 結果

與對照組(正常)大鼠相比，觀察組(糖尿病)大鼠的血糖水平和血壓顯著升高，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。預防組(注射有TNF－α受體－抗體的糖尿病大鼠)與對照組相比，血壓雖有升高，但差異無統(tǒng)計學意義。預防組與觀察組相比，大鼠的收縮壓明顯下降，且差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 3組大鼠血壓、FBG比較(例，)

表1 3組大鼠血壓、FBG比較(例，)

注:觀察組與對照組比較，▲▲P ＜0.05;預防組與對照組比較，▲P ＜0.05;與觀察組比較，△P ＜0.05

組別 例數(shù) 體重(g) 收縮壓(mmHg) 舒張壓(mmHg) FBG(mmol/L)對照組 7 245.71 ±29.74 80.84 ±18.16 49.05 ±11.40 7.86±0.61觀察組 7 251.00 ±57.08 109.48±19.07▲▲ 72.07±19.85▲▲ 20.45±7.45▲▲預防組 8 271.12 ±33.45 85.52±15.69△ 54.85±15.49 13.59±2.22▲

3 討論

糖尿病高血壓的相關研究表明，45歲糖尿病患者中40%并發(fā)高血壓，而在75歲左右的患者中患病率上升至60%[3]。糖尿病合并高血壓后對人體的威脅更為嚴重，比如糖尿病合并高血壓可加速心臟血管及腎臟血管的病變，從而誘發(fā)和加劇糖尿病腎病的進展，腎病形成后會進一步使血壓升高，形成惡性循環(huán)，導致腎功能衰竭。因此對糖尿病高血壓的發(fā)病機理進行研究非常重要。近年來炎癥反應在糖尿病發(fā)病中的作用受到廣泛關注[4]。TNF－α主要由活化的巨噬細胞產生，是生物體內重要的炎癥介質之一。其與受體結合后，可通過級聯(lián)信號轉導，啟動多種蛋白激酶及磷酸酯酶的活化，從而參與多種臨床疾病的發(fā)病。如在脂肪肝及胰島素抵抗的發(fā)生發(fā)展中，TNF－α起著重要作用[5，6]。另有文獻報道 TNF － α 不僅能通過損傷內皮細胞，致使內皮功能紊亂;還能通過促進內皮細胞C－sis基因表達，產生血小板衍化生長因子，促進血管平滑肌細胞的增殖，可能參與糖尿病高血壓的形成[3]。本研究通過皮下注射重組人Ⅱ型TNF－α受體－抗體融合蛋白，阻斷TNF－α和細胞表面TNF受體結合，從而降低TNF－α活性，觀察其是否具有減緩糖尿病血壓上升的作用。最終實驗結果顯示，未注射TNF－α受體－抗體的糖尿病大鼠的血糖和血壓與對照組相比均顯著升高。而注射有TNF－α受體－抗體的糖尿病大鼠與觀察組相比，收縮壓明顯下降。這說明TNF－α可能參與糖尿病大鼠血壓的上升。在整個研究過程中，我們發(fā)現(xiàn)無論正常大鼠還是糖尿病大鼠血壓普遍不高，這可能與麻醉藥品烏拉坦的降壓效應以及季節(jié)因素導致大鼠體溫偏低有關[7]。綜合研究結果顯示，TNF－α與糖尿病高血壓的形成具有一定的相關性，但TNF－α是否參與血壓上升的整個過程，是否還有其它的炎癥因子共同參與其中，還需進一步研究。

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[2]陳 旺，李 鴻，郭 健，等.培達對STZ糖尿病大鼠血脂及血流變學指標影響的觀察[J].實驗動物科學與管理，2006，23(3):12

[3]楊 偉，李海輝.2型糖尿病合并高血壓患者大血管病變的炎性機制[J].中國醫(yī)師雜志，2006，8(10):1355

[4]李 慧，鄒大進.2型糖尿病及肥胖與慢性炎癥因子[J].第二軍醫(yī)大學學報，2003，24(11):1244

[5]Sougioultzis S，Dalakas E，Hayes PC，et al.Alcoholic hepatitis:from pathogenesis to treatment[J].J Curr Med Res Opin，2005，21(9):1337

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