穆春宇，于子洋，王自然

（山東省臨沂大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院動(dòng)物醫(yī)學(xué)系，山東 臨沂 276005）

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 試驗(yàn)藥物 優(yōu)溴胺原粉（含量98%，批號(hào)20110209）由山東魯港福友藥業(yè)有限公司提供；對(duì)照藥物硫酸阿米卡星（含量98%，批號(hào)20101102）、頭孢噻呋鈉（含量96%，批號(hào)20110113）和鹽酸左旋氧氟沙星（含量98%，批號(hào)20110204）原粉均由山東省某制藥有限公司提供。

1.1.2 試驗(yàn)試劑 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、麥康凱營養(yǎng)瓊脂，均購自北京陸橋技術(shù)有限公司。

1.1.3 試驗(yàn)儀器 420-型電熱恒溫培養(yǎng)箱，SW-WJLCU-潔凈工作臺(tái)，YXQG02-型電熱式蒸汽消毒器，電子天平，常用玻璃器皿等。

1.1.4 試驗(yàn)動(dòng)物 480只1日齡艾維茵商品肉仔雞，購自山東臨沂康華孵化廠。

1.1.5 試驗(yàn)菌種 雞大腸桿菌O78血清型，購自中國獸藥監(jiān)察所。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試驗(yàn)菌液制備 將保存的強(qiáng)毒菌種復(fù)壯后，劃線接種于麥康凱瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)18～24h，然后用滅菌接種環(huán)挑取單個(gè)典型菌落接種于5mL肉湯培養(yǎng)基中，置37℃培養(yǎng)18～24 h后取出，再取肉湯培養(yǎng)物接種肉仔雞復(fù)壯。從死亡雞肝臟和心血中無菌操作分離大腸桿菌并重新接種麥康凱瓊脂平板培養(yǎng)后，再挑取典型菌落接種于營養(yǎng)肉湯中，37℃培養(yǎng)18～24 h，用菌落平板計(jì)數(shù)法測(cè)定其生長濁度，達(dá)3×108CFU·mL-1以上者作為試驗(yàn)菌液。

1.2.2 試驗(yàn)分組與接種 艾維茵商品肉仔雞出殼后立即運(yùn)回實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)室，網(wǎng)上常規(guī)飼養(yǎng)，喂不含抗菌藥物的全價(jià)飼料，自由采食及飲水，并作臨床觀察記錄。選取420羽雛雞隨機(jī)分為14組，每組30羽，稱重、標(biāo)記、分籠飼養(yǎng)，飼養(yǎng)至7日齡時(shí)人工感染雞大腸桿菌，感染后觀察7 d。試驗(yàn)雞分組及處理情況見表1。

表1 試驗(yàn)雞的給藥分組及處理

1.2.3 人工誘發(fā)雛雞感染大腸桿菌病 接種量和細(xì)菌數(shù)除健康對(duì)照組外，其他所有試驗(yàn)雛雞均腹腔注射試驗(yàn)菌液0.5mL，約含1.5億個(gè)菌。觀察接種前后雛雞的臨床變化，主要包括精神狀態(tài)、食欲和糞便等變化，并分別記錄。健康對(duì)照組每只注射滅菌生理鹽水0.5mL。

1.2.4 預(yù)防和治療 按表1的試驗(yàn)方案進(jìn)行預(yù)防和治療用藥。感染后7 d內(nèi)觀察雞的臨床癥狀變化，對(duì)死亡雞進(jìn)行病理剖檢，從肝臟中分離培養(yǎng)細(xì)菌，以確定死因。

1.3 療效評(píng)價(jià)指標(biāo)

1.3.1 保護(hù)率 經(jīng)預(yù)防用藥后，試驗(yàn)雛雞未出現(xiàn)臨床感染癥狀，精神狀態(tài)、飲食欲等均正常，即為受保護(hù)雛雞。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)束時(shí)每組受保護(hù)的雞只數(shù)計(jì)算保護(hù)率。

1.3.2 死亡率 凡在試驗(yàn)期間出現(xiàn)雞大腸桿菌病的典型癥狀并死亡，尸體剖檢有典型的特征性病變，并從肝臟、心血中分離培養(yǎng)出大桿腸菌的，判為感染死亡。按死亡數(shù)計(jì)算各組的死亡率。

1.3.3 治愈率 凡在試驗(yàn)期間經(jīng)治療給藥后，精神狀態(tài)、食欲、糞便恢復(fù)正常，不再出現(xiàn)明顯的感染癥狀均屬治愈。根據(jù)治愈雞數(shù)計(jì)算治愈率。

1.3.4 有效率 經(jīng)治療用藥后，治愈或臨床癥狀表現(xiàn)為病雞精神狀態(tài)好轉(zhuǎn)、食欲恢復(fù)等均視為有效。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)束時(shí)每組存活的雞數(shù)計(jì)算有效率，即總有效率。

2 結(jié)果與分析

2.1 預(yù)防試驗(yàn)結(jié)果 由表2可知，優(yōu)溴胺高、中、低劑量組，硫酸阿米卡星組，鹽酸左旋氧氟沙星組和頭孢噻呋鈉組對(duì)雛雞的保護(hù)效果明顯，其保護(hù)率分別為93.3%、93.3%、73.3%、73.3%、63.3%、73.3%，而感染對(duì)照組的自愈率僅為10.0%，差異均極顯著（P＜0.01）；另外，優(yōu)溴胺高、中劑量組與硫酸阿米卡星組、鹽酸左旋氧氟沙星組、頭孢噻呋鈉組、優(yōu)溴胺低劑量組比較，差異顯著（P＜0.05）；優(yōu)溴胺低劑量組與硫酸阿米卡星組、鹽酸左旋氧氟沙星組、頭孢噻呋鈉組比較，差異不顯著（P＞0.05）。

表2 優(yōu)溴胺對(duì)人工誘發(fā)雞大腸桿菌病的預(yù)防試驗(yàn)結(jié)果

2.2 治療試驗(yàn)結(jié)果 4種藥物對(duì)致病雛雞的治療均取得了較好的效果，結(jié)果見表3。優(yōu)溴胺高、中、低劑量組以及硫酸阿米卡星組、鹽酸左旋氧氟沙星組、頭孢噻呋鈉組的治愈率、有效率與健康對(duì)照組、感染對(duì)照組比較，差異均極顯著（P＜0.01）；優(yōu)溴胺高、中劑量組的治愈率和有效率與頭孢噻呋鈉組、硫酸阿米卡星組、鹽酸左旋氧氟沙星組、優(yōu)溴胺低劑量組比較，差異均顯著（P＜0.05），優(yōu)溴胺高、中劑量組之間比較，其治愈率和有效率差異不顯著（P＞0.05）；優(yōu)溴胺低劑量組的治愈率和有效率與硫酸阿米卡星組、頭孢噻呋鈉組、鹽酸左旋氧氟沙星組比較，差異也不顯著（P＞0.05）。

表3 優(yōu)溴胺對(duì)人工誘發(fā)雞大腸桿菌病的治療試驗(yàn)結(jié)果

3 討論與結(jié)論

本次預(yù)防試驗(yàn)中，優(yōu)溴胺高、中劑量組的保護(hù)率均在93.3%以上，比硫酸阿米卡星組、鹽酸左旋氧氟沙星組和頭孢噻呋鈉組分別提高了20%、30%、20%，差異顯著（P＜0.05）；治療試驗(yàn)中，優(yōu)溴胺高、中劑量組的治愈率平均在88.4%以上，比硫酸阿米卡星組、鹽酸左旋氧氟沙星組和頭孢噻呋鈉組分別提高了18.4%、25.1%、21.7%，差異顯著（P＜0.05）；優(yōu)溴胺高、中劑量組的有效率平均為95%，比硫酸阿米卡星組、鹽酸左旋氧氟沙星組和頭孢噻呋鈉組分別提高了15.0%、21.7%、15.0%，差異顯著（P＜0.05）；優(yōu)溴胺高、中劑量組之間比較，其保護(hù)率和治愈率均無明顯差異。試驗(yàn)結(jié)果表明，中劑量的優(yōu)溴胺在臨床上對(duì)雛雞大腸桿菌病有較好的預(yù)防和治療效果。

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