王 磊 章 瑩 費(fèi)世早 龐洪波 陳觀保 儲(chǔ)照虎

脂蛋白相關(guān)磷脂酶A 2(Lp-PLA 2)作為一種新型炎癥標(biāo)志物,參與了粥樣硬化斑塊形成的起始、發(fā)展和穩(wěn)定性喪失及最終破裂各個(gè)階段,可能是缺血性腦卒中新型獨(dú)立危險(xiǎn)因素。人循環(huán) Lp-PLA 2以與脂蛋白顆粒結(jié)合的形式存在,其中2/3與低密度脂蛋白(LDL)結(jié)合,1/3與高密度脂蛋白(HDL)和脂蛋白(a)[Lp(a)]結(jié)合。Lp-PLA 2可水解sn-2位含有多不飽和脂肪酰基的氧化磷脂,生成溶血卵磷脂和氧化型游離脂肪酸,后兩者為炎癥介質(zhì),可導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞功能和穩(wěn)定性喪失,從而促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2008年12月～2009年8月皖南醫(yī)學(xué)院附屬弋磯山醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的急性ACI患者(168例,其中男100例,女 68例)為 ACI組,平均年齡(64.69±9.80)歲。對(duì)照組為體檢中心體檢健康者(72例,其中男36例,女 36例),平均年齡(61.67±6.44)歲。

1.2 ACI組納入標(biāo)準(zhǔn) 發(fā)病后24 h內(nèi)入院,所有病例均符合1995年全國(guó)第4屆腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議修訂的腦梗死診斷標(biāo)準(zhǔn);同時(shí)參考CISS分型標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行病因分型;均經(jīng)詳細(xì)的神經(jīng)系統(tǒng)檢查及頭顱核磁共振、頸部血管彩超、心臟彩超、心電圖等檢查確診。排除以下情況：(1)出血性腦卒中,梗死后腦出血;(2)腔隙性腦梗死、無(wú)癥狀性腦梗死、動(dòng)脈炎性腦梗死;(3)有明確栓子來(lái)源的腦栓塞;先天發(fā)育異常所致的腦梗死;(4)各種凝血機(jī)制異常、血液系統(tǒng)疾病及高粘血癥所致的腦梗死;(5)合并有冠心病、周?chē)芗膊〉哪X梗死。

1.3 對(duì)照組納入標(biāo)準(zhǔn) 年齡、性別與ACI組相匹配(P＞0.05),經(jīng)病史詢問(wèn)既往無(wú)腦血管病病史,且經(jīng)頭顱核磁共振證實(shí)無(wú)腦卒中。

1.4 ACI組分組 腦梗死面積分組：按照Adam s分類(lèi)法,分為大面積梗死組(96例)(面積大于3 cm2累及2個(gè)以上腦解剖部位)和小面積梗死組(72例)(面積1.5～3 cm2累及1個(gè)腦解剖部位)。神經(jīng)功能缺損程度分組：按美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院卒中量表(NIHSS)進(jìn)行神經(jīng)功能缺損程度評(píng)估,分為輕型梗死組(32例)(＜4分)、中型梗死組(116例)(≤4～15分)、重型梗死組(20例)(≥15分)。

1.5 標(biāo)本采集 ACI組、對(duì)照組分別空腹采集靜脈血2m l,用EDTA作為抗凝劑,混合10～20 min后離心20 min左右(2 000～3 000 r/m in),仔細(xì)收集上清液,將標(biāo)本放于-80℃冰箱統(tǒng)一保存。為減少批間誤差和測(cè)量誤差,全部標(biāo)本采集完成后1次性檢測(cè)。

1.6 Lp-PLA 2水平 應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人脂蛋白磷脂酶A 2(Lp-PLA 2)水平,操作流程按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。其余常規(guī)生化檢測(cè)指標(biāo)由皖南醫(yī)學(xué)院附屬弋磯山醫(yī)院檢驗(yàn)科完成。

2 結(jié) 果

2.1 ACI組與對(duì)照組一般資料比較 ACI組與對(duì)照組年齡、性別、吸煙史、飲酒史發(fā)生率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);ACI組高血壓病、糖尿病發(fā)生率均高于對(duì)照組(P＜0.05)(表1)。

2.2 ACI組與對(duì)照組常見(jiàn)臨床生化指標(biāo)比較ACI組與對(duì)照組 LDLC、TC、TG 、Fib水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);ACI組HDLC水平明顯低于對(duì)照組(P＜0.01)(表2)。

表2 ACI組與對(duì)照組常見(jiàn)臨床指標(biāo)比較(±s)

組別LDLC(mmol/L)HDLC(mmol/L)TC(mmol/L)TG(mmol/L)Fib(g/L)ACI組 2.528±0.564 1.071±0.324 4.341±0.748 1.798±1.144 3.807±2.346對(duì)照組 2.547±0.646 1.259±0.306 4.098±1.459 1.471±0.839 3.207±1.267 t-0.147 -2.952 0.948 1.539 1.444 P 0.884 0.004 0.349 0.126 0.151

2.3 ACI組與對(duì)照組血漿 Lp-PLA 2水平 ACI組血漿Lp-PLA 2水平明顯高于對(duì)照組(P＜0.01)(表3)。

表3 ACI組與對(duì)照組 Lp-PLA2 水平(±s,μg/L)

表3 ACI組與對(duì)照組 Lp-PLA2 水平(±s,μg/L)

組別 例數(shù)(n) Lp-PLA 2水平ACI組 168 12.058±7.104對(duì)照組 72 7.269±3.112 t 5.136 P 0.000

2.4 血漿Lp-PLA 2水平與腦梗死面積的關(guān)系 血漿Lp-PLA 2水平隨腦梗死面積增加而呈遞增趨勢(shì),但不同腦梗死面積血漿Lp-PLA 2水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)(表4)。

表4 血漿 Lp-PLA 2水平與梗死面積的關(guān)系(±s,μg/L)

表4 血漿 Lp-PLA 2水平與梗死面積的關(guān)系(±s,μg/L)

組別 例數(shù)(n) Lp-PLA 2水平(μg/L)大面積腦梗死組 96 13.083±7.981小面積腦梗死組 72 10.151±6.094 t 1.853 P 0.068

2.5 血漿Lp-PLA 2水平與神經(jīng)功能缺損程度的關(guān)系 神經(jīng)功能缺損程度越重,血漿Lp-PLA 2水平越高,組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),進(jìn)一步行SNK-q檢驗(yàn),3組間兩兩比較輕型梗死組與中型、重型梗死組比較血漿Lp-PLA 2水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)(表5)。

表5 血漿Lp-PLA 2水平與神經(jīng)功能缺損程度的關(guān)系(±s,μg/L)

表5 血漿Lp-PLA 2水平與神經(jīng)功能缺損程度的關(guān)系(±s,μg/L)

注：?jiǎn)我蛩胤讲罘治?F檢驗(yàn)),P＜0.05;SNK-q檢驗(yàn),與輕型梗死組比較,△P＜0.05(P=0.022)

組別 例數(shù)(n) Lp-PLA 2水平(μg/L)輕型梗死組 32 7.092±1.606中型梗死組 116 12.493±7.406△重型梗死組 20 14.843±9.096△F 3.757 P 0.028*

2.6 血漿Lp-PLA 2水平與ACI患者常見(jiàn)危險(xiǎn)因素的相關(guān)性分析 血漿Lp-PLA 2水平與性別,CRP呈正相關(guān);與吸煙、飲酒呈負(fù)相關(guān);與年齡、高血壓病 、糖尿病 、TC 、TG 、LDLC 、HDLC 、Fib、Lp(a)均無(wú)關(guān)(表6)。

表6 Lp-PLA2水平與常見(jiàn)危險(xiǎn)因素的Spearman相關(guān)分析

2.7 男女患者血漿Lp-PLA 2水平比較 男性患者血漿Lp-PLA 2水平明顯高于女性患者(P＜0.05)(表7)。

表7 ACI組不同性別間Lp-PLA 2和其他相關(guān)生化指標(biāo)比較

2.8 Lp-PLA2水平對(duì)ACI的診斷效用 Lp-PLA2水平在診斷ACI過(guò)程中ROC曲線下面積為0.700(P=0.01);95%CI為(0.599～0.800)(圖1)。

圖1 Lp-PLA 2在診斷ACI過(guò)程中ROC曲線

3 討 論

炎癥和氧化應(yīng)激在動(dòng)脈粥樣硬化形成過(guò)程中起著重要作用[1],脂蛋白相關(guān)磷脂酶A 2(Lp-PLA 2)作為一種新型炎癥標(biāo)志物,與血管壁周?chē)装Y發(fā)生密切相關(guān),與傳統(tǒng)炎癥標(biāo)志物如CRP相比,受全身炎癥狀態(tài)影響較小,血漿Lp-PLA 2水平的升高可以特異性地反映血管壁周?chē)装Y狀態(tài)的存在[2]。Lp-PLA 2不僅參與了動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成,并且與斑塊穩(wěn)定性喪失以及最終破裂相關(guān),對(duì)缺血性腦卒中的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)和預(yù)后具有早期預(yù)測(cè)價(jià)值,其特異性抑制劑已被證明具有抗動(dòng)脈粥樣硬化作用,有望成為缺血性腦卒中的新型治療靶標(biāo)[2]。

3.1 血漿Lp-PLA 2水平與ACI的關(guān)系 鹿特丹前瞻性病例隊(duì)列研究表明Lp-PLA 2活性高低與缺血性腦卒中發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)密切相關(guān)[3];Ballantyne等研究表明缺血性腦卒中患者血漿Lp-PLA 2水平明顯高于非腦卒中病例[4];瑞典的一項(xiàng)基于人群的前瞻性隊(duì)列研究表明Lp-PLA 2活性與含量與缺血性腦卒中風(fēng)險(xiǎn)獨(dú)立相關(guān)[5];國(guó)內(nèi)梁江紅[6]、王大力[7]等研究結(jié)果亦證實(shí)ACI患者血漿Lp-PLA 2水平明顯升高。本研究結(jié)果顯示ACI組血漿Lp-PLA 2水平明顯高于對(duì)照組,與國(guó)內(nèi)外研究結(jié)果相似,而LDLC、TC、TG、Fib水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;血漿 Lp-PLA 2水平明顯低于國(guó)內(nèi)報(bào)道結(jié)果,推測(cè)可能與所使用的試劑盒、檢測(cè)方法、血漿冷凍保存時(shí)間長(zhǎng)短有關(guān)。本研究結(jié)果表明,血漿Lp-PLA 2水平升高可能是缺血性腦卒中發(fā)生的危險(xiǎn)因素,并且與傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素 LDLC、TC、TG、Fib相比,Lp-PLA 2可能與缺血性腦卒中具有更好的相關(guān)性。

3.2 血漿Lp-PLA2水平與腦梗死面積的關(guān)系 本研究結(jié)果顯示,大面積腦梗死組血漿Lp-PLA 2水平高于小面積腦梗死組,血漿Lp-PLA 2水平隨梗死面積增加呈遞增趨勢(shì),但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,這與國(guó)內(nèi)研究結(jié)果[6]相似。本研究結(jié)果提示,血漿Lp-PLA2水平不能作為預(yù)測(cè)梗死面積大小指標(biāo),其原因可能是病初梗死面積大小與血管阻塞程度、血管支配區(qū)域以及是否存在側(cè)支循環(huán)有關(guān),而ACI患者急性期血漿Lp-PLA2水平升高反映的是腦卒中后機(jī)體對(duì)血小板功能活躍的對(duì)應(yīng)性變化,故不能反映梗死面積大小。

3.3 血漿Lp-PLA 2水平與神經(jīng)功能缺損程度的關(guān)系 本研究結(jié)果顯示,神經(jīng)功能缺損程度越高,血漿Lp-PLA 2水平越高,血漿 Lp-PLA 2水平與神經(jīng)功能缺損程度呈正相關(guān),能夠反映病情的嚴(yán)重程度,與國(guó)內(nèi)研究結(jié)果[7]相似。神經(jīng)功能缺損程度的高低與梗死部位(功能區(qū)不同)、梗死面積大小、側(cè)支循環(huán)供應(yīng)等情況有關(guān);不管哪種類(lèi)型梗死,均首先發(fā)生微循環(huán)障礙,神經(jīng)細(xì)胞、膠質(zhì)細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等腦細(xì)胞變性壞死和巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。國(guó)內(nèi)章興甫研究發(fā)現(xiàn),腦梗死神經(jīng)功能缺損程度與炎癥細(xì)胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β含量呈正相關(guān)[8];趙常寶等研究發(fā)現(xiàn)神經(jīng)功能缺損程度與炎癥細(xì)胞因子TNF-α、IL-1β、s-ICAM-1 含量呈正相關(guān)[9]。因此,本研究推測(cè)梗死后微循環(huán)障礙,Lp-PLA 2反應(yīng)性產(chǎn)物經(jīng)代謝產(chǎn)生眾多的炎癥介質(zhì)如白細(xì)胞介素、腫瘤壞死因子等炎癥因子,它們之間相互促進(jìn)、相互聯(lián)系,從而形成一個(gè)由Lp-PLA 2介導(dǎo)的炎癥信號(hào)傳導(dǎo)通路而加重缺血性腦損傷。

3.4 血漿Lp-PLA 2水平與ACI常見(jiàn)危險(xiǎn)因素的相關(guān)性分析 已有研究結(jié)果表明,Lp-PLA 2活性主要與LDL[10]、性別[11]、種族、鐵蛋白水平以及他汀類(lèi)藥物使用有關(guān);國(guó)內(nèi)吳延華等研究發(fā)現(xiàn)Lp-PLA 2活性僅與性別有關(guān)[12];王大力等研究認(rèn)為血清Lp-PLA 2水平與性別、年齡、TC、LDLC呈正相關(guān),與HDLC呈負(fù)相關(guān);梁江紅等研究發(fā)現(xiàn)血漿Lp-PLA 2水平與HDLC呈負(fù)相關(guān),與TC、LDLC呈正相關(guān),而與性別 、年齡、TG 、吸煙 、高血壓 、CRP 均無(wú)關(guān)[7];國(guó)外Elkind等研究認(rèn)為hs-CRP與Lp-PLA 2水平呈弱相關(guān)性(r=0.09,P=0.045)[13];Brilakis等認(rèn)為女性Lp-PLA 2與超敏C反應(yīng)蛋白有關(guān)[14]。本研究結(jié)果顯示,血漿Lp-PLA 2水平與性別呈正相關(guān),與國(guó)內(nèi)外研究結(jié)果基本一致,女性血漿Lp-PLA 2水平低于男性可能與雌激素水平有關(guān);血漿Lp-PLA 2水平與吸煙、飲酒呈負(fù)相關(guān),與年齡、高血壓病、糖尿病 、TC 、TG 、LDLC 、HDLC 、Fib 、Lp(a)均無(wú)關(guān),與之前研究結(jié)果不同,原因可能與樣本含量偏小、人群種族差異、飲食結(jié)構(gòu)不同、可能的藥物使用有關(guān)。

1 Lavi S,Herrman J,Lavi R,et al.Role of lipoprotein-associated phospholipase A 2 in atherosc lerosis.Cur r A therosc ler Rep,2008,10(3)：230-235.

2 王 磊,儲(chǔ)照虎.脂蛋白相關(guān)磷脂酶A 2與缺血性卒中.國(guó)際腦血管病雜志,2009,6(17)：463-466.

3 Oei HH,van derM eer IM,H ofman A,et al.Lipoprotein-associated phospholipase A 2 activity is associated w ith risk of coronary heart disease and ischem ic stroke：the Rotterdam Study.Circu lation,2005,111(5)：570-575.

4 BallantyneCM,Hoogeveen RC,Bang H,et al.Lipoprotein-associated phospholipase A 2,high-sensitivity C-reactive protein,and risk for incident ischem ic stroke in m iddle-aged m en and w omen in the A therosclerosis Risk in Communities(ARIC)study.A rch In tern Med,2005,165(21)：2479-2484.

5 Persson M,Berglund G,Nelson JJ,et al.Lp-PLA 2 activity and m assareassociated w ith increased incidence of ischem ic stroke：a popu lation-based coho rt study from Malm?,Sw eden.A therosclerosis,2008,200(1)：191-198.

6 梁江紅,魏麓云,何亞麗.動(dòng)脈硬化性腦梗死患者血漿Lp-PLA 2水平及臨床意義.實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2009,25(14)：2264-2267.

7 王大力,陳瑞英,鄭清純.急性腦梗死患者血清脂蛋白相關(guān)磷脂酶A 2水平的變化及其意義.中華老年心腦血管病雜志,2009,11(1)：10-11.

8 章興甫.腦梗死患者血清中炎癥細(xì)胞因子含量的變化與臨床神經(jīng)功能缺損程度的關(guān)系.中國(guó)臨床醫(yī)藥研究雜志,2008,10(21)：192：7-9.

9 趙常寶,張建斌,王素芳.腦梗死患者炎性細(xì)胞因子變化與神經(jīng)功能缺損的關(guān)系.細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志,2009,25(7)：640-641.

10 李 寧,顧水明,魏 盟.脂蛋白相關(guān)磷脂酶A 2在動(dòng)脈粥樣硬化中的作用.國(guó)際心血管病雜志,2008,35(4)：212-215.

11 張紹艷,王濱有.老年人血漿脂蛋白相關(guān)磷脂酶A 2活性與其基因型、性別和年齡的關(guān)系.中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志,2007,15(11)：854-856.

12 吳延華,曹勇軍,劉慧慧,等.急性腦梗死患者血清脂蛋白相關(guān)磷脂酶A 2活性的變化.中華神經(jīng)科雜志,2008,41(6)：381-382.

13 The LP-PLA 2 Studies collaboration,Ballan tyne C,Cushman M,et al.Collaborative meta-an aly sis of individ ual articipant data from observational studies of Lp-PLA 2 and cardiovascu lar disease.Eul JCardiovasc Prev Rehabil,2007,14(1)：3-11.

14 Brilakis ES,Khera A,M cguire DK,et al.Influen ce of race and sex on lipoprotein-associated phospholipase A 2 levels：Observation from the Dalls H eart Study.A therosclerosis,2008,199(1)：110-115.