李 巖

（吉林通化市人民醫(yī)院藥劑科，吉林 通化 134001）

腎炎靈膠囊收載于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準. 中藥成方制劑（第十三冊）》。通化金馬藥業(yè)集團股份有限公司按照國家藥品監(jiān)督管理局頒布的“藥品注冊管理辦法”中中藥注冊分類8“改變國內(nèi)已上市銷售藥品劑型”將膠囊劑改為片劑，對其進行研制和生產(chǎn)。由旱蓮草、女貞子、梔子、地黃等十七味中藥組成，具有清熱涼血，滋陰養(yǎng)腎的功效。用于慢性腎小球腎炎。 原標(biāo)準未制定含量測定的方法，為有效控制藥品質(zhì)量，筆者用HPLC法對梔子中梔子苷進行了含量測定，報道如下。

1 儀器與試藥

島津LC-10ATvp高效液相色譜儀；BS124S十萬分之一電子分析天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）；AE240型分析天平（梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Diamonsil C18（250mm×4.6mm，5μm）；流動相：乙腈-水（15:85）；流速：0.8mL/min；檢測波長為238nm；柱溫：25℃。理論板數(shù)按梔子苷峰計應(yīng)不小于2000。

2.2 溶液的制備

精密稱取梔子苷對照品適量，加甲醇制成每1mL含40μg的溶液，搖勻，即得。

取本品10片，除去包衣，精密稱定，研細，混勻，取細粉約1g，精密稱定，置具塞瓶中，精密加入甲醇50mL，超聲（250W，233KHz）處理30min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，用微孔濾膜（0.45μm）濾過，取濾液，即得。[1]

2.3 方法學(xué)考察

陰性對照試驗：取不含梔子的陰性樣品，按樣品的含量測定方法制備陰性對照溶液，在上述色譜條件下進樣測定，得樣品、對照品、陰性樣品色譜圖（圖1）。結(jié)果在HPLC圖譜上，在與梔子苷對照品峰相同位置，樣品有色譜峰出現(xiàn)，色譜峰與其相鄰峰能完全達到基線分離。陰性樣品在梔子苷峰相應(yīng)位置上無干擾。

線性關(guān)系考察：精密稱取梔子苷對照品適量，加甲醇制成每1mL含56μg的溶液，分別精密吸取1、4、8、12、18μl按上述條件測定，以進樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，作圖，結(jié)果呈良好的線性關(guān)系，回歸方程為：回歸方程 Y＝806152.4163X－2926.1005 γ＝0.99997，結(jié)果表明，梔子苷進樣量在0.056～1.008μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

精密度試驗： 精密吸取對照品溶液10μl，連續(xù)進樣5次，測定梔子苷峰面積積分值。其結(jié)果的RSD=0.24%，表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性試驗： 取同一對照品及供試品溶液分別進樣，于0、4、8、12、24h測甘草酸峰面積。其結(jié)果的RSD為1.35%，表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

加樣回收試驗： 精密量取6份已知梔子苷含量的樣品0.5g，分別精密加入梔子苷對照品溶液適量，按樣品溶液制備項下的方法提取、測定，計算回收率。結(jié)果見表1。

平均回收率為100.93%，RSD=1.16%（n=6），表明本法準確可行。

2.4 樣品含量測定

根據(jù)上述色譜條件，依法測定樣品3批，每批測定2次，結(jié)果3批樣品中梔子苷的含量分別為0.875 mg/片，0.917 mg/片，0.885 mg/片。（n=2）。

3 討 論

3.1 提取方法的選擇：采用超聲和回流兩種方法進行提取，結(jié)果表明，超聲提取20min即可將樣品中梔子苷提取完全，且雜質(zhì)較回流提取少。

3.2 測定波長的選擇：取梔子苷對照品的甲醇溶液，在波長200～400nm范圍內(nèi)掃描，梔子苷在238nm波長處有最大吸收。參考《2005年版藥典》梔子的含量測定，規(guī)定測定波長為238nm。

表1 加樣回收率試驗結(jié)果

3.3 本試驗結(jié)果表明，HPLC法測定腎炎靈片中梔子苷的含量，方法簡便、靈敏、重現(xiàn)性好，適宜生產(chǎn)中應(yīng)用。

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M]..北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:173.