李玉山 馮曉霞 吉曉菲 王全先 武文斌 潘周輝 楊險(xiǎn)峰 孫 琳

河南省鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院人類精子庫(450052)

據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)調(diào)查，15%的育齡夫婦存在著不育的問題，而發(fā)展中國家的某些地區(qū)可高達(dá)30%，男女雙方原因各占50%。Carlsen等［1］報(bào)道人類精子數(shù)目在過去50年中降低了40%以上。Auger等［2］研究發(fā)現(xiàn)過去20年里，西方男子的精子密度以平均每年2.6%的速度下降，正常形態(tài)精子百分率和活力平均每年下降了0.7%和0.3%。國內(nèi)學(xué)者張樹成等［3］報(bào)道，1981～1996年期間我國男性的精液質(zhì)量(精子密度、精子活動率和正常形態(tài)精子率)均存在明顯的下降趨勢。但另外一些研究卻表明，男性精液質(zhì)量沒有明顯下降，有的甚至出現(xiàn)上升趨勢［4，5］。朱心強(qiáng)等［6］在對 1985 ～ 1997 年間國內(nèi)公開發(fā)表的36篇文獻(xiàn)研究發(fā)現(xiàn)，不論精液量還是精子密度均沒有明顯下降趨勢。由于男性精液質(zhì)量變化的問題目前尚存在爭論，運(yùn)用科學(xué)的方法正確調(diào)查和評估我國各地區(qū)育齡男性的生殖健康狀況，研究分析導(dǎo)致男性不育的流行病學(xué)因素，已成為一項(xiàng)關(guān)系社會健康發(fā)展和人口素質(zhì)不斷提高的重要工作。為了解河南地區(qū)育齡男性的精液質(zhì)量狀況，分析影響性精液質(zhì)量的因素，指導(dǎo)男性健康的生活方式，提高育齡男性生殖健康，本研究對河南省5個區(qū)域的正常育齡男性精液質(zhì)量進(jìn)行了調(diào)查分析。

1 對象與方法

1.1 研究對象

在知情同意的情況下，采用單純隨機(jī)抽樣方法抽取2008年7月～2010年7月到鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院人類精子庫志愿供精人員及省、地市婦幼保健院進(jìn)行婚前和孕前體檢的正常育齡男性4 052名，年齡 33.44 ±4.32(20 ～49)歲。研究對象均無慢性疾病及生殖系統(tǒng)疾病史，在當(dāng)?shù)鼐幼　?0年且最近3年外出≤3個月。

1.2 研究方法

所有調(diào)查對象先進(jìn)行包括外生殖器在內(nèi)的體格檢查，結(jié)果正常者，禁欲3～7d，手淫法取精進(jìn)行精液量、液化時間、精子密度、精子活力及正常精子形態(tài)等指標(biāo)的檢測;流行病學(xué)問卷調(diào)查，內(nèi)容包括人口學(xué)特征、行為因素、生活環(huán)境因素、生殖系統(tǒng)疾病史、有害物質(zhì)接觸史等。

1.3 精液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 正常精液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 按照WHO《人類精液及精子－宮頸粘液相互作用實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)手冊》(第四版)［7］標(biāo)準(zhǔn):在排精后60min內(nèi)完全液化，精液量≥2ml，精子密度≥20×106/ml，a級精子百分率≥25%或(a+b)級精子百分率≥50%，正常形態(tài)精子百分率≥15%。

1.3.2 實(shí)驗(yàn)方法 精液各項(xiàng)參數(shù)分析均在取精后30～60min內(nèi)完成，對不液化的精液標(biāo)本，進(jìn)行機(jī)械吹打混勻后，僅做精液量和精子密度測定，不做活力和形態(tài)學(xué)分析。用帶刻度的錐形量筒測定精液體積;將10μl混勻的精液標(biāo)本加在37℃孵育的Macro計(jì)數(shù)板上，用計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)(CASA，北京偉力彩色精液質(zhì)量檢測系統(tǒng)WLJY－9000)進(jìn)行精子密度、精子活力的測定;取完全液化的精液20μl于干凈的載玻片上，拉薄涂片并編號，待完全干燥后用乙醚酒精混合液(乙醚與95%酒精體積比為1︰1)固定15min，經(jīng)改良巴氏染色法染色，封片后用油鏡分類計(jì)數(shù)≥200個精子，計(jì)算正常形態(tài)精子百分率。

1.4 質(zhì)量控制

為確保調(diào)查結(jié)果的可靠性和一致性，參與研究醫(yī)院必須是衛(wèi)生部認(rèn)定的國家正式醫(yī)療機(jī)構(gòu)，二級以上醫(yī)院;醫(yī)院具備生殖門診和(或)病房，有獨(dú)立的男科實(shí)驗(yàn)室且具備相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備，有一定的男性生殖體檢和實(shí)驗(yàn)室檢測能力，有專業(yè)男科醫(yī)師和檢驗(yàn)技師;參加課題的男科醫(yī)師應(yīng)熟練掌握診斷規(guī)范程序;至少有1名男科醫(yī)師和1名男科實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技師參加過河南省人類精子庫組織的技術(shù)和質(zhì)量控制培訓(xùn)。經(jīng)過培訓(xùn)使所有參與人員統(tǒng)一方法、統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)、統(tǒng)一質(zhì)量控制后方可進(jìn)行項(xiàng)目的調(diào)查研究;所有的精子形態(tài)學(xué)分析均由鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院人類精子庫工作人員完成;所有參與本研究的實(shí)驗(yàn)室均進(jìn)行常規(guī)室內(nèi)質(zhì)量控制。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 研究對象一般情況

4 052例研究對象中20～29歲者占18.36%，30～39歲者占71.97%，40～49歲者占9.67%。職業(yè) 為 學(xué) 生 (28.65%)、農(nóng) 民 (3.45%)、干 部(4.52%)、知識分子(15.52%)、企業(yè)職工(24.51%)、服務(wù)人員(18.39%)、其他(4.96%)。家庭年收入有22人未填寫，＜5 000元38.85%，“10 000元 ～”占 20.53%，“15 000元 ～”占18.71%，“20 000元 ～”占12.56%，“25 000元 ～”占6.87%，“30 000元～”占2.48%。初中及以下學(xué)歷占33.76%，高中占28.76%，大學(xué)占33.39%，碩士以上占4.09%。不吸煙者占35.64%，每日吸煙＜5支者占21.19%，5～10支者占25.18%，10～20支者占16.10%，＞20支者占1.89%。不飲酒者占38.70%，每日飲酒＜120g者占52.43%，＞120g者占8.87%。

2.2 精液各項(xiàng)參數(shù)情況

4 052例精液標(biāo)本，精液量為 2.6 ±1.39ml，精子密度為(57.85±24.19)×106/ml，a級精子百分率為(29.87±16.01)%，(a+b)級精子百分率為(51.28 ±22.15)%，正常形態(tài)精子百分率為(11.42±4.11)%。各項(xiàng)指標(biāo)均符合 WHO規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)者1 254人(30.95%)，精液質(zhì)量不符合WHO標(biāo)準(zhǔn)者2 798例(69.05%)。其中精液量異常 867例(21.40%)，精子密度異常826例(20.39%)，a級精子百分率異常者1 212例 (29.91%)，(a+b)級精子百分率異常者1 065例(26.29%)，精子形態(tài)異常者2 610例(64.41%)。

2.3 精液參數(shù)與WHO標(biāo)準(zhǔn)的比較

將精液量、精子密度、精子活力、正常形態(tài)精子百分率的均值、中位數(shù)及第5百分位數(shù)與WHO標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行對比，結(jié)果發(fā)現(xiàn)河南地區(qū)育齡男性的精液量、精子密度、a級精子百分率的均值和中位數(shù)均符合WHO參考標(biāo)準(zhǔn);(a+b)級精子百分率的均值符合WHO參考標(biāo)準(zhǔn)，但中位數(shù)低于WHO參考標(biāo)準(zhǔn);正常形態(tài)精子百分率的均值、中位數(shù)均低于WHO參考標(biāo)準(zhǔn);這幾項(xiàng)參數(shù)的第5百分位數(shù)均低于WHO參考標(biāo)準(zhǔn)，見表1。調(diào)查對象精液量、精子密度、(a+b)級精子百分率、正常形態(tài)精子百分率與WHO標(biāo)準(zhǔn)比較，符合率依次為 78.60%、78.61%、73.71%、35.59%。

表1 育齡男性精液參數(shù)與WHO標(biāo)準(zhǔn)比較結(jié)果

2.4 河南省5個區(qū)域之間的比較

將河南省5個區(qū)域之間的各精液參數(shù)進(jìn)行比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，豫南地區(qū)育齡男性精子密度、精子活力高于其他地區(qū);中部地區(qū)的精子密度最低，其他地區(qū)之間各參數(shù)未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，見表2。

表2 河南省不同地區(qū)男性精液參數(shù)(±s)

表2 河南省不同地區(qū)男性精液參數(shù)(±s)

*與其他地區(qū)相比P＜0.05 △與東部地區(qū)和北部地區(qū)相比P＜0.05

南部 760 2.8 ±1.48 69.29 ±26.29* 38.22 ±15.30* 59.47 ±23.47*11.58 ±4.75北部 719 2.5 ±1.42 59.21 ±30.28 29.34 ±19.44 50.46 ±37.47 11.49 ±4.57西部 799 2.6 ±1.29 53.38 ±27.36 26.11 ±14.67 48.45 ±22.41 12.33 ±4.45東部 877 2.7 ±1.86 60.33 ±22.51 28.57 ±14.69 49.93 ±25.49 10.26 ±4.84中部 897 2.5 ±1.24 48.62 ±26.58△ 27.84 ±13.73 48.84 ±30.42 11.55 ±4.51總例數(shù) 4 052 2.6 ±1.39 57.85 ±24.19 29.87 ±16.01 51.28±22.15 11.42 ±4.11

2.5 問卷調(diào)查結(jié)果分析

問卷結(jié)果顯示，既往有吸煙史者2 608人(64.36%)，其在河南不同地區(qū)的分布見表3;既往有飲酒史者2 484人(61.30%)，從事電焊職業(yè)者92人(2.27%)，從事裝飾油漆職業(yè)者 152人(3.75%)，有桑拿浴(高溫洗浴)習(xí)慣者309人(7.63%)，其在河南不同地區(qū)的分布見表4。

表3 河南省各地區(qū)吸煙者狀況分布［例(%)］

表4 河南省不同地區(qū)飲酒史及暴露于危險(xiǎn)因素人群分布［例(%)］

3 討論

精子數(shù)量的減少和活力的降低是造成男性不育的直接原因。育齡男性精子數(shù)量和質(zhì)量下降受多種因素的影響，除睪丸發(fā)育異常外，還與環(huán)境污染、不良生活方式、不健康的生活習(xí)慣、泌尿生殖道感染、從事特殊工種以及年齡［8］、季節(jié)、禁欲時間等多種因素有關(guān)。近來研究表明，心理壓力作為一個獨(dú)立因素也能降低精子密度和精子前向運(yùn)動能力，增加異常精子數(shù)目［9］。此外有研究表明，大量飲用咖啡和可樂也能降低精子密度、數(shù)量和活力［10］。隨著社會工業(yè)化，進(jìn)入環(huán)境中的化學(xué)物質(zhì)增多，包括日常使用的農(nóng)藥、塑料制品、藥物及其他人工合成化學(xué)物質(zhì)，許多具有內(nèi)分泌干擾作用，直接影響著男性生殖健康。研究發(fā)現(xiàn)，這些物質(zhì)具有生殖毒性，暴露于這些內(nèi)分泌干擾物的實(shí)驗(yàn)動物，可出現(xiàn)雄性生殖道異常、精液質(zhì)量降低、成年不育等生殖方面問題［11］，有些甚至?xí)棺哟嘿|(zhì)量異常［12］。

本研究河南省5個地區(qū)4 052例調(diào)查對象中，精液質(zhì)量不符合WHO標(biāo)準(zhǔn)的占69.05%。與1987年江魚等［13］542例(來源于上海、重慶、江蘇、山東、大連、河南)和2000年高爾生等［14］562例的報(bào)道相比，河南地區(qū)育齡男性精子的密度和前向運(yùn)動能力有下降趨勢。2000年562例男性精液量符合標(biāo)準(zhǔn)率為81.9%，精子密度標(biāo)準(zhǔn)符合率為93.8%，(a+b)級精子標(biāo)準(zhǔn)符合率為81.3%，精子形態(tài)的標(biāo)準(zhǔn)符合率為98.8%;此次調(diào)查對象精子這些參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)符合率分別為 78.60%、79.61%、73.71%、35.59%，兩個年度比較，精子密度、前向運(yùn)動能力和正常形態(tài)精子百分率的標(biāo)準(zhǔn)符合率有明顯下降(P＜0.05)，精液量符合率的變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

在河南豫東、豫西、豫南、豫北、豫中5個區(qū)域中，豫南地區(qū)被調(diào)查男性在精子密度、精子前向運(yùn)動能力方面高于河南其他地區(qū)。流行病調(diào)查研究還發(fā)現(xiàn)，在職業(yè)方面，電焊工和裝飾油漆工不存在地區(qū)分布上的差異，但在生活習(xí)慣方面，吸煙、飲酒、桑拿浴卻存在明顯的地區(qū)分布差異，豫南地區(qū)這三類人數(shù)低于其他4個地區(qū)，另外豫南地區(qū)地處山區(qū)，人口密度低，工業(yè)污染相對輕，環(huán)境污染少，也可能是該地區(qū)精液質(zhì)量優(yōu)于其他地區(qū)的一個重要因素。中部地區(qū)的精子密度低于北部地區(qū)和東部地區(qū)，但在吸煙、飲酒、桑拿浴等方面未見差異，說明尚存在調(diào)查之外的因素，諸如氣候環(huán)境、人們的作息習(xí)慣等。豫中城市工業(yè)發(fā)達(dá)，空氣污染相對嚴(yán)重，是否是影響豫中地區(qū)男性精子密度的因素，有待進(jìn)一步研究證實(shí)。

本次研究表明，為了提高精液質(zhì)量，改變男士的不良生活習(xí)慣，普及育齡男性的生殖健康知識，加強(qiáng)對育齡男性生殖健康的教育和宣傳成為一項(xiàng)緊迫必要的任務(wù)。引導(dǎo)男性青年在日常生活中養(yǎng)成良好的生活習(xí)慣，戒煙限酒，科學(xué)合理膳食，遠(yuǎn)離環(huán)境污染和輻射，同時強(qiáng)化特殊職業(yè)保護(hù)，促進(jìn)生殖健康，提高育齡男性精液質(zhì)量和生殖生育能力，應(yīng)該引起全社會的廣泛關(guān)注。

由于以往精液參數(shù)大樣本量調(diào)查較少，本文僅與兩個全國性調(diào)查進(jìn)行了簡單的比較，受抽樣人群以及前后研究及檢驗(yàn)方法的影響，得出的結(jié)論或與實(shí)際情況存在一定的偏差，本文數(shù)據(jù)僅供參考。

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