王曉萍，涂彩霞，漆巍慶

(江西省宜豐縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,江西宜豐 336300)

梅毒是由梅毒螺旋體感染引起的性傳播疾病，也可通過血液及母嬰等方式傳播，具有高度傳染性。梅毒螺旋體可侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng),危害心血管系統(tǒng)，損害骨骼系統(tǒng)，晚期可累及全身各個臟器造成多器官病變，直至死亡。近年來梅毒感染人數(shù)在全國呈較快的上升趨勢，而梅毒患者是唯一傳染源,早期梅毒傳染性較強(qiáng)，因此加強(qiáng)臨床梅毒患者的早期檢查診斷對防止梅毒擴(kuò)散及梅毒患者的早期治療具有重要意義。目前檢測梅毒的方法主要有病原學(xué)及血清學(xué)檢測，目前血清學(xué)檢測有多種不同的方法。本實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用甲苯胺紅不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)(TRUST)、梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)、梅毒螺旋體抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (TP-ELISA)3種血清學(xué)試驗(yàn)，對3926份門診和住院病人的血清標(biāo)本進(jìn)行檢測和結(jié)果評價，報告如下。

1 材料與方法

1.1 檢測對象 為本院自2010年1月至2011年6月術(shù)前檢查、輸血前檢查、皮膚性病門診病人的3926份血清標(biāo)本。

1.2 試劑與儀器 TRUST試劑盒 (上海榮盛生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品)；TP-ELISA試劑盒(上?？迫A生物技術(shù)公司產(chǎn)品)；TPPA試劑盒(日本富士瑞必歐株式會社產(chǎn)品)；酶標(biāo)儀、洗板機(jī)(北京普朗)；加樣器(上海求精生化試劑儀器有限公司)。

1.3 方法 對3926例標(biāo)本同時用TRUST與ELISA進(jìn)行檢測,并對陽性標(biāo)本用TPPA進(jìn)行確證試驗(yàn)。試驗(yàn)操作步驟及結(jié)果判斷均嚴(yán)格按照試劑盒說明書。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 計(jì)數(shù)資料比較用χ2檢驗(yàn)

2 結(jié)果

2.1 3 926例患者梅毒螺旋體抗體檢測結(jié)果比較,TRUST與TPPA比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (χ2＝58.86，P＜0.01)，ELISA 法與 TPPA 比較相關(guān)性好，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2＝3.06，P＞0.05)，見表1。

2.2 兩種檢測方法用TRUST法檢測74例陽性，敏感性 51.39%(74/144)，特異性 99.84%(3776/3782)，陽性預(yù)測值92.50%(74/80)，假陽性率為0.16%(6/3776)；用ELISA法檢測陽性140例，敏感性97.22%(140/144)，特異性 99.68%(3770/3782)，陽性預(yù)測值92.11%(140/152)， 假 陽 性 率 為 0.32%(12/3782)；ELISA、TRUST兩種方法均為陽性73例,敏感性50.69%(73/144)，特異性 99.97%(3781/3782)，陽性預(yù)測值98.65%(73/74)，假陽性率為0.03%(1/3782)。見表2。

表1 3926例患者梅毒螺旋體抗體檢測結(jié)果比較

3 討論

表2 兩種檢測方法的敏感性、特異性及陽性預(yù)測值與陰性預(yù)測值

梅毒的實(shí)驗(yàn)室診斷主要依靠血清學(xué)檢測,梅毒螺旋體進(jìn)入人體2～4周后即可檢測出梅毒螺旋體特異性抗體,可用 TPPA、TP-ELISA等方法；約6周才能檢測出非梅毒螺旋體特異性抗體[1]，可用RPR、TURST、VDRL、USR 等方法。

TRUST方法的檢測原理是用牛心磷脂作為抗原檢測體內(nèi)產(chǎn)生的非特異性抗類脂質(zhì)類物質(zhì)的非特異性檢測，已有相關(guān)文獻(xiàn)報道TRUST方法對潛伏期梅毒及Ⅰ期梅毒的敏感性低[2，3]，而且晚期梅毒及梅毒患者治療后結(jié)果可呈陰性反應(yīng)，所以TRUST方法不適宜早期及晚期梅毒的輔助診斷。但該方法操作簡便，試劑價格便宜，檢測時間短，不需要特殊儀器設(shè)備，以及能測定抗體滴度，其滴度變化能反應(yīng)梅毒患者的治療效果，當(dāng)梅毒患者經(jīng)治療有效后，TRUST的滴度會下降，甚至轉(zhuǎn)陰直至消失[4]，因此適合用于療效觀察、和復(fù)查。

TP-ELISA是一種基于基因工程的利用梅毒螺旋體多肽抗原包被于反應(yīng)板的特異性檢測技術(shù)，敏感性和特異性均較高，是檢驗(yàn)科的常規(guī)操作技術(shù)，該法操作簡便，試劑價格便宜，但檢測時間比TRUST長，操作過程中還需要酶標(biāo)儀、洗板機(jī)。由于該法檢測的是梅毒IgM和IgG的混合抗體，因此可用于早期診斷，但梅毒IgG抗體在治愈后仍然在體內(nèi)存在，因此梅毒患者即使治愈后仍終身檢測陽性。

TPPA比TRUST、ELISA的敏感性和特異性都高，是臨床上常用的梅毒確診試驗(yàn)，還可測定效價，但操作復(fù)雜，時間較長，試劑成本高，臨床收費(fèi)高，不適合大量標(biāo)本的篩查，而且與ELISA方法一樣也是檢測梅毒IgM和IgG的混合抗體，不能判定療效，因此只適合用于TRUST或ELISA測定陽性后的確診試驗(yàn)。

從本實(shí)驗(yàn)室的檢測結(jié)果可看出，TP-ELISA法靈敏度和特異性高,與TPPA相關(guān)性好，但也存在一定的假陽性和假陰性，由于梅毒抗體是由梅毒螺旋體侵入人體后，其表面抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生梅毒螺旋體特異性抗體，但有些人血清中含有非特異性干擾物質(zhì)(內(nèi)源性物質(zhì))，可影響ELISA的測定結(jié)果，并且抗體與其他抗原之間的交叉反應(yīng)也可以在ELISA試驗(yàn)中發(fā)生多種非特異性吸附作用，從而導(dǎo)致假陽性出現(xiàn)[5]，另有研究表明少數(shù)孕婦及70歲以上老人中也有1%出現(xiàn)假陽性[6，7]。而抗體效價低及檢驗(yàn)人員的是否按步驟嚴(yán)格操作也是影響結(jié)果的重要因素。TRUST 靈敏度低(51.38%)、特異性高(99.84%)，與其他文獻(xiàn)資料有一定差異 (靈敏度88.1%，特異性85.1%)[3]，各種疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、病毒性肝炎、類風(fēng)濕，活動性肺結(jié)核，硬皮病等都能影響TRUST的檢測結(jié)果，致假陽性。所以標(biāo)本的來源也能一定程度上影響TRUST的敏感性和特異性。而同時開展TRUST和ELISA兩種方法的檢測，降低了結(jié)果的假陽性率，避免給患者造成不必要的精神壓力和負(fù)擔(dān)，并且兩種試驗(yàn)各有所長，同時應(yīng)用可以更好的為臨床診斷及判斷療效提供更快捷準(zhǔn)確的依據(jù)。

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