楊海坤

廣東省梅州市人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，廣東梅州 514003

人乳頭瘤病毒（human papilloma virus,HPV）是雙鏈環(huán)狀DNA病毒，已發(fā)現(xiàn)基因型有100余種，已明確高危HPV感染是引起宮頸癌及其癌前期病變的必要因素。有研究顯示，盡管HPV16、18等重要型別在地理區(qū)域的分布上存在著一致性，但不同地區(qū)仍存在各自的優(yōu)勢HPV型別。筆者利用凱普HPV基因分型檢測系統(tǒng)對6 455例梅州客家婦女宮頸分泌物進行了HPV型別檢測，以了解本地區(qū)婦女HPV感染率及型別分布情況。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2009年2月～2010年8月我院婦科行HPV-DNA檢查6 455例，年齡23～68歲，平均37.3歲。

1.2 HPV-DNA檢測

取宮頸管分泌物并將收集的細胞洗入盛有保存液的小瓶內(nèi)，通過PCR擴增、基因探針雜交方法進行人乳頭瘤病毒的檢測（HPV DNA），檢測21種HPV分型。21種HPV包括高危型 HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68，及低危型 HPV6、l1、42、43、44、CP8304。

1.3 實驗方法

1.3.1 樣本DNA分離提取 取保存有宮頸細胞的細胞保存液0.5 ml，以14 000 r/min離心1 min，棄上清液后，利用凱普生物化學科技公司的基因組提取試劑盒提取DNA，PCR擴增，導流雜交，具體操作步驟詳見試劑盒說明書。

1.3.2 結果判斷 陽性點為清晰可見的藍紫色圓點，多個圓點陽性即為多重感染。

1.4 統(tǒng)計學方法

應用SPSS 13.0進行χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 宮頸病變HPV感染

6 455例標本中HPV感染1 334例，總感染率為20.67%。其中炎癥HPV感染率為11.9%，宮頸癌HPV感染率為0.94%。見表1。

2.2 HPV感染各年齡組分布

1 334例陽性標本中基因型為高危型1 251例，高危型陽性率為19.38%；低危型83例，低危型陽性率為1.29%。各年齡組總HPV陽性率居前3位的是30～39歲，40～49歲，50～59 歲（χ2=97.132，P=0.00＜0.05）。 各年齡組總 HPV 陽性率差異有統(tǒng)計學意義。高危HPV陽性率居前3位的是30～39歲，40～49 歲，50～59 歲（χ2=74.176，P=0.00＜0.05）。 見表 2。

表1 宮頸病變HPV感染（例）

表2 宮頸分泌物HPV基因型別分布（例）

2.3 HPV感染基因型分布

HPV基因型分布陽性率居前5位的是HPV16（5.61%）、HPV58（2.74%）、HPV52（2.69%）、HPV31（2.14%）和 HPV33（1.28%）。 見表 3。

表3 婦女宮頸分泌物各型HPV感染率排名前7位

3 討論

宮頸癌已被世界衛(wèi)生組織WHO列為威脅女性生命的第二大腫瘤，其致病機制復雜。大量流行病學資料顯示，持續(xù)高危人乳頭瘤病毒感染是宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）及宮頸癌發(fā)病的必要條件[1]。據(jù)研究約50%～90%的HPV感染可在感染后數(shù)月至2年內(nèi)被免疫系統(tǒng)清除，感染的平均持續(xù)時間為8～12個月。如果在間隔1年以上的時間連續(xù)兩次檢測出同一高危型HPV-DNA被認為是持續(xù)感染，只有慢性持續(xù)高危型HPV感染最終演變?yōu)閷m頸癌。

HPV亞型有20種可引起生殖道腫瘤[2]。我國婦女HPV感染及型別分布情況各地報道不同。李霓等學者的研究顯示中國婦女人乳頭狀瘤病毒感染率為16.1%[3]。Cliford等對11個國家共13個地區(qū)15 613名無宮頸病變婦女中HPV的感染率進行分析：撒哈拉以南非洲地區(qū)HPV感染率最高，達25.6%，南美洲婦女HPV的流行情況介于撒哈拉以南非洲地區(qū)與歐洲之間[4]。何桂榮等[5]報道深圳地區(qū)女性HPV感染率達17.5%。本文對梅州地區(qū)女性感染HPV基因型別進行檢測，結果顯示6 455例標本中HPV感染1 334例，總感染率20.67%。本研究顯示廣東省梅州客家地區(qū)婦女人群HPV感染率高于國內(nèi)有關報道，分析由于地理位置及種族不同，感染HPV基因型可能有所不同。再則，梅州客家地區(qū)是廣東省偏遠的貧困山區(qū)、革命老區(qū)、欠發(fā)達地區(qū)，健康意識差，與HPV高感染率有一定關系。

年齡是影響HPV流行的一個重要因素，我國HPV感染以35～44歲年齡段感染率為最高，隨著年齡的增高，HPV感染率并沒有出現(xiàn)明顯降低。本研究表明，各年齡組總HPV陽性率居前 3位的是 30～39歲，40～49歲，50～59歲。 各年齡組總HPV陽性率差別有統(tǒng)計學意義。

HPV16和18是宮頸癌及其前期病變中最常見的基因型別，HPV16、HPV52和58型是中國特有的優(yōu)勢感染型別。對于健康人群，HPV感染基因型別報道結果不同地區(qū)存在著差異。Clifford等[4]統(tǒng)計分析了11個國家15 613名無宮頸病變婦女HPV型別的分布，HPV感染的主要型別為HPV16、42、58、31、18、56、81、35、33 和 45。在我國，HSIL、LSIL 和正常婦女中最常見的HPV型別為HPV58和52，表明HPV58、52型是我國婦女宮頸癌發(fā)生、發(fā)展中的重要HPV型別。本研究結果發(fā)現(xiàn)梅州客家地區(qū)HPV基因型分布位居前5位的是HPV16（5.61%）、HPV58（2.74%）、HPV52（2.69%）、HPV31（2.14%）和HPV33（1.28%），與國內(nèi)統(tǒng)計相似。

預防宮頸癌的根本方法就是采用疫苗進行人群一級預防。現(xiàn)有的國外疫苗僅僅針對HPVl6和HPVl8型，我國在自發(fā)研制預防性HPV疫苗時，應考慮重要優(yōu)勢型別HPV52、58。

總之，高危型HPV感染與宮頸癌發(fā)病密切相關，是導致宮頸癌的危險因素。梅州客家地區(qū)HPV陽性檢出率較高，提示我區(qū)應加大宣傳力度，進一步加強宮頸癌相關篩查，盡早發(fā)現(xiàn)宮頸的早期病變，最大限度減少宮頸癌的發(fā)生及死亡。

[1]Herrero R,Castle PE,Sehiffman M,et a1.Epidemiologic profile of typespecific human papilloma virus infection and cervical neoplasia in Guanacaste[J].JInfect Dis,2005,191(11):1796-1807.

[2]Munoz N,Bosch FX,de SanjoséS,et a1.Epidemiologic classification of human papillomavirus types associated with cervical cancer[J].N Engl J Med,2003,348(6):518-527.

[3]李霓,代敏.中國婦女人乳頭狀瘤病毒感染的多中心橫斷面研究[J].中華疾病控制雜志,2008,12(5):411-415.

[4]Clifo GM,Gallus S,Herrem R,et a1.Worldwide distribution of human papillomavirus types in cytologically normal WOlYlen in the International Agency for Research On Cancer HPV prevalence surveys:a pooled analysis[J].Lancet,2005,366(9490):991-998.

[5]何桂榮,武學成.深圳地區(qū)女性感染人乳頭瘤病毒基因類型分析[J].現(xiàn)代檢驗醫(yī)學雜志,2007,22(2):19-21.