覃 勇,趙國山,盧少坤

(1.廣西百色市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,廣西百色533000;2.廣西百色農(nóng)業(yè)學(xué)校,廣西百色533000)

豬瘟是由豬瘟病毒(CSFV)引起的嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)的重要傳染病之一,具有高度接觸傳染性,流行廣泛,發(fā)病率和死亡率高。目前該病依然在世界很多國家和地區(qū)流行。我國豬瘟流行嚴(yán)重,每年因豬瘟造成的經(jīng)濟(jì)損失達(dá)數(shù)十億元。本市始終將豬瘟免疫工作作為防控該病的一項(xiàng)重要措施來抓,常年免疫密度保持在94%以上。因長期以來生豬多以農(nóng)村散養(yǎng)為主,飼養(yǎng)環(huán)境條件差,流通交易頻繁,豬瘟?xí)r有發(fā)生。首次對本市近幾年的豬瘟免疫抗體變化情況及CSFV感染情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì),分析豬瘟在本市發(fā)生的主要病因,為有效預(yù)防和控制該病提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 樣品來源于2006～2009年本市12個(gè)縣(區(qū))每年秋季突擊免疫后1個(gè)月采集的2037份豬血清,其中規(guī)模場562份,農(nóng)村散養(yǎng)戶1475份;另統(tǒng)計(jì)2009年用豬瘟細(xì)胞苗(3個(gè)廠家生產(chǎn))和豬瘟兔源脾淋苗(2個(gè)廠家生產(chǎn))對12個(gè)縣(區(qū))49個(gè)規(guī)模豬場和325個(gè)農(nóng)村散養(yǎng)戶進(jìn)行免疫后1個(gè)月采集的豬血清樣品720份。CSFV檢測病料來源于2006～2009年本市轄區(qū)內(nèi)61個(gè)規(guī)模豬場和94個(gè)農(nóng)村散養(yǎng)戶的病死豬,分別采集組織樣品141份和108份,由廣西動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心檢測。

1.2 方法 豬血清免疫抗體檢測采用正向間接血凝試驗(yàn)(檢測方法參照《CSF診斷技術(shù)規(guī)程》(NY/SY156—2000),其步驟為在血凝板中每孔加入50 μ L稀釋液;取待檢血清、陽性血清、陰性血清各50 μ L 分別加入第 1 孔 ,混勻 6 ～ 8 次 ,吸 出 50 μ L加入第2孔再混勻 6～8次,依次按 1∶2、1∶4、1∶8……1∶1 024倍比稀釋,到11孔棄去50 μ L,之后加25 μ L豬瘟間接血凝診斷抗原,震蕩搖勻,置25℃或室溫環(huán)境作用1.5～2 h,判定結(jié)果。在標(biāo)準(zhǔn)陽性、陰性血清和稀釋液等對照結(jié)果成立的前提下,記錄各孔凝集情況,用“-、+、++、+++、++++”表示,觀察待檢血清各孔呈現(xiàn)(++)凝集的最高稀釋倍數(shù)為該份血清的抗體效價(jià),接種豬瘟疫苗的豬群其血清中抗體效價(jià)達(dá)到≥1∶32(5log2)為免疫合格。病豬組織樣品CSFV檢測采用RT-PCR方法,參考羅廷榮等[1]方法進(jìn)行。

1.3 試劑 豬瘟正向間接血凝抗原、陽性血清、陰性血清購自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所。

2 結(jié)果

2.1 抗體檢測結(jié)果

2.1.1 2006～2009年豬瘟免疫抗體檢測結(jié)果2006～2009年本市農(nóng)村散養(yǎng)戶和規(guī)模豬場的豬瘟免疫抗體水平呈逐年上升趨勢,規(guī)模場的豬瘟抗體水平高于農(nóng)村散養(yǎng)戶。見表1。

表1 2006～2009年豬瘟免疫抗體檢測結(jié)果

2.1.2 不同種類和廠家生產(chǎn)的豬瘟疫苗對豬免疫效果分析 2009年使用5個(gè)廠家生產(chǎn)的2種豬瘟疫苗(豬瘟細(xì)胞苗和豬瘟兔源脾淋苗)對本市325個(gè)農(nóng)村散養(yǎng)戶和49個(gè)規(guī)模場的豬免疫后1個(gè)月進(jìn)行免疫抗體檢測,結(jié)果發(fā)現(xiàn),規(guī)模場的豬瘟免疫效果優(yōu)于農(nóng)村散養(yǎng)戶,豬瘟細(xì)胞苗免疫效果優(yōu)于豬瘟兔源脾淋苗。1號廠家生產(chǎn)的豬瘟細(xì)胞苗免疫效果最好,規(guī)模場和農(nóng)村散養(yǎng)戶的免疫抗體合格率均在80%以上,5號廠家生產(chǎn)的豬瘟兔源脾淋苗免疫效果對農(nóng)村散養(yǎng)戶和規(guī)模豬場差異較大。見表2。

表2 不同種類和廠家生產(chǎn)的豬瘟疫苗對豬免疫效果分析

2.2 CSFV感染情況調(diào)查 對2006～2009年本市轄區(qū)內(nèi)61個(gè)規(guī)模豬場的病死豬組織樣品141份和94個(gè)農(nóng)村散養(yǎng)戶的病死豬組織樣品108份進(jìn)行CSFV檢測,結(jié)果發(fā)現(xiàn),規(guī)模豬場有7個(gè)場檢出CSFV,占總場數(shù)的11.5%,病料中11份為CSFV陽性,陽

性率為7.8%;農(nóng)村散養(yǎng)戶有8戶檢出CSFV,占總戶數(shù)的8.5%,病料中10份為CSFV陽性,陽性率為9.3%。2006年發(fā)病場(戶)檢出率和病料陽性率均最高,以后呈逐年下降。見表3。

2.3 豬瘟免疫抗體合格率和病料CSFV陽性率關(guān)系為了更好的分析區(qū)域內(nèi)豬瘟免疫抗體是否與CSFV感染存在關(guān)系,筆者將表1豬瘟免疫抗體合格率與表3病死豬病料CSFV陽性率進(jìn)行比較,結(jié)果發(fā)現(xiàn),無論是規(guī)模場還是農(nóng)村散養(yǎng)戶,隨著豬瘟免疫抗體合格率的不斷提高,病料CSFV的陽性率也呈逐漸下降。見圖1。

表3 2006～2009年病死豬組織樣品CSFV檢測結(jié)果

圖1 2006～2009年豬瘟免疫抗體合格率與CSFV陽性率比較

3 討論

3.1 2006年豬“高熱病”在全國多個(gè)省、市流行,本

市也出現(xiàn)了一些相似病例。所以2006年從病死豬的病料檢出CSFV陽性比較多,但隨著國家提高豬瘟疫苗的劑量標(biāo)準(zhǔn)(2007年前豬瘟細(xì)胞苗每頭份含750RID,現(xiàn)在普遍達(dá)到7 500 RID以上),同時(shí)本市進(jìn)一步加大對豬瘟的免疫力度,免疫效果逐步得到提高,豬瘟疫情也逐漸減少。從檢測結(jié)果可以看出,規(guī)模豬場免疫抗體檢出率和合格率均高于農(nóng)村散養(yǎng)戶,主要是因?yàn)橐?guī)模豬場能夠按照免疫程序開展豬瘟免疫工作,有部分規(guī)模豬場通過免疫抗體監(jiān)測,有針對性地進(jìn)行豬瘟補(bǔ)免工作,同時(shí)規(guī)模場的飼養(yǎng)環(huán)境條件比較好,并加強(qiáng)對多種疫病,特別是一些免疫抑制病的防控,使豬瘟的凈化工作不斷得到加強(qiáng)。而農(nóng)村散養(yǎng)戶的防疫工作多數(shù)由村級動(dòng)物防疫員開展,群眾主動(dòng)接受防疫意識不強(qiáng),豬瘟免疫工作多在閹割時(shí)或春秋兩季突擊防疫時(shí)開展,無法避免母源抗體干擾或因免疫空檔導(dǎo)致隱性感染疾病等因素對豬瘟免疫效果的影響,所以豬瘟防控應(yīng)以預(yù)防為主,加強(qiáng)管理,逐步進(jìn)行疫病凈化為主。

3.2 2009年通過對本市使用的5個(gè)廠家生產(chǎn)的豬瘟疫苗免疫效果進(jìn)行檢測,發(fā)現(xiàn)不同廠家生產(chǎn)的豬瘟疫苗免疫效果存在一定差異。原因有以下幾個(gè)方面:一是不同廠家疫苗的生產(chǎn)工藝差異(主要是疫苗劑量、佐劑、人員操作等);二是疫苗的運(yùn)輸、保存條件等多方面因素的影響。筆者通過幾年的檢測發(fā)現(xiàn),2007年以前使用的普通豬瘟細(xì)胞苗免疫效果的確不理想,豬瘟疫情時(shí)有發(fā)生,給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。2007年國家提高豬瘟疫苗劑量標(biāo)準(zhǔn)后,豬瘟免疫抗體水平不斷得到提高,豬瘟疫情逐漸下降,疫苗免疫起了很大的作用。

總之,選擇高效的豬瘟疫苗,制定合理、有效的免疫程序,改善飼養(yǎng)環(huán)境、加強(qiáng)飼養(yǎng)管理是提高群體免疫抗體水平的技術(shù)保障,是當(dāng)前控制豬瘟的最有效方法之一。

[1]羅廷榮,孫敬鋒,莫揚(yáng),等.RT-PCR檢測健康豬扁桃體和流產(chǎn)死胎豬瘟病毒的應(yīng)用及 RFLP分析[J].中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào),2004,26(3):192-195.