劉麗，曹艷，姜君，趙春杰

(沈陽(yáng)藥科大學(xué)藥學(xué)院，110016)

大黃牡丹湯出自東漢張仲景之《金匱要略》，由大黃12 g，牡丹皮3 g，桃仁9 g，冬瓜仁30 g，芒硝9 g等組成，具有瀉熱逐淤、消腫散結(jié)之功，乃張仲景為腸癰初起而設(shè)［1］，是中國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中最具代表性的治療闌尾炎藥方［2］，用于治療慢性非特異性潰瘍性結(jié)腸炎、肺膿腫、膽囊炎、急性盆腔炎也取得很好的療效［3-5］。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道［6］，中藥中微量元素的含量與與其療效有密切關(guān)系。眾多研究成果表明，中藥所含微量元素對(duì)其結(jié)構(gòu)和藥效具有重要作用［7］，且中藥對(duì)于微量元素失衡的疾病具有調(diào)節(jié)作用［8-9］。大黃牡丹湯中具有豐富的微量元素，且應(yīng)用廣泛，筆者采用火焰原子吸收光譜法測(cè)定大黃牡丹湯中的11種元素，為今后進(jìn)一步深入研究探討大黃牡丹湯的藥效機(jī)制和臨床用途提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器 HG-9602型原子吸收分光光度計(jì)，附HG-9602數(shù)據(jù)工作站(沈陽(yáng)華光精密儀器有限司)，SC-97自動(dòng)三重純水蒸餾器(上海亞榮生化儀器廠)，DB-3型不銹鋼電熱板(江蘇金壇市金城國(guó)勝實(shí)驗(yàn)儀器廠)，BS110型電子分析天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)，實(shí)驗(yàn)所用玻璃儀器均經(jīng)硝酸-水(HNO3-H2O，2∶5)浸泡12 h以上，取出后經(jīng)去離子水洗凈，晾干，備用。

1.2 試劑 鋅(Zn)、鎳(Ni)標(biāo)準(zhǔn)溶液(國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心，批號(hào):101093)，銅(Cu)、鐵(Fe)標(biāo)準(zhǔn)溶液(國(guó)家地質(zhì)實(shí)驗(yàn)測(cè)試中心，批號(hào):100604)，鈣(Ca)、鎂(Mg)、鈉(Na)、鉀(K)、鉬(Mo)、鉻(Cr)標(biāo)準(zhǔn)溶液(國(guó)家環(huán)境保護(hù)總局標(biāo)準(zhǔn)樣品研究所，批號(hào):101204)，氯化鎘(天津市博迪化工有限公司，批號(hào):08051178)，HNO3(北京益利精細(xì)化學(xué)品有限公司，優(yōu)級(jí)純，批號(hào):20100106)，高氯酸(HClO4，天津市鑫源化工廠，優(yōu)級(jí)純，批號(hào):20100012)，水為實(shí)驗(yàn)室自制三重純化水。

1.3 藥材 所用藥材大黃、牡丹皮、桃仁、冬瓜仁、芒硝等均購(gòu)自沈陽(yáng)天益堂大藥房，并經(jīng)沈陽(yáng)藥科大學(xué)中藥學(xué)院賈景明副教授鑒定。將樣品洗凈，于105℃恒溫干燥，冷卻至室溫，粉碎后備用。

1.4 大黃牡丹湯的制備 按大黃牡丹湯處方比例，稱(chēng)取大黃、牡丹皮、桃仁、冬瓜仁和芒硝藥材粉末各適量，混勻，取混合后的粉末2.1 g，精密稱(chēng)定，置于250 mL圓底燒瓶中，加去離子水40 mL，浸泡30 min，加熱回流提取60 min，分取水煮液，同法再提取一次，合并2次煎煮液，以紗布過(guò)濾，離心得上清液，即得。

1.5 樣品處理 精密吸取大黃牡丹湯1 mL置錐形瓶中，加入HClO4-HNO3(1∶4)10 mL，搖勻，置于加熱板上小火加熱2 h，待冒黃煙轉(zhuǎn)為白色煙，升高溫度，待瓶口白煙冒凈后，瓶?jī)?nèi)液體再產(chǎn)生白煙視為消化完全，水10 mL分2次加入繼續(xù)加熱驅(qū)酸，緩緩濃縮至近干，冷卻，以2%硝酸溶解，并定量轉(zhuǎn)移至量瓶中。同法制備空白溶液。

2 方法與結(jié)果

2.1 原子吸收測(cè)定條件 各元素的最佳儀器工作條件見(jiàn)表1。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)和線(xiàn)性范圍 將各元素的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液逐級(jí)稀釋?zhuān)渲瞥梢幌盗袠?biāo)準(zhǔn)溶液，按表1中實(shí)驗(yàn)條件對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定，以吸光度值對(duì)濃度進(jìn)行回歸計(jì)算，結(jié)果各元素吸光度值與濃度均呈良好線(xiàn)性關(guān)系，見(jiàn)表2。

表1 原子吸收分光光度計(jì)工作條件［10］Tab．1 Working conditionsofatomicabsorption spectrophotometer

表2 11種元素的線(xiàn)性范圍和標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)Tab．2 The linear range and standard curves of 11 metal elements

2.3 精密度實(shí)驗(yàn) 取 Zn、Cu、Ni、Fe、Ca、Mg、Cd、K、Na、Cr、Mo各元素標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)中間濃度，連續(xù)測(cè)定6次，計(jì)算得吸光度相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(relative standard deviation，RSD)分別為 2.0%，1.8%，1.6%，1.3%，1.9%，1.3%，1.6%，1.3%，0.78%，0.68%，1.7%，表明儀器精密度良好。

2.4 加樣回收率實(shí)驗(yàn) 精密量取已知含量的大黃牡丹湯煎煮液，按樣品處理項(xiàng)下操作，分3水平精密加入各元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，每水平重復(fù)3次，混勻，按表1方法測(cè)定，計(jì)算各元素回收率。結(jié)果表明，各元素回收率在96.5% ～99.8%。結(jié)果見(jiàn)表 3。Ca、Mg、Zn、Cu、Fe、K、Na、Cd、Cr、Ni、Mo 等元素平均回收率分別為98.2%(1.5%)，97.2%(1.1%)，98.0%(1.6%)，98.6%(3.6%)，98.3%(1.7%)，96.5%(3.3%)，97.2%(2.1%)，硝 98.3%(1.5%)，99.1%(2.0%)，99.8%(1.8%)，99.6%(1.5%)。

表3 大黃牡丹湯中各元素加樣回收率Tab．3 The recovery of 11 metal elements in decoction of rheum and moutan

2.5 樣品測(cè)定 按表1中儀器工作條件，對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表4。

3 討論

3.1 數(shù)據(jù)分析 本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，大黃牡丹湯中鎂含量最高，K，Na，Ca等含量次之。Mg是人體重要的金屬離子，參與體內(nèi)多種酶反應(yīng)。Ca對(duì)骨骼生長(zhǎng)發(fā)育起著重要作用，能緩解失眠、調(diào)節(jié)心律、降低毛細(xì)血管通透性、防止體液滲出，控制炎癥與水腫，維持酸堿平衡。K是細(xì)胞內(nèi)液中的主要陽(yáng)離子，也是細(xì)胞外液的主要成分，參與細(xì)胞內(nèi)糖及蛋白質(zhì)的代謝，調(diào)節(jié)體液酸堿平衡。Na在調(diào)節(jié)滲透壓和維持酸堿平衡中起重要作用。大黃牡丹湯中Mg、Ca、K、Na含量較高，這與大黃牡丹湯具有利尿、抗炎作用相符。大黃牡丹湯是治療急性闌尾炎的經(jīng)典名方，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果從元素含量方面驗(yàn)證和解釋了其具有瀉火逐瘀，通便解毒，涼血清熱，活血散瘀之功效。

表4 大黃牡丹湯中11種元素含量測(cè)定結(jié)果Tab．4 The content of 11 metal elements in Decoction of Rheum and Moutan μg·g-1，n=3

3.2 硝酸-高氯酸消解系統(tǒng) 藥材消解后，有些殘留

白色渾濁物，經(jīng)硝酸定容后溶解，不影響測(cè)定。結(jié)果表明消解符合測(cè)定要求。測(cè)定Ca、Mg時(shí)需加入2%氧化鑭，按每10 mL加入氧化鑭1 mL，消除共存離子的干擾。

3.3 玻璃儀器影響 玻璃儀器對(duì)一些元素具有較強(qiáng)吸附，可能是因?yàn)闃悠分须x子與玻璃中的硅離子發(fā)生離子交換所致，故本實(shí)驗(yàn)選用聚四氟乙烯盛裝樣品，可減少一些元素的損失。

［1］ 黃建國(guó)，王敏.大黃牡丹皮湯治療急性闌尾炎療效分析［J］.中國(guó)誤診學(xué)雜志，2008，8(33):8153-8154.

［2］ 董玉輝.淺談大黃牡丹湯在臨床中的應(yīng)用［J］.黑龍江中醫(yī)藥，2006，5(1):30.

［3］ 彭憲鎮(zhèn).大黃牡丹湯婦科臨床應(yīng)用三則［J］.中醫(yī)研究，2006，19(11):49-50.

［4］ 高翠香，王雪芹，楊翠玉，大黃牡丹湯新用［J］.現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2006，15(22):3098.

［5］ 梁學(xué)書(shū).大黃牡丹湯臨床應(yīng)用體會(huì)［J］.實(shí)用中醫(yī)藥雜志，2005，21(6):366-367.

［6］ 沈英華.中藥微量元素與虛癥的關(guān)系［J］.中國(guó)誤診學(xué)雜志，2008，8(27):6793.

［7］ 黃長(zhǎng)友.四種中藥的模糊聚類(lèi)分析［J］.廣東微量元素科學(xué)，2007，14(2):34-36.

［8］ 趙文秀.FAAS法測(cè)定銀杏膠囊中鎂、錳、鋅和銅［J］.光譜實(shí)驗(yàn)室，2006，23(5):1085-1086.

［9］ 黃國(guó)清.藥食兩用花卉中營(yíng)養(yǎng)元素的光譜測(cè)定［J］.光譜學(xué)與光譜分析，2005，20(3):376-378.

［10］ LAURENT N.Determination of sodium potassium calcium and magnesium content in milk products by flame atomic absorptionspectrometry(FAAS):a jointISO/IDF collaborative study［J］.Inter Dairy J，2008，18:899-904.