付加奇

(嘉魚(yú)縣中醫(yī)院,湖北 嘉魚(yú)437200)

T淋巴細(xì)胞毒相關(guān)抗原-4(CTLA-4)主要表達(dá)在T細(xì)胞上,與同表達(dá)于T細(xì)胞的CD28分子具有較高的同源性,在發(fā)揮抑制T細(xì)胞活化和外周耐受中起著關(guān)鍵作用。CTAL-4的這種負(fù)性調(diào)節(jié)作用在自身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展中同樣發(fā)揮著重要作用[1]。系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)是一種典型的因產(chǎn)生自身抗體而累及多個(gè)器官的自身免疫性疾病。遺傳因素被認(rèn)為在SLE的發(fā)生中起著重要作用。連鎖分析發(fā)現(xiàn)自身免疫性疾病的一個(gè)相關(guān)染色體區(qū)間是2q33-35,而CTLA-4基因正位于此區(qū)間[2]。CTLA-4基因多態(tài)性在多種自身免疫性疾病的中發(fā)揮作用[3]。然而,目前關(guān)于CTLA-4基因多態(tài)性與SLE的相關(guān)性結(jié)論還存在爭(zhēng)議。主要是因?yàn)楦鱾€(gè)研究的實(shí)驗(yàn)對(duì)象不夠充分、人種不一致或者是存在發(fā)表偏倚。本文采用meta分析的方法對(duì)研究中國(guó)人群CTLA-4基因啟動(dòng)子區(qū)多態(tài)性與SLE相關(guān)性的文獻(xiàn)進(jìn)行合并分析,探討CTLA-4啟動(dòng)子區(qū)基因多態(tài)性與SLE易感性的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 文獻(xiàn)檢索策略

聯(lián)合檢索中國(guó)生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫(kù)、中國(guó)學(xué)術(shù)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù)、萬(wàn)方科技期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù)、重慶維普中文科技期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù),PUBMED和ISI Web of Knowledge數(shù)據(jù)庫(kù)。不設(shè)檢索時(shí)間限制,末次檢索時(shí)間為2011年1月15日。中文檢索關(guān)鍵詞是:系統(tǒng)性紅斑狼瘡或SLE、T淋巴細(xì)胞毒相關(guān)抗原-4或CTLA-4、多態(tài)性;英文檢索關(guān)鍵詞是:systemic lupus erythematosus或 SLE、cytotoxic T lymphocyte associated-4或 CTLA-4、polymorphism 或 variant、Chinese 或 China。手工檢索相關(guān)論著和綜述后的參考文獻(xiàn)。

1.2 數(shù)據(jù)納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

文獻(xiàn)納入標(biāo)準(zhǔn):(1)研究為探討SLE和CTLA-4基因啟動(dòng)子區(qū)變異相關(guān)的病例對(duì)照研究;(2)以中國(guó)人群為研究對(duì)象,對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組無(wú)血緣關(guān)系;(3)原文提供基因型的頻數(shù)或可以推算得到;(4)有SLE的明確診斷標(biāo)準(zhǔn);(5)對(duì)照人群中的被研究位點(diǎn)符合Hardy-weinberg平衡。(6)經(jīng)同行評(píng)議后發(fā)表的文獻(xiàn),不含學(xué)位論文。同一科室或同一作者的多個(gè)文獻(xiàn)報(bào)道,只選取樣本例數(shù)大的文獻(xiàn),如例數(shù)相同則選取發(fā)表較晚的文獻(xiàn)。

1.3 數(shù)據(jù)的提煉

所有的數(shù)據(jù)都是通過(guò)兩位作者根據(jù)前面設(shè)置的檢索策略和納入標(biāo)準(zhǔn)獨(dú)立進(jìn)行提煉。有異議的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)通過(guò)第三位作者判斷,并最終達(dá)成一致。文獻(xiàn)中提煉的數(shù)據(jù)包括:作者,發(fā)表年份,SLE和對(duì)照的描述,人口統(tǒng)計(jì),研究人群的血統(tǒng),基因型及樣本例數(shù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

基于病例及對(duì)照的基因型頻率計(jì)算比值比(Ors)和標(biāo)準(zhǔn)誤(SE)。數(shù)據(jù)間異質(zhì)性通過(guò)Q檢驗(yàn)和I2進(jìn)行評(píng)估。根據(jù)Cochrane組織建議:當(dāng)Q檢驗(yàn)P＜0.1且I2＞50%時(shí)認(rèn)為研究間存在異質(zhì)性采用隨機(jī)效應(yīng)模型,反之采用固定效應(yīng)模型。通過(guò)Egger計(jì)算和漏洞圖評(píng)估發(fā)表偏倚。對(duì)于Egger檢驗(yàn)的解釋,當(dāng)P＜0.1時(shí)認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件STATA 10.0進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1 入選文獻(xiàn)的基本特征

通過(guò)檢索獲得9篇文獻(xiàn),其中一篇因研究的是非啟動(dòng)子區(qū)SNP而被排除在外[4],一篇文獻(xiàn)探討基因多態(tài)性與環(huán)境的相互作用,與本研究目的不合不能入選[5]。3篇文獻(xiàn)研究了CTLA-4-318位點(diǎn)基因多態(tài)性與SLE的易感性關(guān)系[6-8]。1篇文獻(xiàn)同時(shí)研究了-318和-1 722位點(diǎn)基因多態(tài)性與SLE易感性的關(guān)系[9]。在研究-318位點(diǎn)的4篇文獻(xiàn)中有2篇文獻(xiàn)[6,8]報(bào)道的病例中存在基因型病例數(shù)位0的情況,因此無(wú)法納入本研究。由于目前只能收集到兩篇研究-318位點(diǎn)的文獻(xiàn),因此無(wú)法做CTLA-4基因-318位點(diǎn)多態(tài)性與SLE易感性的meta分析。只有一篇文獻(xiàn)研究-1 661位基因多態(tài)性與SLE的易感性關(guān)系[10]。3篇文獻(xiàn)研究-1 722位點(diǎn)多態(tài)性與SLE的易感性關(guān)系[9,11,12],文獻(xiàn)中對(duì)照組數(shù)據(jù)均符合Hardy-weinberg平衡,被納入本meta分析。文獻(xiàn)數(shù)據(jù)的描述見(jiàn)表1。

表1 研究中國(guó)人群中CTLA-4啟動(dòng)子區(qū)基因多態(tài)性與SLE相關(guān)性文獻(xiàn)的基本情況

2.2 CTLA-4-1722位點(diǎn)基因型頻率分析

有3篇文獻(xiàn)研究了該位點(diǎn)。對(duì)于基因型TT與CC的比較,首先對(duì)納入的各項(xiàng)獨(dú)立研究進(jìn)行同質(zhì)性檢驗(yàn)(結(jié)果 χ2=2.06,自由度為2,P=0.358,I2=2.8%),提示各研究間同質(zhì),采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行meta分析,結(jié)果見(jiàn)圖1.對(duì)于基因型CT與CC的比較,同質(zhì)性檢驗(yàn)結(jié)果為 χ2=7.94,自由度為2,P=0.019,I2=74.8%,采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行meta分析,結(jié)果見(jiàn)圖2。在中國(guó)人群中CTLA-4-1722位點(diǎn)基因型與SLE的易感性相關(guān)。與基因型C/C相比基因型T/T個(gè)體患SLE的OR為 2.174(95%CI 1.302-3.630,P=0.003)?；蛐虲/T個(gè)體與基因型C/C個(gè)體相比患SLE的危險(xiǎn)性不存在顯著性差異(OR 0.695,95%CI:0.400-1.206,P=0.447)。

2.3 發(fā)表偏倚的評(píng)估

個(gè)研究間數(shù)據(jù)不存在發(fā)表偏倚。T/T vs C/C的研究數(shù)據(jù)通過(guò)Begg檢驗(yàn)和Egger檢驗(yàn)的P＞0.6。C/T vs C/C研究數(shù)據(jù)的Begg檢驗(yàn)和Egger檢驗(yàn)的P＞0.2。

圖1 CTLA-4-1722基因型T/T vs C/C的OR合并分析森林圖

3 討論

在CTLA-4基因的啟動(dòng)子區(qū)存在3個(gè)主要的多態(tài)性位點(diǎn)(-1 772,-1 661,-318)。目前以中國(guó)人群為研究對(duì)象的研究均認(rèn)為啟動(dòng)子區(qū)-318基因多態(tài)性與SLE易感性不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性[6-9]。對(duì)中國(guó)人群中CTLA-4-1661位點(diǎn)多態(tài)性與SLE相關(guān)性的研究較少,徐安平等[10]的研究認(rèn)為-1661位點(diǎn)SNP與SLE的發(fā)生不存在相關(guān)性。本文通過(guò)對(duì)CTLA-4-1722位點(diǎn)3篇相關(guān)研究文獻(xiàn)的meta分析提示基因型TT與SLE的易感存在相關(guān)性。

圖2 CTLA-4-1722基因型C/T vs C/C的OR合并分析森林圖

對(duì)于遺傳相關(guān)性疾病的病理機(jī)制的探討通常需要確定易感基因,因此對(duì)于疾病可能易感基因的病例對(duì)照研究就顯得十分重要。一些研究提示CTLA-4-1722 T/T基因型與SLE的發(fā)生存在正相關(guān)性,但另外一些研究則不這樣認(rèn)為。這其中可能存在多種原因,一種可能是由于連鎖不平衡的存在,不同人群中不同的連鎖不平衡模式可能影響這種結(jié)果。另外一種可能就是單個(gè)研究所包含的樣本數(shù)量有限,不能提供有效的統(tǒng)計(jì)學(xué)依據(jù)。本研究通過(guò)將研究中國(guó)人群CTLA-4-1722位點(diǎn)多態(tài)性與SLE相關(guān)性的文獻(xiàn)進(jìn)行綜合meta分析發(fā)現(xiàn)基因型T/T可能SLE發(fā)生的危險(xiǎn)因素(P＜0.01)。C/T基因型與SLE發(fā)生不存在相關(guān)性的結(jié)果則提示等位基因T與SLE發(fā)生的危險(xiǎn)性可能呈現(xiàn)計(jì)量依賴(lài)性。

總之,目前關(guān)于中國(guó)人群中CTLA-4基因啟動(dòng)子區(qū)基因多態(tài)性與SLE發(fā)生相關(guān)性的研究數(shù)據(jù)十分有限。CTLA-4-1722 T/T基因型可能是中國(guó)人群患SLE的危險(xiǎn)因素,但要確定這樣的關(guān)系尚需要更多的研究數(shù)據(jù)。

[1]Karandikar NJ.CTLA-4:a negative regulator of autoimmune disease[J].J Exp Med,1996,184(2):783.

[2]Quintero-del-Rio AI.SLEN2(2q34-35)and SLEN1(10q22.3)replication systemic lupus erythematosus stratified by nephritis[J].Am J Hum Genet,2004,75(2):346.

[3]Scalapino KJ,DI.Daikh,CTLA-4.A key regulatory point in the control of autoimmun disease[J].Immunol Rev,2008,223:143.

[4]彭學(xué)標(biāo),朱曉亮.系統(tǒng)性紅斑狼瘡與CTLA-4基因多態(tài)性的相關(guān)性研究[J].免疫學(xué)雜志,2001,17(5):399.

[5]彭春林,江 峰,王寶濤,等.易感基因與環(huán)境因素的交互作用對(duì)女性系統(tǒng)性紅斑狼瘡發(fā)病的影響[J].中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志,2010,44(2):144.

[6]Liu MF.CTLA-4 gene polymorphism in promoter and exon-1 regions in Chinese patients with systemic lupus erythematosus[J].Lupus,2001,10(9):647.

[7]周樹(shù)錄,葉任高,張 虹,等.CTLA-4基因啟動(dòng)子區(qū)-318位點(diǎn)基因多態(tài)性與SLE的相關(guān)性研究[J].新醫(yī)學(xué),2003,34(5):291.

[8]周 艷,肖林生.中國(guó)人群CTLA-4基因多態(tài)性與系統(tǒng)性紅斑狼瘡及類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的相關(guān)性研究[J].免疫學(xué)雜志,2007,23(3):349.

[9]高淑娜,姜綜敏,孟 煒,等.細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原-4基因啟動(dòng)子區(qū)多態(tài)性與系統(tǒng)性紅斑狼瘡的遺傳易感性[J].復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2007,34(2):193

[10]徐安平,尹培達(dá),蘇曉燕.系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者CTLA-4基因-1661位點(diǎn)多態(tài)性研究[J].福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2004,38(4):404.

[11]王 利,王 峰.CTLA-4基因啟動(dòng)子區(qū)多態(tài)性與系統(tǒng)性紅斑狼瘡的關(guān)系分析.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2010,7(9):774.

[12]徐安平,尹培達(dá),蘇曉燕.中國(guó)人CTLA-4基因-1722位點(diǎn)多態(tài)性與系統(tǒng)性紅斑狼瘡的相關(guān)性.第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2004,24(10):1107.