徐偉愛 ，吳辛剛 ，洪為松 ，傅麗芳 ，尉曉冬 ，許愛娥

（1.杭州市余杭區(qū)第五人民醫(yī)院，余杭 311100；2.杭州市第三人民醫(yī)院，杭州 310009）

白癜風(fēng)是一種常見的色素減退性疾病，目前該病的發(fā)病機(jī)制尚不明確，治療困難，嚴(yán)重影響身心健康[1-3]。對(duì)于常規(guī)治療失?。ㄈ缇植刻瞧べ|(zhì)激素、免疫調(diào)制劑、補(bǔ)骨脂類藥物等）的穩(wěn)定期白癜風(fēng)患者，應(yīng)用外科手段治療是很有必要的。自體純培養(yǎng)黑素細(xì)胞移植是治療穩(wěn)定期白癜風(fēng)的有效手段，近年來國(guó)內(nèi)外已有大量的文獻(xiàn)報(bào)道，體外擴(kuò)增培養(yǎng)的細(xì)胞能夠?yàn)橐浦蔡峁└嗟暮谒丶?xì)胞[6-10]。NB-UVB是治療白癜風(fēng)的一種有效且具有較好耐受性的方法[11-13]。體外研究證實(shí)NB-UVB能夠直接刺激培養(yǎng)黑素細(xì)胞的遷移和增殖，為NB-UVB治療白癜風(fēng)的療效提供理論基礎(chǔ)[14]。為此在本研究中我們采用開放性對(duì)照研究來評(píng)估自體純黑素細(xì)胞移植聯(lián)合NB-UVB治療白癜風(fēng)的療效，結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 44例患者（男25例，女19例），年齡 16～48歲[平均（24.64±10.09）歲]，病程 6 個(gè)月～25 年。納入標(biāo)準(zhǔn)：VIDA（白癜風(fēng)活動(dòng)程度評(píng)分）>+1；皮損穩(wěn)定至少1年，無同形反應(yīng)，對(duì)常規(guī)局部和系統(tǒng)的治療無反應(yīng)，無瘢痕體質(zhì)以及無嚴(yán)重的自身免疫性疾病[15]。所有患者移植療效觀察至少6個(gè)月。治療前以及每次隨訪均拍下皮損照片，對(duì)比前后照片來評(píng)估移植療效。

1.2 治療方法

1.2.1 供皮部位處理 生理鹽水常規(guī)消毒供皮部位，將皮膚分離儀器在正常腹部上進(jìn)行負(fù)壓吸引起皰，壓力為-300mmHg，每 5～10min觀察 1次，時(shí)間約為1～2h，直至出現(xiàn)大皰，停止吸引。剪下皰壁，置于Hanks’液中，立即送入細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室分離細(xì)胞。

1.2.2 細(xì)胞培養(yǎng) 分離和培養(yǎng)細(xì)胞的方法如文獻(xiàn)所述[6]。

1.2.3 受皮部位處理 移植前2～4h在受皮部位涂抹利多卡因乳膏。用70%的乙醇消毒受皮部位，超脈沖CO2激光（能量225mJ/s，速度 30～50Hz/s）磨削皮損表面。有4例對(duì)疼痛敏感的患者，應(yīng)用1%利多卡因局部注射。

1.2.4 移植 將黑素細(xì)胞種植在激光磨削的部位上。然后用凡士林紗布包扎，同時(shí)鋪上浸有F12溶液的紗布，最后用滅菌紗布和膠帶包扎。囑咐患者術(shù)后回家避免過度活動(dòng)、摩擦，以免影響療效。術(shù)后10 d祛除包扎。所有移植患者均在杭州市第三人民醫(yī)院白癜風(fēng)治療中心完成黑素細(xì)胞移植。

1.2.5 照光（NB-UVB） 移植后2周，囑所有患者在余杭區(qū)第五人民醫(yī)院進(jìn)行NB-UVB治療，1周2次，連續(xù)3個(gè)月。起始劑量0.40 J/cm2，每個(gè)療程根據(jù)患者的反應(yīng)和耐受能力增加0.10 J/cm2，但不超過3 J/cm2。

1.3 療效評(píng)估 NB-UVB治療后10 d、1個(gè)月、2個(gè)月、3個(gè)月、六個(gè)月各評(píng)估1次移植療效，評(píng)估復(fù)色面積。治療效果分為優(yōu)秀>90%；良好50%～89%；一般20%～49%以及無效<20%[6]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

見圖1和圖2。我們發(fā)現(xiàn)所有患者的復(fù)色模式均為彌散型，這與常規(guī)NB-UVB治療的點(diǎn)狀型復(fù)色模式有所不同，說明NB-UVB直接刺激了接種的黑素細(xì)胞的增殖和遷移。兩組獲得良好以上的復(fù)色效果的患者分別為86.9%、76.2%,兩組之間具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）；兩組之間的平均復(fù)色率分別為78.9%、70.0%，兩組間的Mann-Whitney U檢驗(yàn)具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05），見表1。兩組之間的治療部位的療效比較，皮損位于面頸部獲得良好以上復(fù)色率的患者分別為92.3%、90.9%，兩組間對(duì)比無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；皮損位于軀干部獲得良好以上復(fù)色率的患者分別為80.0%、60.0%，兩組間對(duì)比有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05），見表2。

圖1 治療前白斑約60cm2

圖2 治療后復(fù)色基本痊愈

表1 兩組治療白癜風(fēng)的療效情況 例（%）

表2 兩組治療不同部位白癜風(fēng)的療效情況 例（%）

在治療過程中所有患者均未出現(xiàn)嚴(yán)重的并發(fā)癥，僅出現(xiàn)皮膚灼熱感（1例）、紅斑（3例）、色素沉著（4例）等。治療部位色素沉著在隨訪6個(gè)月中逐漸減輕，且與周圍正常皮膚相接近。

3 討論

白癜風(fēng)的治療仍是一個(gè)醫(yī)學(xué)難題，雖然現(xiàn)今有各種各樣的方法在治療白癜風(fēng)上是有效，但仍有大量的患者復(fù)色失敗。對(duì)于常用療法治療失敗的穩(wěn)定期患者，外科治療是有必要的，尤其是暴露部位皮損。純黑素細(xì)胞培養(yǎng)移植通過在體外擴(kuò)增黑素細(xì)胞，進(jìn)而獲得更多的黑素細(xì)胞，為白癜風(fēng)的復(fù)色提供新的色素來源。體外黑素細(xì)胞的擴(kuò)增能夠?yàn)橐浦蔡峁└嗟暮谒丶?xì)胞，小面積（2cm2）的正常吸皰表皮所培養(yǎng)出的細(xì)胞能夠治療較大面積的白癜風(fēng)皮損（達(dá)500 cm2）[7-10]。以往的研究表明NB-UVB是治療白癜風(fēng)的一種有效且能很好耐受的方法[7-9]，NBUVB能夠刺激培養(yǎng)黑素細(xì)胞的增殖和遷移，為NBUVB有效治療白癜風(fēng)提供理論基礎(chǔ)[10]。

本研究中我們首次觀察自體純培養(yǎng)黑素細(xì)胞移植治療后聯(lián)用NB-UVB治療白癜風(fēng)的療效比較。在治療期間，我們發(fā)現(xiàn)所有患者的復(fù)色模式均為彌散型，這與NB-UVB治療的復(fù)色模式（點(diǎn)狀型）有所不同——這是由于NB-UVB刺激毛囊周圍黑素細(xì)胞的遷移和增殖所致，因此我們認(rèn)為NB-UVB能夠直接刺激移植部位黑素細(xì)胞的遷移和增殖[16]

本研究發(fā)現(xiàn)自體純培養(yǎng)黑素細(xì)胞移植聯(lián)合NB-UVB治療組復(fù)色率（50%以上復(fù)色率86.9%）比單用黑素細(xì)胞移植治療組（50%以上復(fù)色率76.2%）的復(fù)色率明顯增高，兩組間對(duì)比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。我們同時(shí)觀察到兩組之間面頸部獲得良好以上（>50%）復(fù)色率的患者分別為92.3%、90.9%，兩組間對(duì)比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。兩組之間軀干部獲得良好以上（>50%）復(fù)色率的患者分別為80.0%、60.0%，兩組間對(duì)比有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.039）。我們認(rèn)為面頸部位于光暴露部位，對(duì)光不敏感，容易形成光耐受性，因此兩組之間面頸部的療效沒有明顯的差異；而軀干對(duì)光敏感，因此聯(lián)合NB-UVB的效果優(yōu)于不聯(lián)用組。

總之，我們的研究表明自體純培養(yǎng)黑素細(xì)胞移植聯(lián)合NB-UVB治療白癜風(fēng)是一種有效的方法，聯(lián)合NB-UVB能夠提高黑素細(xì)胞移植的療效，尤其是對(duì)于位于軀干部皮損。

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