施 慧， 龍子江， 王 靚， 肖洪玲， 方海雁， 張敬楊

(安徽中醫(yī)學院，安徽合肥 230038)

心律失常在中醫(yī)理論里屬于“驚悸”、“怔忡”的范疇，本病為本虛標實證，其本為氣血不足，陰陽虧損，其標為氣滯、血瘀、痰火、水飲。寧心律康顆粒是由人參、麥冬、酸棗仁、丹參等組成的復方中藥制劑，具有益氣養(yǎng)陰、養(yǎng)血安神、定悸復脈的作用。本實驗通過復制冠狀動脈結(jié)扎誘發(fā)的心律失常模型來研究其抗心律失常作用，并探討其作用機制，為臨床應用提供實驗依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 藥品及試劑 寧心律康顆粒，由合肥遠志醫(yī)藥科技有限公司提供，其中人參、丹參、麥冬、酸棗仁按照2:1:1:1配伍，人用量為90 g生藥/d;穩(wěn)心顆粒:由山東步長制藥有限公司生產(chǎn)，國藥準字Z10950026，批號080545;水合氯醛:國藥集團化學試劑有限公司生產(chǎn)，批號:T20060331;SOD、MDA和NO試劑盒由南京建成生物工程研究所提供，批號:20080912。

1.2 試驗動物 Wistar大鼠，體質(zhì)量180～220 g，雌雄各半，由南京醫(yī)科大學提供，合格證號:SCXK(蘇)2008-0007。

1.3 試驗儀器 Medlab生物信號采集處理系統(tǒng):南京美易科技有限公司;754紫外-可見分光光度計，上海精密科學儀器有限公司生產(chǎn)。

1.4 試驗方法［1］取Wistar大鼠84只，隨機分成6組:假手術(shù)組(等容量蒸餾水)、模型組(等容量蒸餾水)、穩(wěn)心顆粒組(4.86 g/kg，按體表面積計算相當于人用量的2倍)、寧心律康顆粒小(8.10 g生藥/kg)、中(16.20 g生藥/kg)、大劑量組(32.40 g生藥/kg)，按體表面積計算相當于臨床人日用量90 g生藥的1、2和4倍，1 mL/100 g體質(zhì)量。每組14只，雌雄各半。大鼠按劑量連續(xù)給藥3 d，末次給藥后30 min，將各組大鼠用乙醚麻醉，先用Ⅱ?qū)?lián)觀察各組大鼠正常心電圖，左胸常規(guī)消毒后，于左第4肋間開胸暴露心臟，打開心包膜，距左冠狀動脈起點2 mm～3 mm處，穿5個0號手術(shù)線結(jié)扎，閉胸，假手術(shù)組只開胸，暴露心臟穿線但不結(jié)扎冠狀動脈。每組取手術(shù)成功的大鼠10只，用Medlab生物信號采集處理系統(tǒng)監(jiān)測結(jié)扎后30min內(nèi)心電圖的變化。觀察各組大鼠出現(xiàn)早搏的時間，以及各組大鼠出現(xiàn)室速(VT)和室顫(VF)的百分率。并于手術(shù)后24h，每組取10只大鼠用10%的水合氯醛ip3.5 mL/kg體質(zhì)量麻醉，然后腹主動脈取血，按說明書操作，用754紫外-可見分光光度計測SOD、MDA和NO量。

1.5 統(tǒng)計學分析 實驗數(shù)據(jù)用SPSS12.0 for Windows統(tǒng)計軟件處理，以±s表示。發(fā)生率組間比較采用χ2檢驗，其他指標組間比較均采用t檢驗。

2 結(jié)果

2.1 對冠脈結(jié)扎誘發(fā)的心律失常模型大鼠早搏出現(xiàn)時間、室速和室顫發(fā)生率的影響 結(jié)果見表1。

表1 對冠脈結(jié)扎誘發(fā)的心律失常模型大鼠早搏出現(xiàn)時間、室速和室顫發(fā)生率的影響 (±s，n=10)

表1 對冠脈結(jié)扎誘發(fā)的心律失常模型大鼠早搏出現(xiàn)時間、室速和室顫發(fā)生率的影響 (±s，n=10)

注:與模型組比 *P＜0.05 ，＊＊P ＜0.01。

發(fā)生率/%組別 劑量/(g/kg)早搏出現(xiàn)時間/s 早搏 室速 室顫假手術(shù)組 —— 374.0±11.3 30＊＊ 0＊＊ 0＊＊模型組 —— 348.3±34.6 100 100 70穩(wěn)心顆粒組 4.86 388.8 ±28.6*100 60* 50寧心律康顆粒小劑量組 8.10 386.5 ±32.6 100 80 60中劑量組 16.20 395.2 ±30.2*100 60* 40*大劑量組 32.40 410.0 ±25.0＊＊100 30＊＊ 20＊＊

由表1可見，各組大鼠行冠狀動脈結(jié)扎術(shù)后，均出現(xiàn)早搏，部分出現(xiàn)室速甚至室顫。而寧心律康顆粒各劑量組能夠顯著延長冠脈結(jié)扎大鼠出現(xiàn)早搏的時間，并且降低室速及室顫的發(fā)生率，其中大、中劑量組與模型組比有顯著性差異(P＜0.01，P＜0.05)，說明寧心律康顆粒能夠顯著延長冠狀動脈結(jié)扎誘發(fā)的大鼠出現(xiàn)早搏的時間，減少室速及室顫的發(fā)生，有效地對抗急性心肌缺血誘發(fā)的心律失常。

2.2 對冠脈結(jié)扎誘發(fā)的心律失常模型大鼠血清SOD、MDA和NO量的影響 結(jié)果見表2。

表2 冠脈結(jié)扎誘發(fā)的心律失常模型大鼠血清SOD、MDA和NO量的影響( ±s，n=10)

表2 冠脈結(jié)扎誘發(fā)的心律失常模型大鼠血清SOD、MDA和NO量的影響( ±s，n=10)

注:與模型組比 *P ＜0.05，＊＊P ＜0.01。

組別 劑量/(g/kg) MDA/(nmol/mL) SOD/(U/mL) NO/(μmol/L)假手術(shù)組 —— 1.575 ±0.386＊＊ 96.262±20.049＊＊ 9.373±1.094*模型組 —— 2.288 ±0.572 69.667±15.480 7.350±1.101穩(wěn)心顆粒組 4.86 1.729 ±0.463* 88.221 ±16.869* 8.421 ±0.945*寧心律康顆粒小劑量組 8.10 2.021 ±0.675 84.029 ±19.791 8.014 ±1.028中劑量組 16.20 1.758 ±0.433* 88.579 ±19.055* 8.668 ±1.221*大劑量組 32.40 1.613 ±0.328＊＊ 93.588±16.715＊＊ 8.906±1.221*

由表2可見，冠狀動脈結(jié)扎后，各組大鼠SOD、NO量明顯降低，MDA量明顯增高，其中模型組與假手術(shù)組比有顯著性差異(P＜0.01);而寧心律康顆粒各劑量組SOD、NO量明顯增高，MDA量明顯降低，其中大、中劑量組與模型組比有顯著性差異(P＜0.01，P＜0.05)，說明寧心律康顆粒能夠顯著抑制氧自由基損傷，調(diào)節(jié)NO水平，有效地對抗急性心肌缺血誘發(fā)的心律失常。

3 討論

冠狀動脈左前降支結(jié)扎造成心肌缺血誘發(fā)心律失常是由于傳導障礙而產(chǎn)生單向傳導阻滯和興奮折返的結(jié)果，該模型與臨床急性心肌梗死的病人產(chǎn)生的心律失常很相似［2］。心肌缺血誘發(fā)心律失常的發(fā)生機制是多個因素共同作用的結(jié)果，主要與心肌細胞電生理改變，鈣超載，自由基損傷等有關，可誘發(fā)室性早搏和室性心動過速，也可發(fā)生室顫。

心肌細胞缺血、缺氧時氧自由基生成系統(tǒng)潛在活性增強，氧自由基生成增多，同時缺血組織細胞內(nèi)自由基清除物質(zhì)生成漸漸減少，而消耗增多，結(jié)果使氧自由基在缺血的組織中蓄積，從而造成心肌缺血損傷，進而誘發(fā)致死性心律失常。氧自由基導致心律失常的機制還不清楚，可能是由于氧自由基造成心肌細胞細胞膜上的不飽和脂肪酸發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應，破壞細胞膜的完整性，從而使心肌細胞膜離子通道功能異常有關，如:① 細胞內(nèi)鉀離子外流，胞外鉀不能被泵入細胞內(nèi)，細胞內(nèi)外離子分布不平衡，造成跨膜靜息電位增加，導致心肌膜電活動不穩(wěn)定性增加;②鈣離子持續(xù)內(nèi)流增加使心肌細胞的自律性加強，誘發(fā)后除極;③部分去極化的鈉通道使內(nèi)向電流增加，造成單個或一組細胞的潛在自動去極化傾向，細胞自律性加強［3-5］。

NO是在心血管系統(tǒng)具有十分重要作用氣體信號分子。它不僅來源于血管內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞，而且亦來源于非腎上腺素能和非膽堿能神經(jīng)末梢。NO具有擴張冠脈血管，增加心肌細胞灌流量;降低心肌收縮力，減少心肌耗氧量的作用能夠減輕心律失常發(fā)作的嚴重程度。同時NO激活鳥苷酸環(huán)化酶(GC)，調(diào)節(jié)心肌細胞內(nèi)cGMP、cAMP水平，通過cGMP依賴的蛋白激酶減少緩慢內(nèi)向鈣電流，阻滯通過肌纖維膜上L型鈣通道(CaL)的鈣離子內(nèi)流，抑制房室結(jié)上異丙腎上腺素激活的鈣通道(ICa)活性，減少心肌缺血誘發(fā)的鈣超載，抑制心律失常的發(fā)生［6-8］。

本實驗研究表明寧心律康顆粒能夠顯著抑制氧自由基損傷，調(diào)節(jié)NO水平，從而有效地對抗急性心肌缺血誘發(fā)的心律失常。但其對具體離子通道的影響還要進一步深入研究。

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