曾富佳， 劉文煒， 高玉瓊， 劉建華*， 位 寧， 盛世昌

(貴州大學(xué)生命科學(xué)院，貴州貴陽(yáng) 550025;貴州省生物技術(shù)研究開(kāi)發(fā)基地，貴州貴陽(yáng) 550002)

中藥百部為百部科植物直立百部Stemona sessilifoliaMiq，蔓生百部Stemona japonicaMiq和對(duì)葉百部Stemona tuberosaLour的干燥塊根［1］。對(duì)葉百部生于向陰處灌木林下、溪邊、路邊及山谷和陰濕巖石上。主產(chǎn)湖北、廣東、福建、四川、貴州［2］。性微溫，味甘、苦。功效為潤(rùn)肺下氣止咳，殺蟲(chóng)。主治用于新久咳嗽、肺勞咳嗽、百日咳;外用于頭虱、體虱、蛻蟲(chóng)病、陰癢癥［3］。目前對(duì)葉百部研究主要集中在根塊中生物堿類化合物及其臨床止咳運(yùn)用［4-7］，而對(duì)對(duì)葉百部其他化學(xué)成分研究的報(bào)道較少，本實(shí)驗(yàn)采用有機(jī)溶劑-水蒸汽蒸餾法，提取對(duì)葉百部根塊中的揮發(fā)油成分，NIST標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖庫(kù)和WILEY275質(zhì)譜圖庫(kù)鑒定化合物。用面積歸一法計(jì)算各峰的相對(duì)含量，為合理開(kāi)發(fā)利用對(duì)葉百部資源提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與儀器

1.1 材料與試劑 對(duì)葉百部藥材采自貴州興義，由貴州大學(xué)生物與科學(xué)學(xué)院生物系關(guān)平教授鑒定為百部科植物對(duì)葉百部Stemona tuberosaLour。取對(duì)葉百部藥材粉碎，過(guò)24目篩備用。所用試劑正己烷(天津市富宇精細(xì)化工有限公司)、無(wú)水硫酸鈉(天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司)。

1.2 儀器 BL150型電子天平(賽多利斯，d=0.01 g);DFY-500搖擺式高速中藥粉碎機(jī)(溫嶺市大德中藥機(jī)械有限公司);HP-6890/HP5973(美國(guó)惠普公司)型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC-MS);揮發(fā)油提取器。

2 方法與結(jié)果

2.1 樣品前處理 取對(duì)葉百部粗粉20 g，加入2 000 mL水及4 mL正己烷，采用2010版一部《中國(guó)藥典》揮發(fā)油提取裝置［3］提取對(duì)葉百部揮發(fā)油，提取數(shù)小時(shí)收集上層油狀物質(zhì)并無(wú)水硫酸鈉干燥作為供試品備用。

2.2 對(duì)葉百部揮發(fā)性成分GC-MS分析 精密吸取供試品溶液1 μL，注入氣相色譜儀中，進(jìn)行GC-MS儀器分離測(cè)定。

氣相色譜條件:HP-5MS5%Phenyl Methyl Siloxane(30 m×250 μm ×0.25 μm)彈性石英毛細(xì)管柱;升溫程序:柱溫從50℃開(kāi)始，保留2 min，以4℃/min升溫至280℃，保溫2 min。汽化室溫度250℃;載氣:高純He(99.99%);柱前壓7.62Psi;載氣流量1.0 mL/min;分流比40 ∶1，進(jìn)樣量 1 μL。

質(zhì)譜條件:離子源 EI源;電子能量70eV;四級(jí)桿溫度150℃;發(fā)射電流34.6 μA;倍增器電壓2 013 V;離子源溫度230℃;接口溫度280℃;溶劑延遲4 min;掃描范圍10～500 amu。

數(shù)據(jù)分析:通過(guò)HP MSD化學(xué)工作站檢索NIST標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖庫(kù)和WILEY275質(zhì)譜圖庫(kù)對(duì)各色譜峰進(jìn)行檢索，用峰面積歸一化法進(jìn)行計(jì)算求出對(duì)葉百部各化學(xué)成分的峰面積相對(duì)百分含量。

對(duì)葉百部揮發(fā)油總離子流圖見(jiàn)圖1，各組分按化合物類

型分類，同類化合物按照從色譜柱中流出順序，結(jié)果見(jiàn)表1。

圖1 對(duì)葉百部揮發(fā)性成分總離子流圖

表1 對(duì)葉百部檢出化學(xué)成分及峰面積相對(duì)百分含量

續(xù)表1

3 討論

對(duì)葉百部揮發(fā)性成分中共提取分離并鑒定50個(gè)化學(xué)成分，占揮發(fā)油總量的95.21%，其中相對(duì)含量較高的為硫15.035% 、6，10，14-三甲基-2-十五烷酮 9.098% 、1-辛烯-3-醇7.879%、鄰苯二甲酸二異丁酯6.391%、棕櫚酸4.882%、愈創(chuàng)木酚 3.250%、、藍(lán)木醇 3.087%、蒽 3.089%、α-雪松醇2.453%、4-乙基愈創(chuàng)木酚2.364%。由上述分析結(jié)果可以看出，對(duì)葉百部根塊的揮發(fā)性成分很豐富。其中部分化合物具有生物活性，如揮發(fā)性烯醇一般具有舒張支氣管作用。對(duì)葉百部的化學(xué)成分研究主要針對(duì)百部中的生物堿類成分，故需從不同角度用不同方法對(duì)其不同成分進(jìn)行研究［8-12］。本文對(duì)對(duì)葉百部的揮發(fā)性化學(xué)成分進(jìn)行研究，尚未見(jiàn)其它相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，為綜合利用對(duì)葉百部提供了科學(xué)依據(jù)。

［1］江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典(上)［M］.上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1986:858.

［2］張宏武.中藥百部炮制歷史沿革及現(xiàn)代研究概述［J］.國(guó)外醫(yī)學(xué)中醫(yī)中藥分冊(cè).2004，26(5):265-270.

［3］中國(guó)藥典［S］.一部.2010:123-124.

［4］林文翰，葉 陽(yáng)，徐任生.狹葉百部中新生物堿的結(jié)構(gòu)研究［J］. 有機(jī)化學(xué)，1991，11:500-503.

［5］Lin wenhan，Ye yang，Xu Rensheng.Studies on new alkaloids from Stemona tuberosa Tour［J］.Nat Prod，1992，55-57.

［6］林文翰，徐任生，鐘瓊芯.百部生物堿的化學(xué)研究Ⅱ.細(xì)花百部中微量生物堿的結(jié)構(gòu)研究［J］.化學(xué)學(xué)報(bào)，1991，49:1034-1037.

［7］叢曉東，徐國(guó)鈞，金蓉鸞，等.百部生藥學(xué)研究Ⅸ.中國(guó)百部屬植物塊根中總生物堿的測(cè)定和評(píng)價(jià)［J］.藥學(xué)學(xué)報(bào)，1992，27(7):556-560.

［8］葉 陽(yáng).中國(guó)百部科植物生物堿成分研究［D］.上海:中國(guó)科學(xué)院上海藥物所.1992.

［9］柯昌強(qiáng).細(xì)花百部生物堿的化學(xué)研究［D］.上海:中國(guó)科學(xué)院上海藥物所.2001.

［10］崔育新，林文翰.對(duì)葉百部烯酮和對(duì)葉百部酮的2DNMR研究［J］.波譜學(xué)雜志，1998，15(6):515-520.

［11］金 巖.百部流浸膏對(duì)環(huán)磷酰胺模型小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用［D］.遼寧:遼寧中醫(yī)學(xué)院.2003.

［12］劉世旺，付宏征，林文翰.對(duì)葉百部生物堿的結(jié)構(gòu)研究［J］.藥學(xué)學(xué)報(bào)，1999，34(5):372-375.