古蘭·托來西， 艾尼瓦爾·吾買爾， 田樹革， 娜迪拉·熱依木， 阿布來提·阿布力孜， 依巴代提·吐乎提*

(1.新疆醫(yī)科大學藥學院藥理教研室，新疆烏魯木齊 830054;2.新疆醫(yī)科大學中醫(yī)學院實驗中心，新疆 烏魯木齊 830054;3.新疆醫(yī)科大學第二附屬醫(yī)院，新疆烏魯木齊 830054)

維藥羅勒不同提取物對角叉菜膠所致大鼠急性胸膜炎模型的影響

古蘭·托來西1， 艾尼瓦爾·吾買爾1， 田樹革2， 娜迪拉·熱依木3， 阿布來提·阿布力孜1， 依巴代提·吐乎提1*

(1.新疆醫(yī)科大學藥學院藥理教研室，新疆烏魯木齊 830054;2.新疆醫(yī)科大學中醫(yī)學院實驗中心，新疆 烏魯木齊 830054;3.新疆醫(yī)科大學第二附屬醫(yī)院，新疆烏魯木齊 830054)

目的 探討羅勒不同提取物對胸膜炎模型大鼠的腫瘤壞死因子-a(TNF-a)，前列腺素E2(PGE2)，白細胞介素-8(IL-8)的影響。方法 實驗分為9組，每組連續(xù)灌胃7 d，末次給藥30 min后采用角叉菜膠所致大鼠胸膜炎模型。結(jié)果模型組大鼠胸腔滲出液中TNF-a，蛋白質(zhì)量明顯升高(P＜0.001，P＜0.01)及血清中IL-8，PGE2顯著升高(P＜0.001)。結(jié)論 羅勒不同提取物對角叉菜膠所致大鼠急性胸膜炎有顯著的抑制作用，其作用機制可能是通過抑制炎性介質(zhì)PGE2的生成和細胞因子TNF-a，IL-8的升高等環(huán)節(jié)產(chǎn)生抗炎作用。

維藥羅勒;角叉菜膠;胸膜炎

羅勒Ocimum basilicumL.是唇形科羅勒屬一年生草本植物，是維吾爾醫(yī)應(yīng)用歷史悠久的常用藥材之一，植物維文名為熱依汗(Rayhan)［2］，別名九層塔，毛羅勒，丁香，香草等［3］。原產(chǎn)于以印度為中心的亞洲熱帶［8］，我國中部，南部，東部有栽培，主要分布與云南，四川，廣東，臺灣，湖南，福建，新疆等地。現(xiàn)代化學研究表明羅勒的主要成分包括揮發(fā)油類，黃酮類及其苷類，香豆素類，此外還含萜類和生物堿類［4］。本實驗所研究的是在新疆栽培的羅勒。本課題組前期研究已表明新疆羅勒有降血壓，調(diào)血脂及抗血栓作用，在國外研究表明羅勒具有抗炎作用，但國內(nèi)尚未見羅勒抗炎作用的研究報告。本實驗研究羅勒不同提取物(水，乙酸乙酯，正丁醇)對胸腔滲出液的炎癥因子，炎性介質(zhì)以及蛋白質(zhì)量的影響作了相關(guān)研究，從中探討其抗炎作用。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 藥品及試劑 鹽酸地塞米松片:0.75 mg/片(天津藥業(yè)集團新鄭股份有限公司，批號090817)，戊巴比妥鈉(批號860901)，角叉菜膠(Carrageenan，Car)(Biosharp公司，批號1000245)，大鼠腫瘤壞死因子-a(TNF-a)ELISA試劑盒(批號201005)，大鼠白細胞介素8(IL-8)ELISA試劑盒(批號201005)，大鼠前列腺素 E2(PGE2)ELISA試劑盒(批號201005均由R＆D公司)，Bradford蛋白濃度測定試劑盒(北京博邁德科技發(fā)展有限公司，批號20301151)，肝素鈉(Solarbio公司，批號H8060)。

1.1.2 實驗儀器 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 RE-52AA，恒溫水浴鍋 B-220(上海亞榮生化儀器廠，新疆醫(yī)科大學中藥-生藥學實驗室提供)，冷凍干燥機(北京博醫(yī)康實驗儀器有限公司，F(xiàn)D-1)，ODA-LO2510102酶標分析儀(BIO-RAD公司)，LXJ-IIB低速大容量多管離心機。

1.1.3 實驗動物 雄性 SD大鼠108只，清潔級，體質(zhì)量(200±20)g，均由新疆醫(yī)科大學動物中心提供。

1.2 實驗方法

1.2.1 藥材的提取 新疆托克遜縣采集的羅勒地上部分粉碎后用8～10倍量水浸泡，用回流法回流提取3次，合并3次濾液，進行減壓濃縮至浸膏狀，置－70℃冷藏1 h，取出后放入冷凍干燥機24 h后得羅勒水提物的固體粉末;乙酸乙酯，正丁醇部分從乙醇提取液中分別萃取得到的(乙醇提方法采用95%乙醇溶液，其余方法完全相同)羅勒乙酸乙酯，正丁醇萃取物的固體粉末。

實驗時羅勒水提取物和正丁醇萃取物固體粉末加蒸餾水溶解，乙酸乙酯萃取物在5%的CMC-Na溶液溶解至所需濃度。本實驗前期定性實驗結(jié)果表明水提物主要含糖類，乙酸乙酯提取部分含黃酮類、皂苷類、萜類，正丁醇提取部分含黃酮苷類。

1.2.2 雄性SD大鼠108只，隨機分為9組，每組12只:正常組，模型對照組，陽性對照組(地塞米松7.5 mg/kg)，羅勒水提物高，低劑量組(400 mg/kg，100 mg/kg)，羅勒乙酸乙酯萃取物高，低劑量組(400 mg/kg，100 mg/kg)，羅勒正丁醇萃取物高，低劑量組(400 mg/kg，100 mg/kg)。每組動物連續(xù)灌胃7 d，每日1次，正常組與模型組給予等體積的生理鹽水，末次給藥30 min后，模型對照組及各給藥組動物分別用乙醚輕度麻醉后向胸腔內(nèi)注入角叉菜膠(0.2 mL/100 g)［1，5-7］，正常組注入等體積生理鹽水，致炎 12 h 后，大鼠摘除眼球取血后，戊巴比妥鈉麻醉處死，打開胸腔，用玻璃吸管將胸腔內(nèi)全部滲出液吸出，然后以PBS溶液(含肝素5 U/mL)2 mL沖洗胸腔2次，沖洗液和滲出液合并，將滲出液和血液3 000 r/min離心15 min，取上清液，按試劑盒說明書操作。

1.3 統(tǒng)計學方法 數(shù)據(jù)用SPSS16.0統(tǒng)計軟件處理，所有結(jié)果用±s表示，采用多組之間單因素方差分析和SNK兩兩比較，P＜0.05為有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 羅勒不同提取物對各組胸膜炎大鼠胸腔滲出液中TNF-a，Pro量的影響 與正常組比較，模型組大鼠胸腔滲出液中TNF-a，Pro量顯著升高。與模型組比較，陽性對照組大鼠胸腔滲出液中TNF-a，Pro量顯著降低(P＜0.001)，羅勒提取物水溶性部位高、低劑量組，乙酸乙酯高、低劑量組，正丁醇高、低劑量組均有顯著降低 TNF-a量(P＜0.001，P＜0.01)。水提物高劑量與乙酸乙酯，正丁醇高劑量比較，與正丁醇高劑量有明顯差異(P＜0.01)，乙酸乙酯高劑量與正丁醇高劑量比較也有差異，水提物與乙酸乙酯高劑量的相互接近，無差別。水提物低劑量與乙酸乙酯，正丁醇低劑量比較，與正丁醇低劑量有顯著性差別(P＜0.05)，乙酸乙酯低劑量與正丁醇低劑量比較也有明顯的差別(P＜0.01)。結(jié)果見表1。

表1 羅勒不同提取物對各組胸膜炎大鼠胸腔滲出液中TNF-a，Pro質(zhì)量的影響(±s)

表1 羅勒不同提取物對各組胸膜炎大鼠胸腔滲出液中TNF-a，Pro質(zhì)量的影響(±s)

注:與模型組比較，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01，＊＊＊P ＜0. 001;與水提物高劑量比較，##P ＜0. 01;與乙酸乙酯高劑量比較，▲▲P ＜0. 01;與水提物低劑量比較，△P ＜0. 05;與乙酸乙酯低劑量比較，?P ＜0.05。

組別 劑量/(mg/kg) 動物數(shù)/只 TNF-a/(ng/L) Pro/(μg/L)正常組 — 10 11.86±2.55＊＊＊9.09 ±4.18模型組 — 9 27.99±8.34 17.33±2.18＊＊＊地塞米松組 7.5 9 11.61±2.22＊＊＊ 9.90±4.21###羅勒水提物高劑量組 400 10 11.97±1.02＊＊＊ 15.26±4.75###羅勒水提物低劑量組 100 10 13.47±2.23＊＊＊ 16.33±3.30＊＊羅勒乙酸乙酯高劑量組 400 10 12.33±1.39＊＊＊ 10.92±3.75###羅勒乙酸乙酯低劑量組 100 10 13.85±2.71＊＊＊ 13.54±4.36#羅勒正丁醇高劑量組 400 10 17.04±3.21＊＊##▲▲ 10.70±3.39###羅勒正丁醇低劑量組 100 10 17.32±2.64＊＊△? 10.72±2.48###

2.2 羅勒不同提取物對各組胸膜炎大鼠血清中IL-8，PGE2的影響 與正常組比較，模型組大鼠胸腔滲出液中IL-8，PGE2的量顯著升高。與模型組比較，陽性對照組大鼠血清中IL-8，PGE2的量顯著降低(P＜0.001)，羅勒提取物水溶性部位高、低劑量組，乙酸乙酯高、低劑量組，正丁醇高、低劑量組均有顯著降低血清中 IL-8，PGE2的量(P＜0.001，P＜0.01)。與地塞米松組比較，乙酸乙酯低劑量，正丁醇低劑量有顯著性差異(P＜0.05)，水提物低劑量與乙酸乙酯低劑量也有顯著性差異(P＜0.05)。結(jié)果見表2。

表2 羅勒不同提取物對各組胸膜炎大鼠血清中IL-8，PGE2的影響(±s)

表2 羅勒不同提取物對各組胸膜炎大鼠血清中IL-8，PGE2的影響(±s)

注:與模型組比較，＊＊P ＜0.01，＊＊＊P ＜0. 001;與地塞米松組比較，+P ＜0. 05;與水提物低劑量比較，△P ＜0.05。

組別 劑量/(mg/kg) 動物數(shù)/只 IL-8/(ng/L) PGE2/(ng/L)正常組 — 10 139.51±18.91＊＊＊ 38.08±4.41＊＊＊模型組 — 9 215.78±39.19 77.33±3.59地塞米松組 7.5 9 126.10±15.63＊＊＊ 45.92±3.82＊＊＊羅勒水提物高劑量組 400 10 140.21±18.42＊＊＊ 47.65±4.47＊＊＊羅勒水提物低劑量組 100 10 142.88±7.79＊＊＊ 51.36±4.23＊＊羅勒乙酸乙酯高劑量組 400 10 155.38 ±5.23＊＊＊+ 47.82 ±4.37＊＊＊羅勒乙酸乙酯低劑量組 100 10 159.47±8.08＊＊＊+△ 48.90±4.81＊＊＊羅勒正丁醇高劑量組 400 10 143.33±30.88＊＊＊ 44.27±2.66＊＊＊羅勒正丁醇低劑量組 100 10 154.10 ±18.91＊＊＊+ 47.60 ±6.22＊＊＊

3 討論

角叉菜膠誘導的大鼠胸膜炎模型是常用的急性炎癥模型［9］，該模型在炎癥反應(yīng)時，巨噬細胞，中性粒細胞，血小板等炎細胞激活，釋放大量的炎癥介質(zhì)，如TNF-a，PGs，組胺，纖維蛋白裂解物等，本研究羅勒不同提取物對胸腔滲出液的炎癥因子，炎性介質(zhì)以及蛋白質(zhì)量的影響作了相關(guān)研究。

TNF-a是一種重要的由激活的單核-巨噬細胞系統(tǒng)產(chǎn)生，并具有廣泛生物學功能的促炎性因子和免疫調(diào)節(jié)因子，可通過對血管內(nèi)皮細胞的作用，引起肺部損傷和胸膜炎，能增加中性粒細胞的黏附，指導胸腺細胞的成熟，并可刺激增強中性多核白細胞的浸潤，吞噬活性與氧化自由基的產(chǎn)生，啟動單核-巨噬細胞釋放 IL-6，IL-8，PGE2等炎癥介質(zhì)［9］。急性炎癥過程中涉及體內(nèi)TNF，IL-1，IL-6，IL-8水平增加。本實驗預防性給予羅勒不同提取物可抑制炎癥時細胞因子TNF-a大量產(chǎn)生，從而進一步抑制IL-6，IL-8，PGE2的釋放，羅勒不同提取物對TNF-a有顯著地抑制作用(P＜0.001)。其中筆者還測了IL-8，PGE2的含量，羅勒不同提取物對血清中IL-8，PGE2有顯著地抑制作用(P＜0.001)。

通過本次實驗，初步發(fā)現(xiàn)羅勒不同提取物對胸膜炎有抑制作用，其作用機制可能是通過抑制細胞因子TNF-a和IL-8的升高，抑制炎性介質(zhì)PGE2的生成，從而達到抗炎效果。

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R285.5

B

1001-1528(2011)08-1410-03

2010-12-27

國家自然科學基金(30660210)

古蘭·托來西(1984—)，女，碩士研究生。Tel:15099509375，E-mail:Gulan.215@163.com

*通信作者:依巴代提·吐乎提(維吾爾族)，女，教授，碩士生導師，研究方向:心血管藥理。Tel:13899930546