高 楓，符兆英，李寶莉

(1.延安大學醫(yī)學院生理學教研室，2.免疫學教研室，3.藥理學教研室，陜西 延安 716000)

棘仁為植物酸棗(Ziziphus spinosa Hu)的干燥成熟種子，含脂肪油、皂苷類、黃酮類、三萜類和植物甾醇等成分[1]。柏仁為植物側(cè)柏(Platycladus orientalis Franco)的干燥成熟種仁，含脂肪油、皂苷類、柏木醇、雙萜類和植物甾醇等成分[2]。梔子為植物梔子(Gardenia jasminoides Ellis)的干燥成熟果實，含梔子苷、黃酮類、三萜類和有機酸酯等成分[3]。本實驗將棘仁、柏仁和梔子的活性部位棘仁油、柏仁油和梔子油按3∶2∶l比例配伍制成復方制劑，以研究其安神與益智作用。

1 材料與方法

1.1 實驗動物、藥品與器材

健康雌性昆明種 ICR小鼠，體重18～22 g，二級動物，由西安交通大學實驗動物中心提供。棘仁油購自陜西旭煌植物科技發(fā)展有限公司，柏仁油購自廣西山云生化科技有限公司，梔子油購自廣西山云生化科技有限公司;三者按3∶2∶l比例配成復方制劑(棘仁柏仁梔子油配方)。安定注射液為上海旭東海普藥業(yè)有限公司產(chǎn)品，腦復康注射液為江蘇省常州制藥有限公司產(chǎn)品。YLS-1A小鼠自主活動記錄儀由淮北正華生物儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)，MT-200Morris水迷宮視頻跟蹤系統(tǒng)由成都泰盟科技有限公司生產(chǎn)。

1.2 棘仁柏仁梔子油配方影響小鼠自主活動的實驗

小鼠50只，隨機分為 5組(n=10):棘仁柏仁梔子油大劑量組(5 ml/kg)、中劑量組(2.5 ml/kg)、小劑量組(1.25 ml/kg);安定組(3 ml/kg);生理鹽水組。在固定時間灌胃給藥，每天 1次。連續(xù)用藥 15 d，在藥前和用藥后的第 1、2、3、5、10天(給藥60min后)用YLS-1A小鼠自主活動記錄儀記錄15 min各組小鼠的自主活動次數(shù)。

1.3 棘仁柏仁梔子油配方影響小鼠學習記憶的實驗

小鼠50只，隨機分為 5組(n=10):棘仁柏仁梔子油大劑量組(5 ml/kg)、中劑量組(2.5 ml/kg)、小劑量組(1.25 ml/kg);腦復康組(0.5 g/kg);生理鹽水組。連續(xù)灌胃給藥15 d，第16天開始在給藥60min后進行Morris水迷宮訓練。水池分為4個象限，第I象限正中距池壁33 cm處放置一直徑10cm、高15 cm的平臺，平臺頂?shù)陀谒? cm。迷宮上方安置像機，同步記錄小鼠運動軌跡。每只小鼠訓練每天4次，訓練期間迷宮外參照物不變。將小鼠從不同入水點背對站臺放入池中，記錄小鼠從入水至找到站臺所需時間(潛伏期)。找到后讓小鼠在平臺上保持15 s。如60s找不到，則引導到平臺上，并保持15 s。連續(xù)訓練4 d。第20天在給藥 60min后進行行為測試，將站臺移放到不同象限中作站臺遷移試驗。計算4個潛伏期的平均值。

1.4 統(tǒng)計學分析

2 結(jié)果

2.1 棘仁柏仁梔子油配方對小鼠自主活動影響的實驗結(jié)果

安定組小鼠于用藥第1天出現(xiàn)自主活動高顯著性減少，該作用隨用藥時間延長逐漸減弱，有統(tǒng)計學意義。棘仁柏仁梔子油大劑量組小鼠于用藥第2天出現(xiàn)自主活動高顯著性減少，該作用隨用藥時間延長而逐漸增強。表明安定注射液鎮(zhèn)靜作用出現(xiàn)快，但有耐受現(xiàn)象;棘仁柏仁梔子油配方的鎮(zhèn)靜作用出現(xiàn)略慢，但作用隨用藥時間延長而增強，無耐受現(xiàn)象(表1)。

Tab.1 Effect of COSOJ on mouse independent activities(，n=10)

Tab.1 Effect of COSOJ on mouse independent activities(，n=10)

COSOJ:Compound oil of semen spinosa，semen orientalis，and jasminoides*P＜0.05，**P＜0.01 vs normal saline;#P＜0.05，##P＜0.01 vs 0d;△P＜0.05，△△P＜0.01 vs 1 d of Diazepam

Group 0d 1 d 2 d 3 d 5 d 10d Normal saline 354.8±61.6 346.0±65.3 350.7±70.2 320.9±73.5 353.6±80.8 349.6±68.3 Diazepam injectio 350.6±69.3 102.4±41.3**##149.9±63.0**##△219.4±72.3*##△△ 227.8±68.2*#△△240.8±70.9*#△△Small COSOJ dosage 362.1±59.8 324.7±75.1 327.0±69.3 319.4±81.6 283.6±73.5 295.0±76.8 Middle COSOJ dosage 358.2±72.3 316.9±79.6 311.9±74.2 304.5±78.7 292.3±63.0 283.9±72.2 Large COSOJ dosage363.9±65.2229.1±73.4*# 214.7±76.3**##187.5±82.9**## 173.6±78.3**##168.7±69.4**##

2.2 棘仁柏仁梔子油配方對小鼠學習記憶影響的實驗結(jié)果

用藥前各組小鼠登臺潛伏期無顯著性差異。棘仁柏仁梔子油各劑量組在訓練第二天即出現(xiàn)登臺潛伏期縮短;與用藥前比較，有統(tǒng)計學意義;與生理鹽水對照組比較，除小劑量組的第2、3天外，有統(tǒng)計學意義(表2)。隨著訓練次數(shù)增加和用藥時間延長，潛伏期進一步縮短。腦復康組在訓練第四天才出現(xiàn)有統(tǒng)計學意義的登臺潛伏期縮短。

Tab.2 Effect of COSOJ on the incubation period(s)of mouse platform climbing inMorriswater maze(，n=10)

Tab.2 Effect of COSOJ on the incubation period(s)of mouse platform climbing inMorriswater maze(，n=10)

COSOJ:Compound oil of semen spinosa，semen orientalis，and jasminoides*P＜0.05，**P＜0.01 vs normal saline;#P＜0.05，##P＜0.01 vs 0d

Group D0 d16 d17 d18 d19 d20Normal saline 57.32±6.97 55.94±7.78 54.11±9.62 53.08±10.32 52.97±9.97 52.63±10.24 Acetamide Pyrrolidone 56.79±6.85 55.02±7.29 53.26±9.90 46.52±10.75 40.13±10.55# 38.10±11.67*##Small COSOJ dosage 56.93±6.77 54.31±9.64 44.57±9.74# 43.90±12.37# 39.24±11.98*## 37.70±12.46*##Middle COSOJ dosage 57.14±7.21 52.36±8.42 39.72±10.42*##35.79±11.82*##32.80±12.47**##30.57±12.42**##Large COSOJ dosage 57.39±6.58 49.87±9.83 39.19±11.28*##34.10±12.65*##32.59±12.63**##31.09±12.66**##

3 討論

中醫(yī)學認為，棘仁味甘性平，入心、脾、肝和膽經(jīng)，有寧心和安神的功效，主治虛煩失眠、心神不寧和驚悸等癥;柏仁味甘性平，入心、肝、腎和大腸經(jīng)，有安神寧心和生津潤腸的功效，主治虛煩不眠、怔忡和使秘等癥;梔子味苦性寒，歸心、肝、肺和胃經(jīng)，具有清熱和除煩的功效，主治熱病虛煩不眠等癥。棘仁、柏仁和梔子均可養(yǎng)心寧神，但棘仁善養(yǎng)肝血益心陰而寧心安神，為君藥;柏仁養(yǎng)補心氣養(yǎng)心血，為臣藥;梔子苦寒，長于清心解郁，屬佐使藥。棘仁養(yǎng)心陰斂心陰而治本;柏仁寧心神通心腎輔以治本;梔子導熱下行清心經(jīng)火而治標。三藥君臣佐使相配、標本兼顧，共奏斂陰養(yǎng)血，除煩安神之效。根據(jù)中醫(yī)組方思路，本實驗將棘仁、柏仁和梔子的活性部位棘仁油、柏仁油和梔子油按3∶2∶l配伍組方，以觀察其對小鼠自主活動和學習記憶的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn):(1)該配方可使小鼠自主活動減少，表明該配方有鎮(zhèn)靜作用，且其鎮(zhèn)靜作用隨用藥延長不出現(xiàn)耐受性;(2)該配方能縮短小鼠水迷宮試驗登臺潛伏期，表明該配方有增強學習記憶的作用。

根據(jù)現(xiàn)代醫(yī)學，棘仁柏仁梔子油配方的以上作用可能與其富含油酸、亞油酸和亞麻酸等不飽和脂肪酸有關(guān)。油酸、亞油酸和γ-亞麻酸可轉(zhuǎn)化成花生四烯酸和前列腺素，油酸還可?；捎王０?亞油酸、γ-亞麻酸和花生四烯酸可促進胰島素分泌。前列腺素II、胰島素和油酰胺為內(nèi)源性睡眠誘導物，胰島素和油酰胺均有調(diào)節(jié)慢波睡眠和誘導生理性睡眠的作用，油酰胺還有增強學習記憶的作用[4]。α-亞麻酸能使細胞膜流動性升高，對腦神經(jīng)元增殖、神經(jīng)傳導和突觸生長有重要作用，對維持視網(wǎng)膜功能及促進學習行為有重要作用?；ㄉ南┧釋﹂L時程增強(LTP)形成起著重要的作用[5]，而LTP與學習記憶機制密切關(guān)聯(lián);花生四烯酸的代謝產(chǎn)物加壓素也可提高學習記憶功能。

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