冉玉華，張東祥，肖忠海，張雁芳，崔文玉，王引虎，崔建華，汪 ?！?/p>

(1.軍事醫(yī)學科學院衛(wèi)生學環(huán)境醫(yī)學研究所全軍軍事環(huán)境醫(yī)學重點實驗室，北京 100850;2.解放軍第十八醫(yī)院，新疆 鄴城 844900)

高原肺水腫(high altitude pulmonary edema，HAPE)是發(fā)生在健康人群快速進入海拔2500m以上高度時出現(xiàn)的威脅生命的急性高原病[1]。HAPE形成和發(fā)生的確切機制目前還不十分清楚。比較公認的學說認為，HAPE是由于缺氧、肺動脈高壓和肺毛細血管通透性增加以及脂質(zhì)過氧化等所致[2]。有研究認為炎癥反應和免疫調(diào)節(jié)也參與了HAPE的病理過程。本研究收集到10例高原肺水腫患者在發(fā)病時和治療轉(zhuǎn)歸后的血清樣本，通過測定血清中內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)，腫瘤壞死因子-α(tumor necrosisfactor-α，TNF-α)，白介素-6(interleukin-6，IL-6)及一氧化氮(nitric oxide，NO)的含量變化，比較高原肺水腫發(fā)生以及轉(zhuǎn)歸時期的不同特征，旨在進一步探討HAPE的病理生理作用環(huán)節(jié)，為其機制研究提供實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 研究對象

10例HAPE患者均來自海拔5000m以上邊防哨卡，男性，年齡20～40歲，進駐高原3～5 d，發(fā)病1 d內(nèi)送至海拔3700m醫(yī)療站救治。HAPE診斷依據(jù)文獻標準，入院后常規(guī)治療，10例HAPE患者按照治療前后分為兩組HAPE發(fā)病組和治愈后的轉(zhuǎn)歸組。

1.2 實驗方法

血清標本為病人發(fā)病時和轉(zhuǎn)歸后通過靜脈采血，血標本分置于管內(nèi)，自然凝血。4℃，3500r/min，離心20min后得血清置于-70℃保存待測。實驗方法采用Elisa方法測定VEGF，TNF-α，IL-6的含量，Elisa試劑盒購自武漢博士德生物工程有限公司。利用硝酸還原法測定NO的含量變化，相關試劑盒購自南京建成生物有限公司。BIORAD酶標儀測定吸光度值，嚴格按照試劑盒說明書操作。

1.3 統(tǒng)計學處理

2 結(jié)果

VEGF在HAPE發(fā)病時血清的含量為(167.9±26.5)pg/ml，而轉(zhuǎn)歸之后其含量顯著降低為(53.1±17.0)pg/ml，(P ＜0.01，圖 1);TNF-α在血清中的含量從發(fā)病時的減少到轉(zhuǎn)歸后的(29.2±6.8)pg/ml，(P＜0.05)，有顯著性差異(圖2)。而 IL-6的水平也從發(fā)病時的(32.3±16.5)pg/ml變化為轉(zhuǎn)歸后的(12.5±8.0)pg/ml，雖然有下降的趨勢，但沒有統(tǒng)計學差異，見圖3。HAPE患者血清中的NO水平(圖4)從發(fā)病時的(33.8±3.3)μmol/L明顯的升高到轉(zhuǎn)歸后的(74.1±6.2)μmol/L(P＜0.01)。

Fig.1 Change of contents of VEGF in patients'serum with treatment

Fig.2 Change of contents of IL-6 in patients'serum with treatment

Fig.3 Change of contents of TNF-αin patients'serum with treatment

Fig.4 Change of contents of NO in patients'serumwith treatment

3 討論

VEGF是一種強烈的內(nèi)皮細胞特異性的分裂原和滲透因子，廣泛的參與血管基底膜的形成和血管的生成[3]。過度表達VEGF可以誘導肺通透性的增加導致肺水腫的發(fā)生[4]。此外，低氧也能誘導VEGF的mRNA表達上調(diào)，其作用機制可能是低氧刺激蛋白激酶C活性升高，進而促進VEGF的表達，VEGF再通過多種途徑改變血管內(nèi)皮細胞間緊密連接蛋白的重新分布，從而導致毛細血管通透性增加。有持不同觀點的學者認為VEGF對HAPE引起的肺泡細胞損傷具有保護作用[4]。我們的研究表明HAPE患者血清中VEGF含量發(fā)病時明顯高于治療轉(zhuǎn)歸后，提示VEGF在HAPE的病理發(fā)生過程中起著重要的作用。

作為炎癥因子的TNF-α，IL-6是免疫細胞之間傳遞信息進行聯(lián)絡的信號。有研究表明高原肺水腫患者發(fā)病時TNF-α，IL-6水平高于治療后[6，7]。我們的研究也發(fā)現(xiàn)TNF-α發(fā)病和轉(zhuǎn)歸時其血清中的含量分別為(86.2±24.1)pg/ml和(29.2±6.8)pg/ml，兩者相比有顯著差異。IL-6在高原肺水腫患者血清中發(fā)病和轉(zhuǎn)歸時其在血清中的含量分別為(32.3±16.5)pg/ml和(12.5±8.0)pg/ml，轉(zhuǎn)歸后較之發(fā)病時有下降的趨勢，但沒有統(tǒng)計學意義。HAPE的發(fā)生過程中伴隨著炎癥過程的發(fā)生，炎癥因子的變化表明TNF-α，IL-6的生物學效應可能與高原肺水腫的病理生理和發(fā)病機制相關。

NO是重要的內(nèi)皮舒血管因子，能夠調(diào)節(jié)肺血管緊張度并且維持生理性的肺血管阻力[2]。它通常由血管內(nèi)皮細胞通過內(nèi)皮一氧化氮合酶合成，內(nèi)皮一氧化氮合酶是產(chǎn)生肺部基礎NO釋放的關鍵催化酶之一[5]。HAPE患者治療轉(zhuǎn)歸后血清中的NO水平較之治療發(fā)病時有明顯升高。HAPE患者發(fā)病時NO水平的低下可能與肺部血管內(nèi)皮細胞的損傷相關。內(nèi)皮細胞的損傷引起NO的合成減少，內(nèi)皮損傷也能引起肺毛細血管通透性增加，這與低氧肺動脈高壓的形成有關。NO的含量變化可以部分地反映肺部血管內(nèi)皮細胞的功能活性，作為毛細血管通透性變化的指征。NO在HAPE患者發(fā)病和轉(zhuǎn)歸時的含量變化也證實它參與了HAPE發(fā)生發(fā)展的過程。進一步闡明NO與內(nèi)皮功能聯(lián)系以及它們在HAPE發(fā)生過程的作用將對HAPE的預防和治療起到良好的作用。

VEGF，TNF-α，IL-6及NO可能參與了HAPE發(fā)病和轉(zhuǎn)歸，但其確切機制仍有待進一步研究證實。

[1]Maggiorini M.High altitude-induced pulmonary edema[J].Cardiovas Res，2006，72(1):41-50.

[2]Droma Y，Hanaoka M，OtaM，et al.Positive association of the endothelial nitric oxide synthase gene polymorphismswith high-altitude pulmonary edema[J].Circulation，2002，106(7):826-830.

[3]Hanaoka M，Droma Y，Naramoto A，et al.Vascular endothelial growthfactor inpatientswith high-altitude pulmonary edema[J].J Appl Physiol，2003，94(5):1836-1840.

[4]Walter R，MaggioriniM，Scherrer U ，et al.Effects of highaltitude exposure on vascular endothelial growth factor levels in man[J].EurJ Appl Physiol，2001，85(1-2):113-117.

[5]Palmer R M，F(xiàn)errige A G，Moncada S.Nitric oxide release accounts for the biological activity of endothelium-derived relaxing factor[J].Nature，1987，327(6122):524-526.

[6]陳云天，胡 穎.急性高原腦水腫患者血漿白細胞介素-6的變化[J].解放軍預防醫(yī)學雜志，2006，24(2):92-94.

[7]崔建華，張西洲，何富文，等.健康青年進駐高原血清TNF-α和IL-6的變化[J].西南國防醫(yī)學雜志，1999，20(3):197.