何 云，王晨虹，石澤真，宋彩珍，鐘 梅

（1.深圳市婦幼保健院婦產(chǎn)科，廣東深圳 518028;2.武漢市武昌醫(yī)院檢驗(yàn)科，武漢 430071;3.南方醫(yī)科大學(xué)附屬南方醫(yī)院婦產(chǎn)科，廣州 510515）

子癇前期（preeclampsia，PE）是妊娠期特有的疾病，以高血壓、水腫、蛋白尿?yàn)橹饕Y狀，嚴(yán)重時(shí)出現(xiàn)抽搐、昏迷，甚至母嬰死亡。我國(guó)的發(fā)病率為9.4%［1］。PE 病因至今仍未能闡明，嚴(yán)重危害母嬰生命安全，影響了對(duì)該病的診斷、治療和預(yù)防水平的進(jìn)一步提高。目前研究認(rèn)為胎盤(pán)生長(zhǎng)因子（placenta growth factor，PlGF）可能參與了子癇前期的發(fā)生及發(fā)展［2］，文獻(xiàn)報(bào)道 PE 患者的PlGF水平低于正常妊娠組［3，4］。本研究采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定妊娠婦女的外周血清PlGF表達(dá)情況，同時(shí)收集患者臨床資料，探討PlGF在PE發(fā)病中可能的作用以及其對(duì)PE診斷預(yù)測(cè)的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2009年2月至2010年4月在深圳市婦幼保健院住院分娩的妊娠婦女53例，其中PE輕度15例、PE重度患者21例;血壓正常無(wú)妊娠合并癥的孕晚期孕婦17例（對(duì)照組），均為單胎妊娠。PE診斷標(biāo)準(zhǔn)參照全國(guó)高等學(xué)校教材婦產(chǎn)科學(xué)第7版［1］。排除標(biāo)準(zhǔn):既往無(wú)高血壓、心臟病、腎病、糖尿病、甲狀腺亢進(jìn)、血小板減少等病史;無(wú)胎膜早破、早產(chǎn)及感染征象。對(duì)照組、PE輕度、PE重度組平均年齡分別為（31.29 ±4.34）、（31.27 ±3.93）、（30.05±3.54）歲，平均分娩孕周（39.24 ±0.97）、（39.53 ±1.38）、（38.62 ±1.93）周。三組年齡及分娩孕周有可比性。

1.2 研究方法

1.2.1 外周血PlGF水平的檢測(cè) PE孕婦入院時(shí)未采取任何治療措施之前取肘靜脈血3 mL，注入不抗凝的玻璃試管中，靜置0.5 h，3000 r/min離心10 min取上清，置－70℃冰箱保存。取對(duì)照組孕婦肘靜脈血，同法處理。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法測(cè)定已分離保存的血清中PlGF濃度，操作嚴(yán)格按試劑盒（購(gòu)自美國(guó)R＆D System公司）的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，所有標(biāo)本均為同批測(cè)定，同人在同次實(shí)驗(yàn)中完成。檢測(cè)值范圍:0～800 ng/L，靈敏度:1.0 ng/L。

1.2.2 24 h 尿蛋白定量、血尿酸、肌酐、β2微球蛋白、白蛋白測(cè)定 按常規(guī)方法收集子癇前期孕婦入院當(dāng)天始24 h尿液及開(kāi)始治療前血液送檢驗(yàn)科檢查。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用單向分類(lèi)方差分析（one-way ANOVA），組間多重比較選用Dunnett T3法。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。應(yīng)用ROC曲線（receiver operating characteristic curve）進(jìn)行判別效果的分析與評(píng)價(jià)。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)照組、PE輕度組和重度組孕婦外周血中PlGF檢測(cè) 對(duì)照組外周血中PlGF的水平為（147.55±86.66）ng/L，PE 輕度、重度孕婦的水平分別為（62.41±38.86）、（35.91 ±24.28）ng/L。經(jīng)單向分類(lèi)方差分析，三組比較有顯著性差異（F=214.433，P=0.000），三組間進(jìn)一步做兩兩比較，PE輕度、重度分別與正常對(duì)照組相比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），PE輕度與重度組間比較，差異無(wú)顯著性（P＞0.05）。

2.2 對(duì)照組、PE輕度組和重度組孕婦臨床生化指標(biāo)檢測(cè) 三組白蛋白、血尿酸、肌酐、β2微球蛋白水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），除白蛋白逐漸降低外各組均數(shù)隨病情加重逐漸升高。PE重度組外周血中血尿酸、血清肌酐、β2微球蛋白明顯高于對(duì)照組，血漿白蛋白水平低于對(duì)照組（P＜0.05）（表1）。

表1 對(duì)照組、PE輕度組和重度組孕婦臨床生化指標(biāo)比較

2.3 PE組孕婦24 h尿蛋白的定量 PE輕度組為（701.63 ±404.18）g，重度組為（2557.89 ±2064.34）g，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t= － 3.724，P=0.001）。正常組未測(cè)尿蛋白定量。

2.4 PlGF和血清尿酸診斷PE特性 ROC曲線下的面積為0.913，標(biāo)準(zhǔn)誤為0.043。PlGF診斷PEP=0.000，95%可信區(qū)間為:0.829，0.998。同時(shí) PlGF 在截?cái)嘀档扔?07.25 ng/L時(shí)，靈敏度是91.7%，特異度是82.4%（圖1）。血清尿酸診斷PE ROC曲線下的面積為0.788，標(biāo)準(zhǔn)誤為0.064。血清尿酸診斷PEP=0.001，95% 可信區(qū)間為:0.662，0.913。同時(shí)血清尿酸在截?cái)嘀档扔?26.0 μmol/L時(shí)，靈敏度是60.0%，特異度是87.5%（圖2）?？梢?jiàn)血清中PlGF水平判斷PE病情的特異度、靈敏度高于血清尿酸。

圖1 PlGF診斷PE ROC曲線

圖2 血清尿酸診斷子癇前期ROC曲線

3 討論

PlGF是一種分泌型同型二聚體糖蛋白。是血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子家族中的一員。其基因定位于染色體14q24～q31位點(diǎn)。PlGF在正常妊娠胎盤(pán)及母血中呈高表達(dá)，而男性及正常未孕女性幾乎檢測(cè)不到［5］，隨著妊娠進(jìn)展其水平逐漸上升:妊娠早期水平最低，妊娠中期（15周后）開(kāi)始大幅度升高，妊娠晚期（28～30周）達(dá)高峰，之后明顯下降［6］。本研究為了排除由于孕周的不同導(dǎo)致的PlGF值不同，選用晚孕期孕婦。PlGF一方面通過(guò)自分泌方式促進(jìn)滋養(yǎng)細(xì)胞增殖分化，另一方面通過(guò)旁分泌方式調(diào)節(jié)胎盤(pán)血管形成和生理性重鑄，同時(shí)還可對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子起到協(xié)同作用，顯著提高其生物活性，促進(jìn)胎盤(pán)血管發(fā)展，維持妊娠過(guò)程中胎盤(pán)正常的血供和功能，使其適應(yīng)母體和胎兒發(fā)育的需要。Luttun等［7］應(yīng)用PlGF缺陷（PlGF－/－）小鼠的研究表明PlGF缺乏減少了血管新生。目前有觀點(diǎn)認(rèn)為是由于胎盤(pán)血管重鑄障礙致胎盤(pán)功能不良是子癇前期發(fā)病的重要因素［8］。也許可以這樣推測(cè)由于PlGF的減少導(dǎo)致胎盤(pán)重鑄障礙，胎盤(pán)血管發(fā)育受阻，胎盤(pán)淺著床，從而導(dǎo)致子癇前期。本文研究結(jié)果與文獻(xiàn)相似［5，9-12］，證實(shí)此種推測(cè)。

通過(guò)分析比較PlGF及臨床生化指標(biāo)與PE發(fā)病的關(guān)系發(fā)現(xiàn)白蛋白、血尿酸、肌酐、β2微球蛋白、24 h尿蛋白、PlGF與疾病的嚴(yán)重程度相關(guān)。De Vivo等［13］前瞻性研究得出PlGF和可溶性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子可能被用來(lái)作為標(biāo)記，用于預(yù)測(cè)PE。本研究發(fā)現(xiàn)PlGF診斷子癇前期靈敏度及特異度均較高，曲線下面積為 0.913，95% 可信區(qū)間為（0.829，0.998）。PlGF診斷子癇前期有顯著性意義。同時(shí)PlGF在截?cái)嘀档扔?07.25 ng/L時(shí)，靈敏度是91.7%，特異度82.4%，優(yōu)于血清尿酸。

有研究報(bào)道，妊娠期高血壓疾病時(shí)孕婦血清尿酸可預(yù)測(cè)先兆子癇的發(fā)生。用血清尿酸0.33 mmol/L作為切割值，尿酸診斷PE的敏感度為69%，特異度為51%［14］。血清 β2微球蛋白的升高可反映腎小球?yàn)V過(guò)功能受損或?yàn)V過(guò)負(fù)荷是否增加的情況，較血肌酐更加準(zhǔn)確。本研究表明β2微球蛋白與PE疾病顯著相關(guān)。

白蛋白水平在子癇前期重度組明顯降低，與正常組比較差異顯著。可能由于肝腎功能受損，合成減少，腎臟漏出過(guò)多及血液稀釋有關(guān)。研究顯示低蛋白血癥是重度PE臨床發(fā)病前的預(yù)警信息之一［15-16］。

由于PE病因不明確，病情發(fā)展迅速，有部分患者僅存在實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)異常，如低蛋白血癥，血尿酸、β2微球蛋白升高。如何建立一種子癇前期的早期預(yù)測(cè)和診斷方法，已成為子癇早期預(yù)防和治療的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。從本研究出發(fā)，首先可通過(guò)檢測(cè)PlGF值判斷病情，其次可以考慮聯(lián)合PlGF及臨床生化指標(biāo)如尿酸、β2微球蛋白等進(jìn)行預(yù)測(cè)PE的發(fā)生發(fā)展。進(jìn)一步研究可以擴(kuò)大樣本量，選取不同孕周孕婦，聯(lián)合檢測(cè)PlGF值和臨床生化指標(biāo)如尿酸、白蛋白，β2微球蛋白等，找到一條經(jīng)濟(jì)可行的提高診斷識(shí)別預(yù)防子癇前期的方法。

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