汪華蓉，余蕾，易發(fā)紅，何海霞（.重慶三峽中心醫(yī)院藥劑科，重慶市 404000；2.重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院臨床藥理室，重慶市 40006）

阿奇霉素（Azihromycin，AZ）[1]是大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，抗菌譜廣、半衰期長、組織濃度高，在臨床上可用于治療多種細(xì)菌、支原體、衣原體感染，且其具療效顯著、安全性和耐受性好等特點，受到患者的青睞。臨床上應(yīng)用有片劑、顆粒劑、膠囊和注射劑，國內(nèi)有多家藥廠生產(chǎn)膠囊或片劑。鑒于市售品牌較多，筆者選擇了市售國產(chǎn)5種阿奇霉素膠囊或片劑，以QLAZ廠生產(chǎn)的阿奇霉素膠囊為參比制劑，采用同一檢測方法，從人體血藥濃度和藥動學(xué)參數(shù)角度進(jìn)行了分析比較，考察其人體生物等效性，現(xiàn)報道如下。

1 材料

參比制劑:阿奇霉素膠囊（QLAZ廠，規(guī)格:每粒250 mg，批號:040400，批準(zhǔn)文號:國藥準(zhǔn)字H10970061）；受試制劑:阿奇霉素膠囊A（SCAZ廠，規(guī)格:每粒250 mg，批號:020301，批準(zhǔn)文號:（97）衛(wèi)藥準(zhǔn)字X-275-5號）、阿奇霉素膠囊B（HZAZ廠，規(guī)格:每粒250 mg，批號:040611，批準(zhǔn)文號:國藥準(zhǔn)字H10970148）、阿奇霉素膠囊C（BJAZ廠，規(guī)格:每粒250 mg，批號:040205，批準(zhǔn)文號:國藥準(zhǔn)字H10950065）、阿奇霉素片D（SHAZ廠，規(guī)格:每片250 mg，批號:050304，批準(zhǔn)文號:國藥準(zhǔn)字H20000477）、阿奇霉素片E（SJZAZ廠，規(guī)格:每片250 mg，批號:031103，批準(zhǔn)文號:國藥準(zhǔn)字H10980218）；阿奇霉素標(biāo)準(zhǔn)品（中國藥品生物制品檢定所出品，購于重慶市藥檢所，批號:130352-200203，規(guī)格:946 IU·mg－1）。

藤黃微球菌（編號28001，重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院感染科提供）[2，3]；蛋白胨（上海東海制藥廠）；牛肉浸膏（上海化學(xué)試劑站）；酵母浸膏（上海化學(xué)試劑站）；葡萄糖（重慶北碚化學(xué)試劑廠，分析純，批號:900905）；瓊脂（日本進(jìn)口分裝，上?；瘜W(xué)試劑站分裝廠，批號:20518）；水為蒸餾水。

2 方法

2.1 研究對象

男性健康志愿者，漢族，平均年齡（22.7±1.81）歲，平均體重（59.9±3.02）kg，平均身高（170.5±1.66）cm。試驗前所有受試者經(jīng)肝腎功能、血壓、心電圖檢查均正常。于充分了解試驗內(nèi)容后自愿簽署知情同意書。實施方案經(jīng)重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審批通過。

2.2 給藥方案及血樣采集

試驗前禁食12 h后，于次日晨8∶00時空腹吞服500 mg[2]前述QLAZ廠和其余5廠家生產(chǎn)的阿奇霉素膠囊或片劑（200 mL溫開水服藥）。服藥當(dāng)日統(tǒng)一進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)餐。受試期間禁止大量活動，禁止吸煙、飲酒及含酒精、咖啡因類飲料，試驗期間禁止一切非試驗藥物。于給藥后 0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、6.0、8.0、12.0、24.0、48.0、72、96.0、144 h時，抽取前臂靜脈血3.0 mL，分離血清，低溫（－20 ℃）保存，待測。文獻(xiàn)報道[2，3]，本品tmax≈2 h，t1/2≈48 h，根據(jù)2000年版《中國藥典》“藥物制劑生物利用度和生物等效性試驗指導(dǎo)原則”的要求，筆者在達(dá)峰時間前取樣3～4個點，在峰時間后取樣8～10個點，取樣持續(xù)到5個半衰期以上。

2.3 血清樣品檢測（微生物杯碟法）

2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)液的配制:準(zhǔn)確稱取阿奇霉素標(biāo)準(zhǔn)品，用無水乙醇溶解后加緩沖液（pH7.8）稀釋成1 mg·mL－1標(biāo)準(zhǔn)貯備液，置－40 ℃儲存?zhèn)溆谩?/p>

2.3.2 指示菌:選用藤黃微球菌[編號28001][2，3]。

2.3.3 培養(yǎng)基Ⅱ號[4]:蛋白胨6 g，牛肉浸膏1.5 g，酵母浸膏6 g，葡萄糖1 g，瓊脂20 g，蒸餾水1000 mL，調(diào)pH 7.8～8.0，在115℃滅菌30 min后備用。

2.3.4 測定方法:參照文獻(xiàn)[5]，將培養(yǎng)基Ⅱ號熔化后冷至約50℃，加入適量藤黃微球菌菌液，混勻，于超凈工作臺上倒入經(jīng)高壓滅菌的平皿中（12 mL/皿），冷凝后放入不銹鋼小杯，每個血樣分別加入2個小杯，同時另放2個小杯，內(nèi)加標(biāo)準(zhǔn)液。靜置相同時間后，置37℃孵育14～16 h，取出，以游標(biāo)卡尺測量抑菌圈直徑，按標(biāo)準(zhǔn)曲線計算血液標(biāo)本中的藥物濃度。

2.4 方法學(xué)驗證

2.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備:以正常人血清配制系列阿奇霉素標(biāo)準(zhǔn)液（濃度為2.4、1.2、0.6、0.3、0.15、0.075、0.038、0.019、0.009和0.005 μg·mL－1），組間距1∶2，中心濃度為0.1 μg·mL－1，用磷酸鹽緩沖液（pH7.8）和正常人血清各半作為稀釋液。測定抑菌圈，以血藥濃度的對數(shù)為縱座標(biāo)（Y），抑菌圈的直徑為橫標(biāo)（X），作直線回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程Y＝0.12657X－0.30464（r＝0.9988），結(jié)果表明，阿奇霉素血藥濃度在0.005～2.4 μg·mL－1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。本法最低檢測濃度為0.005 μg·mL－1。

2.4.2 回收率及精密度試驗:按照標(biāo)準(zhǔn)曲線制作方法，采用4種濃度的阿奇霉素標(biāo)準(zhǔn)液，各配制若干份，分別測定其抑菌圈，得出日內(nèi)相對標(biāo)準(zhǔn)差（RSD）和回收率（見表1）；并于日間按上述濃度測定方法計算出日間RSD和回收率。

2.4.3 凍融試驗:將含藥血清反復(fù)冷凍（－20℃）、溶解，1周內(nèi)測定4次，結(jié)果見表2。

3 結(jié)果

3.1 藥-時曲線

受試者單劑口服QLAZ廠和其余5廠家生產(chǎn)的阿奇霉素膠囊或片劑500 mg后，平均藥-時曲線見圖1。

3.2 數(shù)據(jù)處理

采用3p97計算機程序軟件，計算各個體的藥動學(xué)參數(shù)，cmax、tmax以實測值計算，AUC按梯形面積法計算。取值范圍0～144 h。6廠家生產(chǎn)的阿奇霉素制劑在人體內(nèi)的藥動學(xué)參數(shù)見表3。

4 討論

藥物制劑要產(chǎn)生最佳療效，其藥物活性成分應(yīng)當(dāng)在預(yù)期時間段內(nèi)釋放、吸收并被轉(zhuǎn)運到作用部位達(dá)到預(yù)期的有效濃度。大多數(shù)藥物是進(jìn)入血液循環(huán)后產(chǎn)生全身治療效果，作用部位的藥物濃度和血液中藥物濃度存在一定的比例關(guān)系，因此可以通過測定血液循環(huán)中的藥物濃度來獲得反映藥物體內(nèi)吸收程度和速度的主要藥動學(xué)參數(shù)，間接預(yù)測藥物制劑的臨床治療效果，以評價制劑的質(zhì)量。本研究血藥濃度藥-時曲線如圖1所示，SCAZ、HZAZ和SJZAZ廠藥物cmax分別為（0.38±0.13）、（1.07±0.53）和（1.24±0.75）μg·mL－1，明顯低于參比制劑的（1.69±0.53）μg·mL－1（P＜0.01）。按照此血藥濃度推測，則SCAZ、HZAZ和SJZAZ廠制劑臨床治療效果是不如QLAZ廠制劑的臨床治療效果，或不能達(dá)到有效治療效果。發(fā)生原因可能是各生產(chǎn)廠家藥物的理化性質(zhì)、劑型特征、所用輔料、制備工藝有所差異，值得調(diào)整制劑生產(chǎn)工藝等。

表1 精密度及回收率試驗結(jié)果（n＝6）Tab 1 Results of precision and recovery tests（n＝6）

表2 凍融穩(wěn)定性試驗結(jié)果（n＝4）Tab 2 Result of frozen-melt tests（n＝4）

圖1 健康受試者口服6種阿奇霉素制劑后的平均藥-時曲線Fig 1 Mean serum concentration-time curves of azihromycin in healthy volunteers after oral administration of azihromycin preparations

表3 6廠家生產(chǎn)的阿奇霉素制劑在人體內(nèi)的藥動學(xué)參數(shù)比較Tab 3 Comparison of the pharmacokinetics parameters of azihromycin preparations from 6 manufacturers in human body

生物利用度是反映藥物活性成分吸收進(jìn)入體內(nèi)的程度的指標(biāo)。目前，大家都認(rèn)識到相同活性成分的仿制產(chǎn)品要替代其他原創(chuàng)制劑進(jìn)入臨床使用時，應(yīng)與原創(chuàng)制劑有生物等效性，即生物利用度相近似。本研究結(jié)果表明，各生產(chǎn)廠家的生物等效性相差較大，提示各制劑使用后被吸收的速度和程度不一，可能對使用者的治療目的造成一定影響，值得生產(chǎn)廠家在制劑進(jìn)入市場前進(jìn)一步驗證其生物利用度。

[1]陳新謙，金有豫，湯 光主編.新編藥物學(xué)[M].第15版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2005:90.

[2]張 青，郭蓓寧，張嬰元.阿奇霉素臨床藥代動力學(xué)研究[J]. 中國臨床藥理學(xué)雜志，1996，12（2）:89.

[3]賈琳靜，喬海靈，張莉蓉，等.阿奇霉素顆粒劑的健康人體藥物動力學(xué)和相對生物利用度[J].河南醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2001，36（6）:712.

[4]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典（二部）[S].2000年版.北京:化學(xué)工業(yè)出版社，附錄ⅪA:81.

[5]張治錟編著.抗生素藥品檢驗[M].北京:人民衛(wèi)生出版社，1987:34.