王曉亮 ，李知新 ，王進(jìn)香 ，閆曉芹 ，周秀玲 ，宋權(quán)儒，周海寧，張玉玲，吳亞文，王 磊，張成蓮，張和平，楊春生

（1.寧夏動(dòng)物疾病預(yù)防控制中心，寧夏 銀川 750002；2.寧夏動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，寧夏 銀川 750002）

2009—2010年寧夏部分地區(qū)養(yǎng)殖戶分別從外省引進(jìn)不同數(shù)量的3月齡-2歲肉牛，經(jīng)長途販運(yùn)到達(dá)本地后1周內(nèi)發(fā)病，主要表現(xiàn)為咳嗽、關(guān)節(jié)炎，部分牛便血。采集病變肺臟，經(jīng)中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所進(jìn)行病原分離鑒定和PCR檢測，證實(shí)為牛傳染性支原體肺炎。為了摸清由本病在各地區(qū)引起的疫情和流行情況，本實(shí)驗(yàn)室采集我區(qū)發(fā)生的4起牛支原體肺炎的疫區(qū)及其周邊地區(qū)牛血清495份，羊血清46份進(jìn)行血清學(xué)調(diào)查。

1 材料與方法

1.1 血清樣本的采集

2009年3月—2010年11月，采集疫區(qū)牛血清298份，采集疫區(qū)周邊地區(qū)牛血清197份，羊血清46份。寧夏地區(qū)均未對相關(guān)動(dòng)物進(jìn)行牛支原體疫苗接種。

1.1.2 主要檢測試劑和方法

采用牛支原體間接ELISA試劑盒進(jìn)行檢測。比利時(shí)牛支原體肺炎間接ELISA抗體檢測試劑盒（批號:SMYC10I13）購自青島瑞爾生物技術(shù)有限公司，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

2 結(jié)果

2.1 外調(diào)牛與本地牛接觸后臨床發(fā)病情況

表1 引進(jìn)牛及農(nóng)戶自養(yǎng)牛一周內(nèi)臨床發(fā)病情況

由表1看出，外地染疫牛經(jīng)長途販運(yùn)引進(jìn)無疫區(qū)后，可在一周內(nèi)迅速發(fā)病，嚴(yán)重者引起死亡，臨床發(fā)病率為12.1%～95%，死亡率為2.6%～5.0%。由于當(dāng)?shù)嘏]有進(jìn)行牛支原體疫苗接種，因此，可在當(dāng)?shù)赝优Ｖg迅速傳播并引發(fā)死亡，臨床發(fā)病率為11.5%～100%不等，死亡率為1.0%～30%。由于疫區(qū)飼養(yǎng)隔離較好，因此在疫區(qū)外地區(qū)調(diào)查牛并未見臨床發(fā)病現(xiàn)象。

2.2 引進(jìn)牛進(jìn)入本地引發(fā)疫情后的抗體檢測

表2 引進(jìn)牛引發(fā)疫情后的ELISA檢測情況

引進(jìn)牛經(jīng)長途販運(yùn)后一周，除死亡牛外，對疫區(qū)牛只全群進(jìn)行血樣采集，ELISA檢測發(fā)現(xiàn)，引進(jìn)牛牛支原體血清抗體陽性率為78.9%～100%；農(nóng)戶原存欄牛與染疫牛同居飼養(yǎng)后，牛支原體抗體陽性率為24.2%～100%，表明陰性牛與陽性牛接觸后牛支原體可在群間迅速擴(kuò)散；疫區(qū)外牛只血清抗體檢測全部為陰性；同時(shí)還發(fā)現(xiàn)，當(dāng)?shù)鼐d羊與染疫牛同居后，牛支原體抗體檢測陽性率為16.7%和27.5%，表明當(dāng)?shù)鼐d羊可以感染牛支原體肺炎。

3 討論和分析

研究證明牛支原體是牛呼吸道疾病的主要病因，已成為北美和歐洲牛群中呼吸道疾病和多發(fā)性關(guān)節(jié)炎的重要病原。本調(diào)查采用牛支原體間接ELISA檢測試劑盒對寧夏發(fā)生4起疫情的地區(qū)及其周邊地區(qū)養(yǎng)牛場進(jìn)行的血清學(xué)調(diào)查顯示，外調(diào)牛經(jīng)長途運(yùn)輸1周后臨床發(fā)病率平均為49.2%，死亡率平均為3.7%；本地與陽性牛接觸1周后臨床發(fā)病率平均為43.3%，死亡率平均為13.6%。這表明疫區(qū)帶菌牛經(jīng)長途販運(yùn)后進(jìn)入非疫區(qū)，不但能在短時(shí)間內(nèi)迅速發(fā)病，而且能夠引起與其有接觸的牛發(fā)病，如若不加控制，死亡數(shù)和感染數(shù)會急劇增加。

本調(diào)查結(jié)果顯示，與染疫牛同居的綿羊，經(jīng)檢測有部分為隱形感染。此帶菌羊與其他羊或牛同居后是否會造成感染需作進(jìn)一步試驗(yàn)。

關(guān)于該病的防控措施，最有效的手段就是對引進(jìn)牛進(jìn)行血清學(xué)篩查。目前，加拿大、瑞士、比利時(shí)已經(jīng)成功生產(chǎn)檢測牛支原體抗體的試劑盒，在臨床診斷上發(fā)揮了重要作用。我國僅建立了相關(guān)分子生物學(xué)的診斷方法[1-3]，還未見有商品化的ELISA診斷試劑。臨床上，發(fā)現(xiàn)感染牛應(yīng)立即隔離。對癥狀輕微的牛臨床上可以使用對支原體敏感的藥物進(jìn)行治療，如環(huán)丙沙星、泰妙菌素等。由于在調(diào)運(yùn)牛時(shí)往往忽視了對牛支原體病檢測，長途運(yùn)輸?shù)葢?yīng)急因素可導(dǎo)致在新的地區(qū)大量發(fā)病，因此，建議養(yǎng)殖戶在引進(jìn)牛時(shí)，應(yīng)隔離飼養(yǎng)并逐頭采血進(jìn)行血清抗體檢測。對血清抗體陽性牛，應(yīng)立即實(shí)行更為嚴(yán)格的隔離措施，密切觀察臨床表現(xiàn)，如若有明顯的臨癥癥狀，建議立即撲殺并無害化處理，決不能將發(fā)病牛進(jìn)行交易，防止引起更大范圍的流行。

牛支原體引起的牛傳染性支原體肺炎已經(jīng)成為今年來嚴(yán)重威脅我國肉牛養(yǎng)殖安全的一種傳染病，但我國對該病的防控措施和手段還很有限。臨床準(zhǔn)確、快速的診斷和牛的調(diào)運(yùn)控制是目前有效防控該病的主要手段。

[1]李大偉，張彥明，黃燦平，等.應(yīng)用巢式PCR方法檢測牛支原體肺炎[J].中國動(dòng)物檢疫，2010，27（4）:28-29.

[2]石磊，龔瑞，尹爭艷，等.肉牛傳染性牛支原體肺炎流行的診斷[J].華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，27（5）:629-633.

[3]李媛，董慧，張美晶，等.牛霉形體PCR檢測方法的建立[J].中國獸醫(yī)科學(xué)，2009，39（5）:416-420.