文│侯群（石河子大學動物科技學院、青格達湖自然保護區(qū)管理站）馬長賓 陳文武 崔蕾 劉向鵬 吳挺（新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團第六師五家渠市畜牧獸醫(yī)工作站）胡少華（青格達湖自然保護區(qū)管理站）李巖（石河子大學動物科技學院、新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團畜牧獸醫(yī)工作總站）

青格達湖濕地野鳥中AIV和NDV監(jiān)測

文│侯群（石河子大學動物科技學院、青格達湖自然保護區(qū)管理站）馬長賓 陳文武 崔蕾 劉向鵬 吳挺（新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團第六師五家渠市畜牧獸醫(yī)工作站）胡少華（青格達湖自然保護區(qū)管理站）李巖（石河子大學動物科技學院、新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團畜牧獸醫(yī)工作總站）

新城疫和禽流感均是由病毒感染引起的家養(yǎng)和野生禽類的急性高度接觸性傳染病。野鳥尤其是野生水鳥是禽流感病毒（AIV）和新城疫病毒（NDV）的天然宿主，并在禽流感和新城疫傳播過程中起到一定作用，這些觀點已經(jīng)被大多數(shù)學者認可。

青格達湖自然保護區(qū)海拔504米，位于新疆維吾爾自治區(qū)五家渠市南郊，南距烏魯木齊市32千米，東南距米泉區(qū)18千米，西南距昌吉市19千米，處于烏昌經(jīng)濟帶的腹心地帶，因其對烏魯木齊市及周邊地區(qū)氣候起著重要的調(diào)節(jié)作用，被譽為“天然加濕器”和“首府之腎”。青格達湖濕地自然保護區(qū)是根據(jù)《中華人民共和國自然保護區(qū)條例》第二章第十條第二款珍稀、瀕危野生動植物物種的天然集中分布區(qū)域應(yīng)當建立自然保護區(qū)的規(guī)定，于2002年12月經(jīng)新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團批準列入的第一個兵團范圍內(nèi)省級自然保護區(qū)。

青格達湖濕地面積23.25平方千米，核心區(qū)7.96平方千米，占保護區(qū)總面積的34.24%，主要為鳥類棲息地；緩沖區(qū)位于核心區(qū)的東部，面積14.49平方千米，占保護區(qū)總面積的62.32%，主要為灌木林和旅游經(jīng)營水域；試驗區(qū)位于主壩北部，面積0.8平方千米，占保護區(qū)總面積的3.44%，主要是自然及人文景觀。

青格達湖自然保護區(qū)及周邊區(qū)域鳥類約225種，分屬18目53科124屬，約占新疆鳥類種數(shù)的48%，約為全國鳥類種數(shù)的19%，可見青格達湖自然保護區(qū)及周邊區(qū)域鳥類資源相當豐富。其中，國家Ⅰ級重點保護物種5種分別是大鴇、黑鸛、金雕、玉帶海雕、白尾海雕，Ⅱ級重點保護物種38種。在青格達湖自然保護區(qū)野生鳥類的優(yōu)勢種有：大雁、鸕鶿、鷸類、紫翅椋鳥、燕類、野鴨、鷗類、黑鳶、雀類。每年的4～5月、10～11月是鳥類遷徙的主要時間。3條大的國際遷徙路線（通道）經(jīng)過青格達湖自然保護區(qū)：一是西亞—中東—東非路線，二是西伯利亞—中亞—南亞路線，三是北極苔原—亞洲—大洋洲路線。這說明青格達湖自然保護區(qū)的地理位置比較獨特，是國際3大遷徙路線的一個節(jié)點，重要作用不言而喻。

青格達湖自然保護區(qū)水草豐茂，鳥類繁多，生物多樣性豐富，是國際候鳥遷徙的重要驛站，也是新疆鳥類的重要棲息地。年過鳥量達20萬只，常年棲息鳥類2萬余只。然而，對于這些野鳥，目前缺乏有效的免疫與疫病監(jiān)控措施。鑒于此，筆者對青格達湖濕地野鳥進行了禽流感和新城疫的流行病學監(jiān)測和調(diào)查，以便為有效控制或預(yù)防禽流感和新城疫提供科學依據(jù)。

一、材料與方法

1.材料。

（1）試劑。檢測禽流感、新城疫病毒抗體的血凝和血凝抑制（HA和HI）試驗診斷試劑，購自中國農(nóng)業(yè)科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所。

（2）試劑盒。檢測禽流感通用型、新城疫通用型。

2.方法。

（1）樣品的采集及處理。于2014年4月至2015年3月，對青格達湖濕地保護站救治痊愈的5只野生鳥類進行了樣品采集，樣品包括野鳥的血樣和喉肛棉拭樣品。其中，蓑羽鶴（雙側(cè)翅受傷）、大麻鳽（左側(cè)翅受傷）、貓頭鷹（幼鳥）、紅嘴鷗（爪受傷）、鵜鶘（喙受傷）各1只。

（2）血凝（HA）和血凝抑制（HI）試驗。HA和HI試驗參照GB/T18936-2003《高致病性禽流感診斷技術(shù)》和GB/T16550-2008《新城疫診斷技術(shù)》進行。

（3）RT-PCR操作程序。按照禽流感病毒通用型RT-PCR和新城疫病毒通用型RT-PCR檢測試劑盒說明書，并參照NY/T772-2004《禽流感病毒RT-PCR試驗方法》進行。

二、結(jié)果

1.野鳥血清中AIV陽性抗體的檢測結(jié)果。經(jīng)HI試驗對不同亞型AIV抗體（H5/H7）的檢測，在受檢的5種野鳥的5份血樣AIV抗體檢測結(jié)果均為陰性。

2.野鳥血清中新城疫病毒陽性抗體的檢測結(jié)果。新城疫HI抗體效價均小于4lg2，血清抗體陽性率為0，說明所檢測的野鳥血清中無新城疫病毒抗體。

3.喉肛棉拭樣品AI、新城疫病毒的檢測結(jié)果。采用RT-PCR檢測方法對野鳥的喉肛棉拭樣品進行H5和H7亞型AIV的病原學檢測，結(jié)果均為陰性；采用通用型RT-PCR試劑盒對所采集野鳥的喉肛棉拭樣品進行新城疫病毒的病原學檢測，結(jié)果均為陰性。

三、討論

1.本次通過HI和RT-PCR方法對在青格達湖濕地采集的5種野生鳥類樣品進行病毒血清抗體和病原進行檢測，檢測結(jié)果均為陰性，說明所檢測的5種野生鳥類并未攜帶禽流感和新城疫病毒。這一檢測結(jié)果與孫泉云等和成進等的檢查結(jié)果不一致，其原因可能是捕獲的野鳥為不帶毒的狀態(tài)；二是采樣的數(shù)量較少，這有待今后持續(xù)監(jiān)測分析。

2.雖然本次調(diào)查未發(fā)現(xiàn)新疆青格達湖濕地野生鳥類感染禽流感和新城疫病毒感染，但存在野生鳥類與水網(wǎng)密集區(qū)家禽（尤其是鴨）接觸，有可能在家禽與野禽之間的AIV、NDV循環(huán)，2013年周邊地區(qū)就發(fā)現(xiàn)了家禽AIV，因而野生鳥類在AIV、NDV流行病學和生態(tài)演化中的作用，需要持續(xù)的動態(tài)監(jiān)測和研究。

3.AIV感染的禽類宿主非常廣泛。國內(nèi)外學者現(xiàn)已證實AIV的所有血凝素（HA）和神經(jīng)氨酸酶（NA）亞型（H1～H16和N1～N9）和大多數(shù)HA/NA組合在野生鳥類中儲存。眾所周知，H5和H7亞型是屬于高致病性禽流感的范疇，若沒有任何癥狀或病情的野鳥攜帶高致病性AIV無疑將對本地區(qū)家禽養(yǎng)殖環(huán)境構(gòu)成潛在的威脅和隱患。鑒于此，本次主要對H5和H7兩個高致病性禽流感亞型進行了流行病學調(diào)查，然而要想弄清楚本地區(qū)野生鳥類感染AIV不同HA亞型的范圍是否在不斷擴大，表明導(dǎo)致基因重組和置換的幾率是否也在增加，需要對本地區(qū)有關(guān)野生鳥類AIV進行持續(xù)監(jiān)測，以便獲得長期的、大量的、規(guī)律性數(shù)據(jù)。

2014年第六師五家渠市科技計劃，

課題編號：1419