中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所

農(nóng)業(yè)部飼料生物技術(shù)重點實驗室 王建紅 刁其玉＊許先查 屠 焰 張乃鋒 符運勤

犢牛是高產(chǎn)奶牛的未來，犢牛的健康是優(yōu)質(zhì)奶牛培育的重要環(huán)節(jié)之一。在現(xiàn)代工廠化和集約化發(fā)展要求下，如何保證犢牛的生長發(fā)育健康，以便獲得犢牛飼養(yǎng)經(jīng)濟效益和生產(chǎn)能力的最大化，已成為反芻動物營養(yǎng)研究的焦點問題。而氨基酸因其重要的生理作用，一直是動物營養(yǎng)研究的熱點。目前國內(nèi)對犢牛的氨基酸營養(yǎng)研究較少，而國外對犢牛氨基酸需要量的研究也限于只飼喂代乳品，而不補飼開食料和羊草（Gerrits等，1997；van Weerden 和 Huisman，1985；Williams 和 Hewitt，1979）。但是這些研究結(jié)果并不適用于我國犢牛飼養(yǎng)的現(xiàn)狀。因此，急需對我國犢牛的氨基酸需要進行深入研究，確定適用于我國飼養(yǎng)條件下犢牛氨基酸的需要量。本試驗在保證賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸比例適宜的情況下研究不同的賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸含量對犢牛的生長性能和血清生化指標的影響，確定最佳的氨基酸需要量，為犢牛的氨基酸營養(yǎng)提供一定的試驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計 試驗共設(shè)3個處理組，分別飼喂適宜賴氨酸、蛋氨酸和蘇氨酸比例 （王建紅等，2010），但含量不同的3種犢牛代乳品，記為A、B和C組。具體水平見表1。3組粗蛋白質(zhì)水平均為22%。選擇18頭新生荷斯坦犢牛，公母各半，按照體重和出生時間相近原則分到3個處理組中，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)1頭。

表1 處理組代乳品氨基酸水平

1.2 試驗日糧 各處理組犢牛飼喂代乳品、開食料及羊草。其中代乳品營養(yǎng)水平見表2；開食料主要由玉米、豆粕、麩皮組成，開食料及羊草的營養(yǎng)水平見表3。

表2 各處理組代乳品營養(yǎng)成分分析（風(fēng)干基礎(chǔ)）

表3 開食料和羊草的營養(yǎng)成分（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 飼養(yǎng)管理 本試驗在北京市大興區(qū)滄達福良種奶牛繁育中心進行。每組犢牛分圈飼養(yǎng)，每頭犢牛占地約3 m2，保證牛舍的衛(wèi)生。試驗犢牛出生后2 h內(nèi)飼喂初乳，直至1周齡，日飼喂量為初生重的8%。各組犢牛8～13日齡為代乳品過渡期，每天分 3 次飼喂（08∶30、14∶00 和 20∶30），過渡期內(nèi)飼喂代乳品與初乳的比例逐漸由1∶3增加到3:1。犢牛從14日齡開始進入正試期。代乳品用煮沸后冷卻到50～60℃的熱水，按干物質(zhì)占12.5%的比例沖泡成乳液，40℃左右可飼喂犢牛。日飼喂量為犢牛體重的11%，并隨犢牛體重增長及時調(diào)整。開食料和羊草分別從第4周和第5周開始自由采食，并自由飲水。

1.4 樣品采集與測定指標

1.4.1 生長性能 稱量犢牛 0、2、4、6、8周齡體重，同時測定其體尺指標（包括犢牛體高、體斜長、胸圍），所有測定指標均在清晨第一次飼喂前空腹進行。記錄犢牛每天代乳品、開食料和羊草的攝入量，計算飼料轉(zhuǎn)化率，公式為：飼料轉(zhuǎn)化率=采食量（kg）/體增重（kg）。

1.4.2 糞便評分 每天于晨飼前觀察試驗犢牛的糞便情況并進行評分。評分標準（Hill等，2007）：1～5分制，1分糞便成型，5分為嚴重腹瀉。

1.4.3 血清樣品采集與測定 于犢牛0、2、4、6、8周齡晨飼前頸靜脈采血約10 mL，傾斜放置至析出血清，3000 r/min離心10 min，收集血清于試管中，在-20°C下冷藏待測。血清樣品在北京市海淀醫(yī)院檢驗科生化室，利用全自動生化分析儀（奧林巴斯 Au-600，日本）測定總蛋白（TP）、白蛋白（Alb）、球 蛋 白 （Glb）、 尿 素 氮 （BUN）及 葡 萄 糖（Glu）濃度。

1.5 統(tǒng)計方法 體重體尺以及血清生化指標應(yīng)用SAS 8.0統(tǒng)計軟件中關(guān)于重復(fù)測量數(shù)據(jù)的MIXED模型進行分析。采食量、飼料轉(zhuǎn)化率以及糞便評分指標采用ANOVA分析方法。

2 試驗結(jié)果

2.1 賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸水平對犢牛生長性能的影響 犢牛生長試驗持續(xù)8周，賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸水平對犢牛生長性能的影響見表4、表5及圖1。各處理組間犢牛的初始體重和體尺均無顯著差異（P＞0.05），隨著周齡的增長呈線性和二次曲線增加趨勢（P＜0.05），但胸圍除外（呈三次曲線關(guān)系）。日糧和日糧與周齡的交互作用對各階段犢牛的體重和體尺指標均無顯著差異 （P＞0.05）。

從表5可以看出，不同處理組對犢牛全期代乳粉、開食料、羊草的總采食量均無顯著差異（P＞0.05）。飼料轉(zhuǎn)化率C組最低，A組最高，統(tǒng)計分析差異顯著（P ＜ 0.05）。

由圖1可知，隨周齡的增加，各處理組犢牛的糞便評分下降，6周齡后又上升，但并不呈現(xiàn)顯著的二次曲線關(guān)系（P＞0.05），3周齡后糞便基本正常，各處理組犢牛的糞便評分差異不顯著 （P＞0.05）。

表4 不同處理水平對犢牛體重和體尺的影響

表5 不同處理水平對犢牛采食量和飼料轉(zhuǎn)化效率的影響

圖1 不同處理水平對不同周齡犢牛糞便評分的影響

2.2 賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸水平對犢牛血清生化指標的影響 見表6。由表6可以看出，不同處理組犢牛的血清白蛋白含量出現(xiàn)顯著差異，C組最高，A組最低，且白蛋白含量隨著日糧中賴、蛋、蘇氨酸含量的增加呈現(xiàn)上升趨勢（P=0.0747）。除白蛋白外，其他各項血清代謝指標均不受日糧賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸含量的影響（P＞0.05），但會隨周齡的變化呈現(xiàn)一次、二次或三次曲線關(guān)系（P＜0.05）。日糧與周齡的交互作用對血清各項代謝指標均無顯著影響 （P＞0.05）。在0～2周齡期間，A和B兩組犢牛的總蛋白、白蛋白和球蛋白含量均下降，而C組稍有增加。C組葡萄糖含量最高，尿素氮含量最低（P＞0.05）。

3 討論

3.1 賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸水平對犢牛生長性能的影響 從表4可以看出，犢牛的體重和體尺的增長變化在4周齡時都會出現(xiàn)一個拐點，即從4周齡后其生長速度開始加快，這可能是因為犢牛從4周齡開始補飼開食料，采食量增加促進了犢牛的生長發(fā)育。Hill等（2007）向代乳品中添加賴氨酸和蛋氨酸后發(fā)現(xiàn)并沒有顯著增加犢牛對開食料的攝入量，這與本試驗開食料的采食量不受賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸含量影響的研究結(jié)果一致。羊草從5周齡開始自由采食，到試驗結(jié)束時共3周時間，這可能導(dǎo)致了處理間差異不顯著。Hill等（2008）研究表明，代乳品中添加賴氨酸和蛋氨酸可以顯著提高飼料轉(zhuǎn)化率，但是代乳品中蘇氨酸含量并不影響飼料轉(zhuǎn)化率。本試驗飼喂高賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸代乳品的犢牛，其體重的增加以及總采食量在數(shù)值上最高，飼料轉(zhuǎn)化率也顯著高于其他兩組，表明2.82%的賴氨酸、0.84%的蛋氨酸和1.82%的蘇氨酸更能有效地促進犢牛的生長。

從圖1可以看出，從3周齡開始，犢牛的糞便開始趨于正常。這與李輝等（2008）的研究結(jié)果一致。表明3周齡后，犢牛胃腸道發(fā)育逐漸完善，抵抗外界環(huán)境變化的能力得到增強。6周齡后糞便又開始變稀，可能是由于6周齡后犢牛適應(yīng)了開食料，采食大大增加，超過了犢牛的消化能力，使得犢牛出現(xiàn)輕度的拉稀糞。

表6 不同處理水平對犢牛血清生化指標的影響

3.2 賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸水平對犢牛血清生化指標的影響 Bartlett等（2006）和 Swenson等（1993）研究發(fā)現(xiàn)，蛋白營養(yǎng)不良會導(dǎo)致血清蛋白含量降低。本試驗高氨基酸含量組犢牛血清的白蛋白含量顯著高于低氨基酸含量組且隨著氨基酸含量的增加直線增加，表明賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸含量分別為2.81%、0.83%和1.82%時更能夠滿足犢牛的營養(yǎng)需要。0～2周齡犢牛只飼喂代乳品期間，A和B兩組犢牛的血清蛋白含量在數(shù)值上都有明顯的降低，而C組3個血清蛋白指標卻均有所上升，表明高賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸含量的代乳品才可以滿足剛出生2周的犢牛的營養(yǎng)需要。Daniels等（2008）研究認為，犢牛采食開食料后會促進其瘤胃的發(fā)育，血糖含量也會隨著瘤胃功能的完善而逐漸降低。這與本試驗的結(jié)果并不相吻合，本試驗犢牛血糖從4周齡開始是逐步升高的，可能原因是犢牛瘤胃功能還沒發(fā)育完善，因此隨著開食料采食量的增加，犢牛的營養(yǎng)水平攝入量增加，導(dǎo)致了血糖濃度的逐步上升。血清尿素氮是反應(yīng)氨基酸代謝的一個很直觀的指標，本試驗高氨基酸含量組的血清尿素氮含量低于其他兩組，表明飼喂高氨基酸含量組的犢牛，其體內(nèi)氨基酸代謝狀況最好。

4 結(jié)論

4.1 代乳品中高賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸含量可以顯著降低犢牛的飼料轉(zhuǎn)化率，但對犢牛的采食量以及體重和體尺指標無顯著影響。

4.2 血清白蛋白受代乳品中賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸含量的影響顯著，且隨著氨基酸含量的升高而升高。

4.3 周齡對犢牛血清中總蛋白、球蛋白、葡萄糖和血清尿素氮的影響顯著。

[1]李輝，刁其玉，張乃鋒，等.不同蛋白水平對犢牛消化代謝及血清生化指標的影響[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，41（4）：1219 ～ 1226.

[2]王建紅，刁其玉，許先查，等.不同生理階段犢牛賴、蛋、蘇氨酸平衡模式研究[J].飼料工業(yè)，2010，31（19）：39 ～ 42.

[3]Bartlett K S，McKeith F K，VandeHaar M J，et al.Growth and body composition of dairy calves fed milk replacers containing different amounts of protein at two feeding rates[J].J Anim Sci，2006，84：1454 ～ 1467.

[4]Daniels K M，Hill S R，Knowlton K F，et al.Akers.Effects of milk replacer composition on selected blood metabolites and hormones in preweaned Holstein heifers[J].J Dairy Sci，2008，91：2628 ～ 2640.

[5]Gerrits W J J，F(xiàn)rance J，Dijkstra J，et al.Evaluation of a model intergrating protein and energy metabolism in preruminant calves[J].J Nutr，1997，127：1243～1252.

[6]Hill T M，Aldrich J M，Schlotterbeck R L，et al.G.Bateman II.Amino acids，fatty acids，and fat sources for calf milk replacers[J].The Professional Animal Scientist，2007，23：401 ～ 408.

[7]Hill T M，H G.Bateman II，Aldrich J M，et al.Optimal concentration of lysine，methionine，and threonine in milk replacers for calves less than five weeks of age[J].J Dairy Sci，2008，91：2433 ～ 2442.

[8]Swenson M J.Physiological properties and cellular and chemical constituents of blood[A].in Duke’s Physiology of Domestic Animals.11thed[C].Cornell Univ Press，Ithaca，N Y，1993：41 ～ 43.

[9]van Weerden E，J J.Huisman.Amino acid requirement of the young veal calf[J].J Anim Physiol Anim Nutr（Berl），1985，53：232 ～ 244.

[10]Williams A P，Hewitt D.The amino acid requirements of the preruminant calf[J].Br J Nutr，1979，41：311 ～ 318.