周春鳳 （山東綠都安特動物藥業(yè)有限公司 濱州 256600）

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高效液相色譜儀使用中應注意的幾點問題

周春鳳 （山東綠都安特動物藥業(yè)有限公司 濱州 256600）

高效液相色譜儀作為獸藥檢驗中必備的精密儀器設備之一，因其可信度強，精確度高，在獸藥的定性和定量分析中應用越來越廣泛，隨著新藥典的頒布，很多種獸藥的檢驗項目，如鑒別、含量等都改成了高效液相色譜法。本實驗室所使用的是美國實驗儀器公司生產的Laballiance高效液相色譜儀，現就這幾年來的工作實踐，論述一下高效液相色譜儀使用中應注意的幾點問題。

1 熟悉設備

完全的了解設備可以避免因操作失誤而導致儀器損壞，有利于對儀器進行保養(yǎng)，高效液相重在保養(yǎng)。新購入設備，廠家的技術人員負責進行安裝、調試，這時候，負責高效液相檢驗的化驗員最好選擇一種藥物，進行完整的演練，這樣印象深刻，省得以后的很多不確信。另外，最好在調試的時候由化驗員自己重新安裝一下工作站，因為在以后的工作中可能會損壞工作站，到時候再打電話咨詢就很難說得明白了，并且最好完整記錄下安裝的步驟。設備的安裝調試說明書讀至少3遍才能有所收獲，有所悟，這也要在非常熟悉實驗步驟和設備的前提下，所以就不如及早多費心做的好。

2 設備易出現的問題

高效液相色譜儀主要由四大部分組成：柱溫箱(包括進樣閥)、高壓輸液泵、檢測器、工作站。（1）柱溫箱及進樣閥容易出現的問題是：溫控儀失靈，不能正確控制柱溫箱的溫度，這時只要更換一下溫控儀就可以了，溫控儀只在各樣品系統(tǒng)適用性試驗中有溫控要求時應用，如果無要求，就不必開啟；漏液，如發(fā)現對照品和樣品的出峰時間都不規(guī)律，而且每次的出峰面積也差別很大，根本無法對樣品進行定性和定量，這時候需要檢查色譜柱和各金屬細管的連接處，可能是連接處的塑料套因連接時未按要求而變形了，因其一旦變形就沒法修復，所以換一個新的，按要求套上即可。（2）高壓輸液泵容易出現的問題是：①壓力升不上去：檢查一下桌面上是否有漏下的液滴，如果有擰緊漏液處即可。②壓力過高：看一下抽取流動相的塑料管里是否有氣泡，如果有，則按一下Stop，這時候千萬別抽氣泡，等壓力降下來，最好到0Psi，這時候抽出氣泡。如果在過高的壓力下抽氣泡，后果會非常嚴重，流通池會被鼓破，無法分析樣品，并且會給你帶來很多困惑，當然如果有經驗的話會及時發(fā)現，因為流通池破了后會流出藍色的墨水樣的液體。（3）檢測器容易出現的問題：①流通池：以上已經提過了，如果流通池破了，則需要及時更換。②氘燈：氘燈的壽命一般為2000h，如果檢測器打不開了，則說明氘燈超過其使用期限，需要更換了。在日常檢測中，一般在進樣品之前開啟檢測器，樣品分析完畢，及時關閉檢測器，這樣可以延長其使用年限，避免不必要的浪費。（4）工作站容易出現的問題：安裝工作站的電腦一般不要進行其他的工作，一旦出現問題，則需重新安裝。

3 正確的實驗步驟

實驗步驟包括樣品的處理和流動相的配制。（1）樣品的配制：嚴格按照樣品質量標準配制，樣品最好現配先做，不要擱置，以防樣品分解，導致含量變小。（2）流動相的配制：流動相最好現配先用，尤其含鹽量高的流動相。流動相的抽濾需要注意：如果流動相中含有機溶劑，則需要用有機系濾膜，若使用水系濾膜，則濾膜會被溶解入流動相，流動相只能廢掉。如果流動相不含有機溶劑則需要用水系濾膜，若用有機系濾膜，則再高的壓力也抽濾不下來。同一批樣品一定要用同一批流動相。流動相配制好后，要先抽濾，再超聲。

4 其他應注意的問題

（1）進樣針：進樣針一定要用專用的平頭針，千萬不能用普通的斜面針頭。（2）進樣閥的沖洗：樣品分析完后要沖洗進樣閥，避免殘留物影響下一次分析。

高效液相色譜儀屬于精密儀器設備，未經過嚴格培訓的人員不要使用。操作時一定要嚴格按照實驗步驟和儀器設備操作規(guī)程進行。

（2010–12–06）

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1007-1733(2011)03-0051-01