劉利萍，陳 潔 ，李寶園，解 謙

(1.山西大同大學(xué)化學(xué)與化工學(xué)院，山西大同 037009;2.山西大同大學(xué)農(nóng)學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，山西大同 037009)

黃芪的主要活性成份為黃酮、多糖、三萜皂苷、氨基酸、多種微量元素等，有增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、保肝、利尿、抗衰老、抗應(yīng)激、降壓和較廣泛的抗菌作用，能消除實(shí)驗(yàn)性腎炎蛋白尿，增強(qiáng)心肌收縮力，調(diào)節(jié)血糖含量。黃芪不僅能擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，改善心肌供血，提高免疫功能，而且能夠延緩細(xì)胞衰老的進(jìn)程。黃芪保健酒是保健酒中的一支，它兼具酒的屬性和保健功效，我們以黃芪、紅棗、黨參、甘草、白術(shù)等為原料，以食用酒為酒基浸泡，經(jīng)勾兌調(diào)味而成。我們從黃芪綜合利用角度出發(fā)，通過對(duì)黃芪保健酒有效成分的研究，測(cè)定黃芪保健酒中有效成分黃酮、皂苷、多糖、氨基酸以及微量元素的含量，然后根據(jù)這些有效成分的功效，確定黃芪保健酒的保健功效和實(shí)用價(jià)值[1]。

1 材料和方法

1.1 黃芪保健酒的原料

黃芪、黨參、紅棗、甘草、白術(shù)，購自大同市老藥工;白酒(梨花春酒)。

1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器

蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品、皂苷標(biāo)準(zhǔn)品、葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品、纖維素酶、香草醛(分析純)、苯酚、氨基酸(sigma公司提供)。BS-223S電子天平 (塞多利斯科學(xué)儀器有限公司)、紫外分光光度計(jì) SP-754、美國(guó)貝克曼6300氨基酸自動(dòng)分析儀、AAS-6000型原子吸收分光光度計(jì)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1)黃酮含量測(cè)定采用NaNO2-Al（NO3)3比色法。原理是先用 NaNO2還原黃酮類化合物，再加入Al（NO3)3絡(luò)合，最后再加入NaOH溶液顯色，產(chǎn)生紅色化合物進(jìn)行比色測(cè)定[2]。

2)皂苷含量測(cè)定采用的是香草醛 -硫酸法。原理是使羧基脫水，增加雙鍵結(jié)構(gòu)，再經(jīng)雙鍵位移、雙分子縮合等反應(yīng)生成共軛雙鍵系統(tǒng)，又在酸作用下形成陽碳離子鹽而顯色，于538 nm處有最大光吸收值，而顯色程度即吸收值與皂苷的含量呈線性關(guān)系，因此可以利用香草醛-硫酸比色的方法來測(cè)定溶液皂苷的含量[3]。

3)多糖含量測(cè)定采用的是苯酚-硫酸法。其原理是在適宜的溫度下多糖與濃硫酸發(fā)生水解，產(chǎn)生單糖，并立刻脫去1分子水生成糠醛衍生物，該衍生物在強(qiáng)酸環(huán)境下與苯酚發(fā)生顯色反應(yīng)，生成橙色物質(zhì)，在波長(zhǎng) 490 nm處以及一定濃度范圍內(nèi)，其吸光度A值與糖濃度 c呈現(xiàn)線性關(guān)系，進(jìn)而可用比色法測(cè)定其含量[4]。

4)氨基酸含量的測(cè)定采用氨基酸自動(dòng)分析儀。其原理主要是利用離子交換樹脂，其與不同的氨基酸有不同的反應(yīng)，經(jīng)過緩沖液的洗脫，可以將不同的氨基酸得以分離。測(cè)定方法按照氨基酸自動(dòng)分析儀標(biāo)準(zhǔn)操作過程操作[5]。

5)微量元素含量的測(cè)定采用原子吸收分光光度計(jì)。測(cè)定方法按照原子吸收分光光度計(jì)標(biāo)準(zhǔn)操作過程操作[6]。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 黃酮的含量

以蘆丁濃度c為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)得標(biāo)準(zhǔn)曲線 (見圖1)，并得回歸方程A=0.011 6 c-0.000 3，R=0.999 6。將測(cè)出的樣品液的吸光度A代入回歸方程，計(jì)算出黃酮的含量為1.856mg/g。

圖1 黃酮標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.2 皂苷的含量

以皂苷濃度c為橫坐標(biāo)，吸光值A(chǔ)為縱坐標(biāo)，制出標(biāo)準(zhǔn)曲線(見圖2)，得回歸方程:A=2.580 0 c+0.006 9，R=0.996 7。將測(cè)出的樣品液的吸光值A(chǔ)代入回歸方程，計(jì)算出皂苷的含量為0.835 0 mg/g。

圖2 皂苷標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.3 多糖的含量

以葡萄糖濃度c為橫坐標(biāo)，吸光值A(chǔ)為縱坐標(biāo)，作標(biāo)準(zhǔn)曲線(見圖3)，得回歸方程為A=3.512 0 c+0.035 7，R=0.999 1。將測(cè)出的樣品的吸光值代入回歸方程，計(jì)算出多糖的含量為2.178 0 mg/g。

圖3 多糖標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.4 氨基酸的含量

實(shí)驗(yàn)測(cè)得黃芪保健酒中共有20種氨基酸，其中包括8種人體必需氨基酸，見表1。

表1 黃芪保健酒中氨基酸的種類和含量/%

2.5 微量元素的含量

實(shí)驗(yàn)測(cè)得黃芪保健酒中共有10種微量元素，其中鈣和鎂的含量最高，鈷和鎳的含量最少，見表2。

表2 黃芪保健酒中微量元素的種類和含量/(μg·g-1)

3 討論

經(jīng)過實(shí)驗(yàn)測(cè)定，黃芪保健酒中含有豐富的黃酮類、皂苷類、多糖類化合物。這3類主要的有效成分在很多方面發(fā)揮著作用，例如抗氧化、抑菌抑病毒、提高免疫力、調(diào)節(jié)心肌功能、延緩細(xì)胞衰老等。它們又分別還有獨(dú)特的功能，如:黃酮類是重要的功能食品添加劑、天然甜味劑、天然色素;多糖類可以降低血糖，改善心悸、失眠、精神疲乏癥狀等;皂苷類可促進(jìn)肝細(xì)胞白蛋白合成，抑制間質(zhì)細(xì)胞合成，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬功能，誘導(dǎo)干擾素生成，防止肝糖原減少;皂苷類化合物還具有降血壓、鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)驚作用，是黃芪中重要生理活性成分，因此黃芪皂苷常作為黃芪藥材的定性定量指標(biāo)[7]。

氨基酸作為保健食品中的一個(gè)重要營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)，其組成及含量能在一定程度上反映黃芪保健酒中的原材料來源，為保健酒品質(zhì)提供鑒別依據(jù)。黃芪保健酒含有豐富的氨基酸，其中包含8種人體必需氨基酸。氨基酸賦予黃芪保健酒獨(dú)特的口味和醇香，是構(gòu)成酒獨(dú)特風(fēng)味的物質(zhì)。此外，氨基酸在人體內(nèi)不僅提供了合成蛋白質(zhì)的重要原料，而且在維持正常代謝、保證機(jī)體營(yíng)養(yǎng)、促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育、增進(jìn)身體健康、維持生命等方面發(fā)揮重要的作用。因此，黃芪保健酒中所含的氨基酸營(yíng)養(yǎng)功效巨大。

此外，微量元素是中藥歸經(jīng)和藥性物質(zhì)基礎(chǔ)的重要組分，在保健酒中發(fā)揮重要的作用。鈣、鎂都屬于必需元素，在黃芪中的含量最高。鈣是組成牙齒和骨骼的重要物質(zhì)；鎂能激活體內(nèi)多種酶，維持核酸結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，抑制神經(jīng)興奮，參與體內(nèi)蛋白質(zhì)合成、肌肉收縮和體溫調(diào)節(jié)；鋅參與機(jī)體的免疫過程，增強(qiáng)防疫能力，加速生長(zhǎng)發(fā)育，增強(qiáng)創(chuàng)傷組織再生能力；硒是抗癌主要微量元素，是SOD活性中心的必需成分，具有清除體內(nèi)自由基和過氧化物、延緩細(xì)胞衰老，保護(hù)細(xì)胞膜通透性和穩(wěn)定性，促進(jìn)淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體，增強(qiáng)人體免疫功能等作用。鐵、錳、鈷、銅都可促進(jìn)造血，另外，鐵還影響血紅蛋白的生成，是血紅蛋白合成的重要原料之一;錳能促進(jìn)骨骼生長(zhǎng)發(fā)育，維持正常生殖功能;銅通過促進(jìn)小腸對(duì)鐵的吸收利用而增強(qiáng)造血。鋁能阻礙磷的吸收、腎結(jié)石的形成；鎳能促進(jìn)人體內(nèi)鐵的吸收、刺激血液生長(zhǎng)及紅細(xì)胞再生。由此可見，正是由于黃芪等中藥中豐富的黃酮、皂苷、多糖、氨基酸和微量元素等有效成分的存在，使得黃芪保健酒具有極為重要的食用、保健、防病、治病的功效[8]。

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