劉麗丹，吳日章，曾凱芳,2,*

(1.西南大學食品科學學院，重慶 400715；2.重慶市特色食品工程技術(shù)研究中心，重慶 400715)

采后橘油誘導及振動脅迫對貯藏期錦橙果皮油胞病的影響

劉麗丹1，吳日章1，曾凱芳1,2,*

(1.西南大學食品科學學院，重慶 400715；2.重慶市特色食品工程技術(shù)研究中心，重慶 400715)

以果皮塌陷指數(shù)和變色指數(shù)為測定指標，研究橘油及振動脅迫處理對錦橙果皮油胞病的影響。結(jié)果表明：隨橘油體積分數(shù)增大果皮油胞病逐漸加重，并以100%橘油處理對錦橙果皮油胞病的誘導效果最明顯；錦橙果皮油胞病發(fā)病程度隨著振動脅迫強度增大而加重，其中500r/min的誘導效果最顯著。另外，在橘油和振動脅迫處理后的果實在不同溫度下貯藏時，發(fā)現(xiàn)20℃貯藏的錦橙果皮油胞病最為嚴重，0℃冷害溫度也能加劇果實油胞病的發(fā)生，5℃貯藏的錦橙果皮油胞病最輕微。研究結(jié)果為進一步研究柑橘油胞病的發(fā)生機理及防控措施提供理論依據(jù)。

柑橘；油胞病；振動脅迫；橘油

柑橘是我國重要水果之一，近年來我國柑橘種植面積及產(chǎn)量已居各類水果之首。同時我國柑橘品種資源豐富，主要以寬皮柑橘為主，并且栽培柑橘的省已有20個[1]。錦橙又名鵝蛋柑，主要分布在四川、重慶、湖北、貴州等地。錦橙果大，肉質(zhì)細嫩化渣，甜酸適中，味濃汁多，微具香氣，含有多種營養(yǎng)成分[2]。作為貯期較長的甜橙，采后果皮易出現(xiàn)不規(guī)則生理性褐斑，不僅對果皮的光潔度和內(nèi)在風味品質(zhì)有影響，還可降低果實的商品價值[3]。目前柑橘病害關(guān)注的焦點是病理性的病害，對柑橘果實生理性病害的研究很少。

油胞病是一種常見的果皮生理病變，病斑內(nèi)油胞突出，組織稍凹陷，后變?yōu)辄S褐色，油胞萎縮，但油胞枯萎只發(fā)生在油皮層，所以油胞病一般不會引起果實腐爛。果實發(fā)病后可在果皮上形成淺綠色或褐色的病斑，導致果實外觀品質(zhì)下降引起柑橘果實的銷量下降[4-5]。油胞病可由多種因素引起，如采前長期陽光直射[6]，營養(yǎng)元素缺乏[7]，采前惡劣天氣[7]，機械傷及貯藏條件不適[8-9]等，以前的研究更多地是關(guān)注如何通過控制采前條件來控制果實的病害。然后，目前發(fā)現(xiàn)即使采用健康的果實貯藏，在貯藏期依然會發(fā)生比較嚴重的油胞病。對于油胞病的發(fā)生機理的研究報道很少，有研究認為由于油胞病的發(fā)生與柑橘外皮組織中的油胞破裂后滲出具有光毒性的橘油對果皮組織和細胞的傷害密切相關(guān)[10-11]，外層油胞的橘油釋放與振動脅迫和機械傷有關(guān)。目前對于直接采用橘油處理或者振動脅迫處理柑橘果實引起油胞病發(fā)病程度的研究報道還很缺乏。因此，本實驗選用不同體積分數(shù)的外源橘油或者不同強度的振動脅迫處理錦橙果實，并將處理后的果實貯藏于不同溫度條件下，以果皮塌陷指數(shù)和變色指數(shù)作為主要指標，研究錦橙果皮組織形態(tài)和色澤的變化，從而確定外源橘油和振動脅迫對錦橙果皮油胞病發(fā)病情況的影響，為柑橘油胞病發(fā)病機理的深入研究奠定理論基礎。

1 材料與方法

1.1 材料

供試柑橘 (Citrus Sinensic Osbeck. cv. Jincheng 447#)產(chǎn)地為重慶北碚，果實為成熟果實，色澤為黃色，剔除病、傷果，選擇大小、果色均勻、成熟度一致(單果質(zhì)量為(201.0±10.2)g，固酸比為(13.25±0.82)、無病斑的果實，果實采收后立即運回實驗室；柑橘精油(純度為100%，產(chǎn)地巴西) 植優(yōu)雅香精油公司。

1.2 方法

1.2.1 不同貯藏溫度對橘油處理后錦橙果實油胞病的影響

參考Wild[12]的方法，用打孔器制備直徑(6mm)的濾紙圓片，每個濾紙片上滴15μL 100%純度的柑橘精油，并將濾紙片放在寬度1cm的膠帶上，每隔3cm放置一個濾紙片。最后將膠帶沿錦橙果實赤道部位纏繞一圈，每個果實放置5個濾紙片。各種體積分數(shù)橘油處理后的錦橙果實用厚度為0.015mm的聚乙烯袋單果包裝，分別置于0、5、10、20℃條件3d，然后拆除膠帶，用同樣的聚乙烯袋單果包裝后分別置于相應的溫度(0、5、10、20℃)貯藏7d，并觀察測定果皮塌陷指數(shù)和變色指數(shù)。3次重復。

1.2.2 不同體積分數(shù)的橘油處理對錦橙果皮油胞病發(fā)病情況的影響

參考Wild[12]的方法，橘油體積分數(shù)為0(對照，為向日葵精油)、25%、50%、75%和100%，各體積分數(shù)柑橘精油以沒有毒性的向日葵精油稀釋，按照1.2.1節(jié)方法進行橘油處理。橘油處理后的錦橙果實用厚度為0.015mm的聚乙烯袋單果包裝，置于5℃條件下(此溫度為柑橘果實較適宜的貯藏溫度，并且橘油處理后的果實油胞病發(fā)病趨勢緩慢遞增，便于觀察)3d，然后拆除膠帶，用同樣的聚乙烯袋單果包裝后置于5℃貯藏7d，觀察測定果皮塌陷指數(shù)和變色指數(shù)，3次重復。

1.2.3 不同強度的振動脅迫對錦橙果皮油胞病發(fā)病情況的影響

參照高雪等[13]方法，振動脅迫果實采用擺動式搖床振動，分別設置100、300、500r/min 搖床在室溫(20℃)對錦橙果實進行1d (24h)的振動處理，采取無振動處理為對照。然后將果實用厚度為0.015mm的聚乙烯袋單果包裝，貯藏于20℃環(huán)境中(此溫度為室溫，并且振動脅迫處理后的果實油胞病發(fā)病趨勢緩慢遞增，便于觀察)貯藏9d，對其進行塌陷指數(shù)和變色指數(shù)測定。重復3次。

1.2.4 不同貯藏溫度對振動脅迫后錦橙果實油胞病的影響

采用300r/min 的擺動式搖床在室溫下(20℃)對錦橙果實進行1d(24h)的振動處理，然后將果實用厚度為0.015mm的聚乙烯袋單果包裝，分別于在 0、5、10、20℃貯藏9d，對其進行塌陷指數(shù)和變色指數(shù)測定。重復3次。

1.2.5 塌陷指數(shù)和變色指數(shù)測定

參照Knight等[14]的方法進行標準分級及計算。塌陷級別：果皮凹陷情況：0為無；1為較輕微；2為輕微；3為中等；4為嚴重。變色級別：果皮變色情況：0為無；1為較輕微；2為輕微；3為中等；4為嚴重；5為極其嚴重。

塌陷指數(shù)=∑(塌陷級別×該級別果實占總果實的百分比)

變色指數(shù)=∑(變色級別×該級別果實占總果實的百分比)

1.3 數(shù)據(jù)分析

采用Excel 2003統(tǒng)計分析所有數(shù)據(jù)，計算標準誤并制圖；應用SPSS11.5軟件對數(shù)據(jù)差異顯著性進行分析，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同貯藏溫度對橘油處理后錦橙果實油胞病的影響

由圖1可知，橘油處理后的錦橙果實在不同溫度條件下貯藏時，20℃貯藏的錦橙果皮塌陷指數(shù)顯著大于其他貯藏溫度錦橙果實(P＜0.05)，貯藏后期5℃貯藏果實的塌陷指數(shù)最小，但是0、5℃與10℃貯藏的錦橙果皮塌陷指數(shù)在貯藏1d后沒有顯著性差異(P＞0.05)。橘油誘導后(貯藏0d時)，20℃貯藏的錦橙果皮塌陷指數(shù)高達3.83，分別是0、5℃和10℃的2.71、1.40和1.19倍；7d后，20℃貯藏的錦橙果皮塌陷指數(shù)增加到4.00，而0、5℃和10℃貯藏的錦橙果皮塌陷指數(shù)分別為3.79、3.33和3.46。

橘油處理后的錦橙果實在20℃貯藏時，貯藏前4d的果皮變色指數(shù)顯著高于0℃和5℃貯藏的果實(P＜0.05)，0℃和5℃貯藏果實的變色指數(shù)在貯藏2d后差異不顯著(P＜0.05)。橘油剛誘導后(貯藏0d時)，20℃貯藏的錦橙果皮變色指數(shù)已經(jīng)為4.42，遠高于其他貯藏溫度下的果皮變色指數(shù)，且于貯藏期間變化較小。橘油處理后于0℃下貯藏的錦橙果皮變色指數(shù)變化急劇，初始值只有1.33，但到第7天時已經(jīng)增高至4.46，超過了10℃貯藏的錦橙果皮的變色指數(shù)(4.25)；5℃貯藏的錦橙果皮變色指數(shù)隨貯藏時間而緩慢增加，變化趨勢較為明顯。

圖1 貯藏溫度對橘油處理后錦橙果皮塌陷指數(shù)(A)和變色指數(shù)(B)的影響Fig.1 Effect of storage temperature on collapse index (A) and color index (B) of Jincheng oranges treated with citrus oil

2.2 不同體積分數(shù)橘油處理對錦橙果皮油胞病的影響

不同體積分數(shù)橘油處理后，錦橙果皮塌陷指數(shù)和變色指數(shù)均隨著貯藏時間延長而增大(圖2)，在相同的貯藏天數(shù)中，處理的橘油體積分數(shù)越高，錦橙果皮的塌陷和變色指數(shù)越高。100%橘油處理的果皮塌陷指數(shù)和變色指數(shù)顯著高于其他體積分數(shù)處理的果實(P＜0.05)，在剛誘導后的果實中，100%橘油處理果實的塌陷指數(shù)分別比對照和25%、50%、75%橘油誘導果實的高13.67、15.47、1.20和10.00 倍。50%橘油處理果皮的塌陷指數(shù)和變色指數(shù)在貯藏0d和2d時顯著高于25%和75%橘油處理果實(P＜0.05)，但是在貯藏2d后3者之間無顯著性差異(P＞0.05)。對照果皮塌陷指數(shù)和變色指數(shù)在貯藏期間均顯著低于其他各體積分數(shù)的橘油處理果實(P＜0.05)。

圖2 不同體積分數(shù)橘油處理對錦橙果皮塌陷指數(shù)(A)和變色指數(shù)(B)的影響Fig.2 Effect of citrus oil concentration on collapse index (A) and color index (B) of Jincheng oranges

2.3 不同振動強度處理對錦橙果皮油胞病的影響

圖3 不同振動強度處理對錦橙果皮塌陷指數(shù)(A)和變色指數(shù)(B)的影響Fig.3 Effect of mechanical vibration intensity on collapse index (A) and color index (B) of Jincheng oranges

由圖3可知，振動脅迫處理后可促進錦橙果皮塌陷指數(shù)和變色指數(shù)增加，貯藏期間不同振動強度處理后錦橙果皮的塌陷指數(shù)顯著高于對照果實(P＜0.05)，且振動強度越高，果實油胞病發(fā)病越嚴重。貯藏0d時，對照錦橙果皮塌陷指數(shù)和變色指數(shù)為0，300r/min處理的錦橙果皮塌陷指數(shù)和變色指數(shù)在貯藏0d時均為1.58，而500r/min振動處理的錦橙果皮塌陷指數(shù)和變色指數(shù)就已經(jīng)達到2.50和2.00。貯藏的第10天，500r/min處理的錦橙果皮塌陷和變色指數(shù)已經(jīng)分別達到3.83和4.75，分別比對照高3.83和4.75倍。100r/min處理的錦橙果皮塌陷指數(shù)和變色指數(shù)顯著低于300r/min和500r/min處理的果實(P＜0.05)。

2.4 不同貯藏溫度對振動脅迫后錦橙果實油胞病的影響

圖4 不同貯藏溫度對振動脅迫后錦橙果皮塌陷指數(shù)(A)和變色指數(shù)(B)的影響Fig.4 Effect of storage temperature on collapse index (A) and color index (B) of Jincheng oranges with mechanical vibration treatment

由圖4可知，振動脅迫處理后各溫度下貯藏的錦橙果皮塌陷指數(shù)和變色指數(shù)均隨著貯藏時間延長而增大。貯藏0d時，20℃貯藏的錦橙果皮塌陷指數(shù)和變色指數(shù)分別達到1.33和0.58，顯著高于0、5℃和10℃貯藏果實(P＜0.05)，0、5℃和10℃貯藏果實的塌陷指數(shù)和變色指數(shù)并無顯著差異(P＞0.05)。但是貯藏中期0℃和10℃的果皮塌陷指數(shù)和褐變指數(shù)增加趨勢要比20℃大，并且于貯藏第2天超過了20℃的錦橙果實。第7～9天除5℃外各溫度下的錦橙果皮塌陷指數(shù)和變色指數(shù)相當，無顯著性差異(P＞0.05)。整個貯藏期中5℃貯藏錦橙的塌陷指數(shù)和變色指數(shù)都基本小于其他貯藏溫度，與 0℃和10℃貯藏的果實相比，5℃貯藏錦橙果皮塌陷指數(shù)和變色指數(shù)在7～9d存在顯著性差異外，其他貯藏期間差異性較小(P＞0.05)。

3 結(jié) 論

橘油處理能夠誘導錦橙果皮油胞病的發(fā)生，且不同溫度下貯藏的錦橙果皮油胞病發(fā)病程度有區(qū)別，其中5℃貯藏的錦橙果皮油胞病發(fā)病程度最小，與20℃貯藏的錦橙果皮油胞病發(fā)病程度(以果皮塌陷指數(shù)和變色指數(shù)表示)差異顯著(P＜0.05)。另外，橘油體積分數(shù)對錦橙果皮油胞病有一定影響，且橘油體積分數(shù)增大，其果皮塌陷指數(shù)和變色指數(shù)越大。貯藏期間100%橘油處理的錦橙果皮油胞病發(fā)病最為嚴重，并與其他體積分數(shù)的橘油處理所誘導的錦橙果皮油胞病發(fā)病程度存在顯著性差異(P＜0.05)。另外，不同振動強度處理對錦橙果皮油胞病發(fā)生的影響程度不同，振動強度越大，發(fā)病越嚴重，500r/min處理的錦橙果皮油胞病發(fā)病程度與其他處理存在顯著性差異(P＜0.05)。同時振動脅迫處理后于不同溫度貯藏的錦橙果皮油胞病發(fā)病程度相差較大，以5℃貯藏的錦橙果皮油胞病發(fā)病最少，20℃貯藏的錦橙果皮油胞病發(fā)病明顯。

4 討 論

橘油可誘導錦橙油胞病發(fā)生，該試驗結(jié)果與Knight等[14]和Wild等[12]對華盛頓臍橙的研究結(jié)果一致。本實驗在此基礎上還進一步研究了不同體積分數(shù)橘油及橘油處理后于不同溫度貯藏對錦橙果皮油胞病的影響，為橘油傷害可能是引起果實油胞病發(fā)病的根本原因的機理補充了研究基礎。橘油誘導后，可引起果皮細胞代謝紊亂和促進果實衰老，產(chǎn)生大量的活性氧[15]，活性氧自由基具強氧化性，易造成果蔬組織的膜脂過氧化和脫酯化作用[16-18]，促進油胞病的發(fā)生。但對于橘油誘導油胞病的機理還需要進一步開展研究工作。另外，不適貯藏溫度對采后錦橙果皮油胞病發(fā)病有一定促進作用，如在冷害溫度(0℃)下貯藏可促進果實油胞病發(fā)生；較高的室溫(20℃)下貯藏也會促進果實油胞病的發(fā)生[19]，兩者的機理可能不同，需進一步研究。振動脅迫能夠促進錦橙果皮油胞病產(chǎn)生，該試驗結(jié)果與Knight等[14]對華盛頓臍橙的研究結(jié)果一致。振動脅迫誘導錦橙油胞病發(fā)生加重是因為振動引起果實膜脂過氧化加劇[20-21]，還是振動引起錦橙果皮橘油釋放所致，還需要進行更深入的研究。

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Respective Effects of Post-harvest Citrus Oil Induction and Vibration Stress Treatment on Oleocellosis in Jincheng Orange Peel (Citrus sinensis Osbeck cv. Jincheng)

LIU Li-dan1，WU Ri-zhang1，ZENG Kai-fang1,2,*
(1. College of Food Science, Southwest University, Chongqing 400715, China；2. Chongqing Special Food Programme and Technology Research Center, Chongqing 400715, China)

The respective effects of post-harvest citrus oil induction and vibration stress treatment on oleocellosis in Jincheng orange peel were studied based on collapse index and color index. Oleocellosis in Jincheng orange peel showed a gradual increase as the concentration of citrus oil increased. The most serious oleocellosis in citrus peel could arise from 100% citrus oil treatment. In addition, mechanical vibration stress also could induce oleocellosis in Jincheng orange peel. Mechanical vibration stress at 500 r/min revealed the most obvious effect on oleocellosis formation. Moreover, Jincheng oranges treated with citrus oil or mechanical vibration stress were also used to explore the effect of storage temperature on oleocellosis in their peels. As a result, Jincheng oranges stored at 20 or 5 ℃had the severest change in oleocellosis. However, Jincheng oranges had the slightest change in oleocellosis during 5 ℃ storage. Therefore, these results can provide a theoretical reference for exploring the mechanisms and control strategies of oleocellosis.

∶citrus；oleocellosis；vibration stress；citrus oil

S609.3；S667.7

A

1002-6630(2011)16-0365-05

2011-05-09

國家自然科學基金面上項目(31071618)；中央高?；究蒲袠I(yè)務費專項資金資助項目(XDJK2010B001)

劉麗丹(1986—)，女，碩士研究生，研究方向為農(nóng)產(chǎn)品加工與貯藏工程。E-mail：liulidan86@126.com

*通信作者：曾凱芳(1972—)，女，副教授，博士，研究方向為農(nóng)產(chǎn)品加工與貯藏工程。E-mail：zengkaifang@163.com