穆雪峰，孫麗萍*，徐 響，龐 杰，何 偉，黃 蘭，沈新鋒

(1.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蜜蜂研究所，北京 100093；2.福建農(nóng)林大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院，福建 福州 350002)

棗花蜜中抗氧化成分提取工藝優(yōu)化

穆雪峰1,2，孫麗萍1,*，徐 響1，龐 杰2，何 偉1,2，黃 蘭1,2，沈新鋒1,2

(1.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蜜蜂研究所，北京 100093；2.福建農(nóng)林大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院，福建 福州 350002)

研究樹(shù)脂提取棗花蜜中抗氧化成分的方法，包括蜂蜜提取條件、樹(shù)脂篩選；蜂蜜與樹(shù)脂比例、吸附流速對(duì)吸附的影響；洗脫劑體積分?jǐn)?shù)、解吸流速、體積對(duì)解吸的影響，以期為充分提取蜂蜜中抗氧化成分提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。通過(guò)未吸附物和解吸物中抗氧化成分對(duì)DPPH自由基清除率的比較，確定采用XAD-2樹(shù)脂最佳吸附和解吸條件為蜂蜜與樹(shù)脂比例1∶1(m/m)，吸附流速1.0mL/min，洗脫劑80%乙醇，解吸流速4.0mL/min，洗脫體積2BV。

棗花蜜；抗氧化成分；DPPH自由基；樹(shù)脂

蜂蜜為蜜蜂科昆蟲(chóng)中華蜜蜂(Aips cerana Febricius)或意大利蜂(Aips mellifera Linnaens)采集植物花蜜或分泌物，經(jīng)過(guò)充分釀造而貯藏在巢脾內(nèi)的甜物質(zhì)[1]。棗花蜜為我國(guó)眾多大宗商品蜂蜜中的一種，含有多種抗氧化成分，如咖啡酸、對(duì)香豆酸、柚皮素、山奈酚等[2]?？寡趸煞质翘烊划a(chǎn)物中具有獨(dú)特生物活性的物質(zhì)，具有天然、高效、低毒等優(yōu)點(diǎn)，還具有清除自由基的作用[3]。自由基與許多病理和生理現(xiàn)象，如心腦血管疾病、糖尿病、癌癥、腫瘤、炎癥、動(dòng)脈粥樣硬化及衰老等有關(guān)[4]，故尋找阻斷自由基反應(yīng)的天然產(chǎn)物抗氧化成分的研究引起國(guó)內(nèi)外眾多學(xué)者的極大關(guān)注[5-7]。

DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)是一種很穩(wěn)定的以氮為中心的自由基，廣泛用于測(cè)定蜂蜜提取物的抗氧化活性[8-10]。DPPH醇溶液呈紫色，在517nm波長(zhǎng)處有最大吸收，當(dāng)有抗氧化成分存在時(shí)，DPPH自由基的單電子被配對(duì)，顏色由藍(lán)紫色變?yōu)榈S色，以吸光度的改變來(lái)計(jì)算抗氧化成分的清除能力。

吸附樹(shù)脂具有物理化學(xué)穩(wěn)定性高、吸附選擇性獨(dú)特、再生簡(jiǎn)便、解吸條件溫和、使用周期長(zhǎng)、易于循環(huán)利用、成本低等諸多優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于天然產(chǎn)物的提取分離[11]。Miriam等[12]使用XAD-4樹(shù)脂提取蜂蜜中黃酮類物質(zhì)，考察了蜂蜜/樹(shù)脂比例、洗脫體積影響提取的因素；邢建軍等[13]采用XAD-2樹(shù)脂考察了油菜蜂蜜中黃酮類物質(zhì)柱層析分離條件；二者均未涉及樹(shù)脂的篩選以及未吸附物和解吸物的抗氧化活性。本研究使用AB-8、XAD-2、D101和聚酰胺4種樹(shù)脂吸附棗花蜜中抗氧化成分，以未吸附物和解吸物對(duì)DPPH自由基的清除率為指標(biāo)篩選出最佳柱材，并考察蜂蜜溶解條件，蜂蜜/樹(shù)脂比例、吸附流速對(duì)吸附的影響；洗脫劑體積分?jǐn)?shù)、解吸流速、洗脫體積對(duì)解吸的影響，以期為充分分離蜂蜜中抗氧化成分提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑與儀器

棗花蜜，產(chǎn)自北京懷柔，常溫保存，由北京君健生蜂產(chǎn)品有限公司提供。

AB-8 安徽三星樹(shù)脂科技有限公司；D101、聚酰胺 南開(kāi)大學(xué)試劑廠；XAD-2、DPPH 美國(guó)Sigma公司；甲醇、乙醇、乙酸乙酯(均為分析純) 北京化工廠。

HZQ-F160全溫振蕩培養(yǎng)箱 培英有限公司；AL204電子天平 梅特勒-托利多(上海)公司；Synergy HT酶標(biāo)儀 BioTek基因有限公司；HL-2B數(shù)顯恒流泵 上海精科實(shí)業(yè)有限公司；玻璃層析柱(2.0×30cm) 市售。

1.2 方法

1.2.1 提取條件的選擇

分別稱取10.0g棗花蜜2份，以1∶5(g/mL)分別加入超純水、酸水(超純水用鹽酸調(diào)至pH2)后超聲溶解，用等體積乙酸乙酯重復(fù)萃取3次，酯層40℃減壓濃縮至干，備用。

1.2.2 靜態(tài)吸附和解吸

1.2.2.1 樹(shù)脂的篩選

稱取10.0g棗花蜜4份，以1∶5(g/mL)加入酸水，超聲溶解后，分別加入10.0g AB-8、XAD-2、D101、聚酰胺樹(shù)脂，30℃恒溫振蕩24h，抽濾分離樹(shù)脂和未吸附液。未吸附液用等體積乙酸乙酯重復(fù)萃取3次，酯層40℃減壓濃縮至干，記為未吸附物；樹(shù)脂經(jīng)250mL超純水沖洗后用50mL 80%乙醇30℃恒溫振蕩24h，分離樹(shù)脂和解吸液，解吸液脫醇后用乙酸乙酯重復(fù)萃取3次，酯層40℃減壓濃縮至干，記為解吸物。

1.2.2.2 洗脫劑體積分?jǐn)?shù)的選擇

稱取10.0g棗花蜜5份，以1∶5(g/mL)加入酸水，超聲溶解后，分別加入10.0g XAD-2樹(shù)脂，30℃恒溫振蕩24h，抽濾分離樹(shù)脂和未吸附液。吸附樹(shù)脂經(jīng)250mL超純水沖洗后，分別用60%、70%、80%、90%、100%乙醇解吸，分離樹(shù)脂和解吸液，解吸液和未吸附液的處理方法同1.2.2.1節(jié)。

1.2.3 動(dòng)態(tài)吸附和解吸

1.2.3.1 蜂蜜/樹(shù)脂比例的選擇

稱取棗花蜜8份(10.0、20.0、30.0、40.0、60.0、80.0、100.0、120.0g)，以1∶5(g/mL)加入酸水，超聲溶解后分別上XAD-2柱，樹(shù)脂用量40.0g，即蜂蜜/樹(shù)脂比例分別為0.25∶1、0.5∶1、0.75∶1、1∶1、1.5∶1、2∶1、2.5∶1、3∶1。吸附流速1.0mL/min，分別收集未吸附液，未吸附液處理方法同1.2.2.1節(jié)，記為不同蜂蜜/樹(shù)脂比例條件下未吸附物。

1.2.3.2 吸附流速的選擇

分別稱取10.0g棗花蜜5份，以1∶5(g/mL)加入酸水，超聲溶解后分別上XAD-2柱，樹(shù)脂用量40.0g，吸附流速分別為0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL/min，收集不同流速下未吸附液，未吸附液處理方法同1.2.2.1節(jié)，記為不同吸附流速條件下未吸附物。

1.2.3.3 解吸流速和洗脫體積的選擇

分別稱取40.0g棗花蜜3份，以1.2.2.1節(jié)相同方法溶解后分別上XAD-2柱，樹(shù)脂用量40.0g，吸附流速1.0mL/min，吸附樹(shù)脂經(jīng)3BV超純水除雜后，用5BV 80%乙醇洗脫，解吸流速分別為3、4、5mL/min，按每1BV收集解吸液，解吸液處理方法同1.2.2.1節(jié)，記為不同解吸流速條件下解吸物。

1.2.4 抗氧化活性測(cè)定

情況 3.2 {1,2,3}不是X中頂點(diǎn)色集合,以下僅考慮31≤n≤34時(shí)的情況,此時(shí)C中至多有3個(gè)集合不是X和Y中頂點(diǎn)色集合。

不同條件下的提取物、解吸物和未吸附物用甲醇分別溶解后，測(cè)定其對(duì)DPPH自由基的清除率，方法同前期實(shí)驗(yàn)方法[2]。

式中：A1為實(shí)驗(yàn)組吸光度；A2為空白組吸光度；A0為調(diào)零組吸光度。

1.2.5 吸附率和解吸率計(jì)算

式中：S為提取物質(zhì)量；S1為未吸附物質(zhì)量；S2為解吸物質(zhì)量。

1.2.6 統(tǒng)計(jì)分析

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel軟件處理，并用SPSS17.0軟件包進(jìn)行單因素試驗(yàn)結(jié)果方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 提取條件的選擇

在超純水和酸水溶解條件下，提取物對(duì)DPPH自由基清除率結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 不同溶解條件下的抗氧化成分提取率及DPPH自由基清除率(χ±s)Table 1 Extraction rates and DPPH radical scavenging rates of acidified ultrapure water extract and ultrapure water extract from Chinese date honey (χ±s)

2.2 樹(shù)脂的篩選

樹(shù)脂的吸附能力是由樹(shù)脂孔徑、比表面積或形成氫鍵等綜合性能決定的；解吸能力的大小主要取決于吸附劑與吸附質(zhì)的作用力[14]。在蜂蜜/樹(shù)脂比例、吸附和解吸條件相同條件下，測(cè)定4種樹(shù)脂對(duì)棗花蜜中抗氧化成分吸附率、解吸率以及未吸附物、解吸物對(duì)DPPH自由基的清除率，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 不同樹(shù)脂吸附率、解吸率及棗花蜜中抗氧化成分對(duì)DPPH清除率()Table 2 Adsorption and desorption capacities of different types of macroporous resin towards DPPH free radical scavenging components from Chinese date honey and DPPH free radical scavenging rates of adsorbed and unadsorbed components (χ±s)

表2 不同樹(shù)脂吸附率、解吸率及棗花蜜中抗氧化成分對(duì)DPPH清除率()Table 2 Adsorption and desorption capacities of different types of macroporous resin towards DPPH free radical scavenging components from Chinese date honey and DPPH free radical scavenging rates of adsorbed and unadsorbed components (χ±s)

樹(shù)脂未吸附量/解吸量/吸附解吸 清除率/%類型(mg/10g)(mg/10g)率/%率/%未吸附物1.0mg/mL解吸物0.5mg/mL AB-81.86.980.095.837.5±0.7a40.6±0.8aXAD-22.16.776.797.122.2±0.9b51.9±0.5bD1013.94.056.778.428.3±0.8c46.2±0.4c聚酰胺6.11.132.237.927.6±0.6c40.4±0.8a

由表2可見(jiàn)，4種樹(shù)脂的吸附能力為AB-8＞XAD-2＞D101＞聚酰胺，解吸能力為XAD-2＞AB-8＞D101＞聚酰胺，其中AB-8吸附率最高，為80.0%；XAD-2解吸率最高達(dá)到97.1%；而聚酰胺的吸附和解吸能力都比較差，不足40%。因此就吸附和解吸能力而言，AB-8和XAD-2樹(shù)脂適合用于蜂蜜中抗氧化成分的提取。就抗氧化活性而言，當(dāng)未吸附物質(zhì)量濃度均為1.0mg/mL時(shí)，XAD-2未吸附物對(duì)DPPH自由基清除率僅為(22.2± 0.9)%，顯著低于AB-8、聚酰胺和D101(P＜0.01)，說(shuō)明XAD-2吸附了蜂蜜中大量的抗氧化成分，從而未吸附物的抗氧化能力很弱；在相同質(zhì)量濃度(0.5mg/mL)下，XAD-2解吸物DPPH清除率為(51.9±0.5)%，顯著高于其他3種樹(shù)脂(P＜0.01)，說(shuō)明XAD-2解吸物中抗氧化成分活性強(qiáng)或有效成分含量高。基于清除DPPH自由基活性和吸附解吸效果兩方面綜合考慮，XAD-2對(duì)有效成分的選擇性優(yōu)于AB-8、D101和聚酰胺，因此選定XDA-2樹(shù)脂作為富集蜂蜜中抗氧化成分的最佳柱材。

2.3 洗脫劑體積分?jǐn)?shù)的確定

大孔樹(shù)脂吸附蜂蜜中抗氧化成分一般選擇甲醇作為洗脫劑[15]，預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)甲醇和乙醇的解吸效果幾乎沒(méi)有差異。由于甲醇毒性大，因此選擇安全系數(shù)較高的乙醇作為洗脫劑。不同體積分?jǐn)?shù)乙醇極性不同，由于極性差異引起蜂蜜中抗氧化成分與樹(shù)脂分子間作用及抗氧化成分的溶解度不同，從而導(dǎo)致洗脫效果有差異。因此有必要考察洗脫劑的體積分?jǐn)?shù)以保證最佳的洗脫效果，不同乙醇體積分?jǐn)?shù)條件下解吸率以及解吸物對(duì)DPPH自由基的清除率見(jiàn)圖1。

圖1 洗脫劑體積分?jǐn)?shù)對(duì)解吸率及解吸物清除DPPH自由基的影響Fig.1 Effect of elution volume on desorption capacity and DPPH radical scavenging activity of desorpted components

由圖1可知，隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的增加，解吸率增加；而解吸物對(duì)DPPH自由基的清除率先增加后減小。當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)從60%增加到80%時(shí)，解吸率從60.3%增加到75.1%；解吸物對(duì)DPPH自由基的清除率從32.4%增加到37.9%；達(dá)到最大值，說(shuō)明80%乙醇解吸物抗氧化活性最強(qiáng)。當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)從80%增加到100%時(shí)，解吸率從71.1%增加到86.7%，而解吸物對(duì)DPPH自由基的清除率由37.9%降低到20.8%，這可能是隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的增加，解吸率不斷增大，洗脫出一些無(wú)活性成分，導(dǎo)致洗脫物中抗氧化成分含量降低，從而清除率減小。綜合考慮DPPH清除能力和解吸能力，確定80%乙醇為最適合洗脫劑。

2.4 蜂蜜與樹(shù)脂比例的選擇

在吸附流速一定時(shí)，蜂蜜/樹(shù)脂比例大小直接影響樹(shù)脂的吸附效果。蜂蜜與樹(shù)脂比例過(guò)小，會(huì)造成樹(shù)脂的浪費(fèi)；蜂蜜/樹(shù)脂比例過(guò)大，會(huì)出現(xiàn)樹(shù)脂吸附過(guò)載。不同蜂蜜與樹(shù)脂比例條件下，未吸附物對(duì)DPPH自由基的清除率見(jiàn)圖2。

圖2 蜂蜜/樹(shù)脂比例對(duì)未吸附物清除DPPH自由基的影響Fig.2 Effect of XDA-2 resin amount on DPPH radical scavenging activity of unadsorbed components

由圖2可知，隨著蜂蜜/樹(shù)脂比例的增加，未吸附物對(duì)DPPH自由基清除率先維持恒定后增加。這是由于蜂蜜/樹(shù)脂比例小于1.0∶1時(shí)，樹(shù)脂過(guò)量，有效成分可以充分吸附，使得未吸附物的清除率維持在相對(duì)低的水平；隨著蜂蜜/樹(shù)脂比例增加，蜂蜜過(guò)量，有效成分超載，使得未吸附物的清除率不斷增加。當(dāng)蜂蜜/樹(shù)脂比例小于1.0∶1時(shí)，未吸附物對(duì)DPPH自由基清除率恒定在20%左右；當(dāng)蜂蜜/樹(shù)脂比例為1.0∶1時(shí)，未吸附物對(duì)DPPH自由基的清除率為28.2%；蜂蜜/樹(shù)脂比例從1.5∶1增加到3.0∶1時(shí)，未吸附物對(duì)DPPH自由基的清除率從40.3%增加到達(dá)到95.5%，即隨蜂蜜/樹(shù)脂比例的不斷增加，未吸附物對(duì)DPPH自由基清除率激增，表明有效成分超載。因此從節(jié)約成本和有效吸附兩方面考慮，確定蜂蜜/樹(shù)脂比例為1.0∶1。

2.5 吸附流速對(duì)未吸附物清除DPPH自由基的影響

在蜂蜜/樹(shù)脂比例一定時(shí)，吸附流速會(huì)直接影響吸附效果，流速過(guò)快會(huì)導(dǎo)致目標(biāo)物質(zhì)來(lái)不及吸附，出現(xiàn)泄露現(xiàn)象，從而造成吸附效果不佳；流速控制過(guò)慢，吸附時(shí)間會(huì)延長(zhǎng)，形成死吸附，使得解吸困難。圖3給出了吸附流速對(duì)未吸附物清除DPPH自由基的影響。

圖3 吸附流速對(duì)未吸附物清除DPPH自由基的影響Fig.3 Effect of sample loading flow rate on DPPH radical scavenging activity of unabsorpted components

由圖3可知，隨著吸附流速的增大，未吸附物對(duì)DPPH自由基清除率增加，表明有效成分泄露增加。當(dāng)吸附流速為1.0mL/min時(shí)，清除率僅為9.5%，略大于流速0.5mL/min時(shí)9.0%的清除率。當(dāng)吸附流速為1.5mL/min，曲線的斜率有明顯的增加，清除率增加到11.4%；當(dāng)流速增加到2.5mL/min，清除率高達(dá)18.8%，說(shuō)明有效成分泄露明顯?；诓恍纬伤牢胶臀叫Ч木C合考慮，確定吸附流速為1.0mL/min。

2.6 解吸流速和洗脫體積對(duì)解吸物清除DPPH自由基的影響

在洗脫劑體積分?jǐn)?shù)一定時(shí)，解吸流速和洗脫體積共同影響解吸效果。解吸流速過(guò)慢會(huì)導(dǎo)致解吸時(shí)間延長(zhǎng)；流速過(guò)快，吸附在樹(shù)脂上的有效成分還沒(méi)來(lái)得及被洗脫劑置換出來(lái)洗脫劑就流出樹(shù)脂柱，從而降低解吸率。洗脫體積過(guò)小，抗氧化成分洗脫不充分；體積過(guò)大，造成后續(xù)濃縮工作量加大。為了確定適宜的解吸流速和體積，測(cè)定了不同解吸流速、洗脫體積條件下解吸率和清除率，結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 解吸流速和洗脫體積對(duì)解吸物清除DPPH自由基的影響(χ±s)Table 3 Effect of elution flow rate and elution volume on DPPH radical scavenging activity of eluted components (χ±s)

由表3可知，同一解吸流速下，1BV洗脫物的解吸率最大，且對(duì)DPPH自由基清除率最強(qiáng)，說(shuō)明在1BV洗脫物中大部分被吸附的抗氧化成分已經(jīng)洗脫出來(lái)；隨著洗脫體積的增加，解吸物的解吸率和DPPH自由基的清除率不斷減小，說(shuō)明可被洗脫的抗氧化成分逐漸減少。

不同流速洗脫劑的解吸能力不同，相同洗脫體積(1BV)時(shí)，3.0mL/min解吸率高達(dá)67.5%，4.0mL/min次之為65.6%，5.0mL/min最低為51.1%；其解吸物的DPPH自由基清除率存在顯著差異(P＜0.05)，解吸流速3.0mL/min時(shí)清除率最低為56.7%、4.0mL/min最高為71.8%、5.0mL/min為63.0%。這可能是由于3.0mL/min解吸流速相對(duì)比較慢，洗脫劑與吸附物充分接觸，洗脫出一些被樹(shù)脂吸附但沒(méi)有活性成分，導(dǎo)致洗脫物質(zhì)量增加，有效成分含量降低使得清除率減?。?.0mL/min解吸流速偏快，洗脫劑還未與有效成分充分接觸就流出樹(shù)脂柱，使得抗氧化成分分散在后續(xù)組分，表現(xiàn)為在2～5BV內(nèi)洗脫物中DPPH自由基清除率較高。

從總解吸率來(lái)看，3.0mL/min最高為94.2%，4.0mL/min為87.2%，5.0mL/min最低為83.3%，這說(shuō)明解吸流速越慢，解吸效果越好。經(jīng)2BV洗脫，各流速洗脫物解吸率均已超過(guò)75%，基于節(jié)約洗脫劑和減少濃縮工作量的綜合考慮，確定洗脫體積為2BV。從DPPH自由基清除率來(lái)看，4.0mL/min的1BV洗脫物高達(dá)71.8%，隨著洗脫體積的增加，洗脫物活性迅速下降，到5BV時(shí)清除率僅有8.8%，而其他兩個(gè)條件洗脫的抗氧化物質(zhì)的富集度不如4.0mL/min，故選擇4.0mL/min作為洗脫流速。

3 結(jié) 論

本實(shí)驗(yàn)考察棗花蜜抗氧化成分的提取，對(duì)提取條件、柱材選擇、洗脫劑體積分?jǐn)?shù)、蜂蜜/樹(shù)脂比例、吸附解吸流速、洗脫體積等影響提取的因素進(jìn)行研究，結(jié)果顯示，提取棗花蜜中抗氧化成分的最佳柱材為XAD-2樹(shù)脂，最適宜提取條件為pH2的鹽酸超純水溶解蜜樣、樣液經(jīng)XAD-2層析富集抗氧化成分，具體條件為蜂蜜/樹(shù)脂比例1∶1、吸附流速1.0mL/min、洗脫劑80%乙醇、解吸流速4.0mL/min、洗脫體積2BV，得到富含清除DPPH自由基的抗氧化組分，為考察棗花蜜的抗氧化成分提供提取方法和參數(shù)。

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Optimization of Purification Process for DPPH Free Radical Scavenging Components from Acidic Aqueous Extract from Chinese Date Honey by Macroporous Resin Adsorption

MU Xue-feng1,2，SUN Li-ping1,*，XU Xiang1，PANG Jie2，HE Wei1,2，HUANG Lan1,2，SHEN Xin-feng1,2
(1. Bee Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100093, China；2. College of Food Science, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002, China)

Solvent extraction and purification by macroporous resin adsorption were used to acquire DPPH free radical scavenging components from Chinese date honey. Extraction solvent type, macroporous resin type, sample loading amount, sample loading flow rate, eluent type, elution flow rate and elution volume were optimized. Acidified ultrapure water (adjusted to pH 2 with HCl) was better solvent for DPPH free radical scavenging components in Chinese date honey than ultrapure water. Among four types of macroporous resin investigated, XDA-2 resin was found to be the most suitable choice. The optimal adsorption and desorption parameters of XDA-2 resin for purifying DPPH free radical scavenging components extracted from Chinese date honey of the same weight were sample loading flow rate of 1.0 mL/min, 80% ethanol aqueous solution as the eluent, elution flow rate of 4.0 mL/min and elution volume of 2 BV.

Chinese date honey；antioxidant activity；DPPH free radical scavenging components；resin

S896.1

A

1002-6630(2011)16-0098-05

2011-05-28

“十二五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2011BAD33B04)；國(guó)家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)蜂產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)(NYCYTX-43)；科技部農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化資金項(xiàng)目(2009GB23260456)

穆雪峰(1983—)，男，碩士研究生，研究方向?yàn)槭称坊瘜W(xué)。E-mail：mxf3814@163.com

*通信作者：孫麗萍(1963—)，女，研究員，碩士，研究方向?yàn)榉洚a(chǎn)品功能因子的分離與純化。E-mail：caasun@126.com