付金玉 李艷 吳秀琴

產(chǎn)后乳汁分泌不足是造成母乳喂養(yǎng)率低下的主要原因。養(yǎng)血生乳口服液由黑芝麻、當(dāng)歸、黨參、大棗、益母草等12味中藥組成，具有催乳、補(bǔ)虛、化瘀之功效，臨床用于防治產(chǎn)后乳汁分泌不足和促進(jìn)產(chǎn)褥復(fù)舊等。現(xiàn)將該制劑的制備方法、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和臨床觀察結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與儀器

養(yǎng)血生乳口服液(宜昌市夷陵醫(yī)院制劑室制備，批號20091020，20091114，20091219);阿魏酸(中國藥品生物制品檢定所，批號0773-9910，供含量測定用);當(dāng)歸藥材(宜昌眾生藥業(yè)有限公司，經(jīng)宜昌市藥品檢驗(yàn)所鑒定為傘形科植物當(dāng)歸Angelica sinensis(Oliv.)Diels的干燥根);硅膠G板(青島海洋化工廠);Waters高效液相色譜儀，包括490紫外檢測器、510輸液泵、745數(shù)據(jù)處理機(jī)。所用試劑均為分析純。

2 制備及質(zhì)量控制

2.1 制備工藝 將當(dāng)歸碎成粗粒，加10倍量水蒸餾提取揮發(fā)油約2 h，收集餾出液200 m l，備用。另取處方中其他11味中藥加5倍量水，煎煮1.5 h，過濾;藥渣加入蒸餾后的當(dāng)歸藥渣，加5倍量水煎煮2次，每次1 h，過濾。合并3次濾液，濃縮至1000 m l，冷卻。向濃縮液中加入95%乙醇，使含醇量達(dá)70%，靜置48 h，吸取上清液，過濾。濾液減壓回收乙醇至無醇味，并繼續(xù)濃縮至400 ml，加蒸餾水稀釋至600 ml，冷藏24 h。吸取上清液，過濾。向餾出液中加適量吐溫-80，使揮發(fā)油全部溶解，合并提取液，加蒸餾水定容至1000 ml，冷藏24 h，過濾。濾液灌封于10 ml口服液瓶中，100℃流通蒸氣滅菌40 min，冷卻，質(zhì)量檢查，貼簽包裝，即得。

2.2 質(zhì)量控制

2.2.1 性狀 本品為紅棕色澄明液體;味苦、微甜。

2.2.2 定性鑒別 取本品5 ml和不含當(dāng)歸藥材的樣品5 ml，分別用10 ml醋酸乙酯分2次(5，5 ml)提取，合并醋酸乙酯液蒸干，加甲醇0.5 ml使溶解，作為供試液和空白對照液。另取當(dāng)歸藥材0.5 g，加70%乙醇20 ml，加熱回流提取30 min，濾過。濾液回收乙醇至無醇味，放冷，同供試液制備方法制成當(dāng)歸對照液。取阿魏酸標(biāo)準(zhǔn)品適量，配制成1 ml含1 mg的甲醇溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法［1］，吸取上述4種溶液各5μl，分別點(diǎn)樣于同一硅膠G板上，以苯-冰醋酸-甲醇(30∶1∶3)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365 nm)下檢視，結(jié)果供試品色譜中在與當(dāng)歸對照色譜和對照品色譜相應(yīng)的位置上，均顯相同的熒光斑點(diǎn)，而空白對照色譜中無此斑點(diǎn)。

2.2.3 含量測定

2.2.3.1 色譜條件［2］色譜柱為 C18，3.9 mm×30 cm;流動相為10%醋酸-甲醇(55∶45);流速0.6 ml/min;檢測波長313 nm;進(jìn)樣量15 μl。

2.2.3.2 對照品溶液的制備 精密稱取干燥至恒重的阿魏酸對照品0.2 mg于10 m l容量瓶中，用流動相溶解并稀釋至刻度，即得。

2.2.3.3 供試品溶液的制備 精密量取養(yǎng)血生乳口服液樣品溶液20 ml，用醋酸乙酯60 ml分3次(20，20，20 ml)提取，合并提取液，用20 ml水洗滌。提取液置水浴上蒸干，用甲醇溶解定容至10 m l，即得。

2.2.3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密吸取對照品溶液5，10，15，20，25μl依次進(jìn)樣，在上述色譜條件下測定相應(yīng)的峰面積。以對照品進(jìn)樣量(μg)為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為:Y=8.795×106X-1.221×104，γ=0.9995。阿魏酸在0.1～0.5μg間呈良好的線性關(guān)系。

2.2.3.5 精密度試驗(yàn) 精密吸取對照品溶液15μl重復(fù)進(jìn)樣6次，按上述色譜條件測定峰面積，結(jié)果RSD=0.53%，表明精密度良好。

2.2.3.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密吸取供試品溶液15μl，分別于0，2，4，8，12 h 按上述色譜條件測定峰面積 5 次，結(jié)果 RSD=1.78%，表明供試品溶液穩(wěn)定性良好。

2.2.3.7 回收率試驗(yàn) 精密吸取已知含量的樣品供試液適量，精密加入適量阿魏酸對照品溶液，依法進(jìn)樣測定，結(jié)果扣除樣品中阿魏酸量，得平均回收率為98.6%，RSD=1.04%(n=6)。

2.2.3.8 樣品測定 取3批養(yǎng)血生乳口服液樣品，按上述方法制備供試品溶液。取此供試品溶液各15μl，在上述色譜條件下分別進(jìn)樣測定3次。結(jié)果見表1。

表1 樣品含量測定結(jié)果(n=3)

3 臨床研究

3.1 臨床資料 凡正常住院自然分娩、妊娠足月、食欲良好、乳腺發(fā)育正常、無合并癥的初產(chǎn)婦，納入觀察對象。入選產(chǎn)婦共80例，隨機(jī)分為2組。養(yǎng)血生乳口服液組(藥物組)42例，平均年齡(22.5±2.2)歲，所產(chǎn)嬰兒體重(3254±303)g，孕期(39.8±1.1)周;對照組38例，平均年齡(22.4±2.2)歲，所產(chǎn)嬰兒體重(3294±355)g，孕期(39.7±1.1)周。2組產(chǎn)婦的年齡、所生嬰兒體重及孕期，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3.2 觀察方法 藥物組產(chǎn)婦于產(chǎn)后6 h開始服用養(yǎng)血生乳口服液，每次10 m l，3次/d，連服5 d;對照組同法服用空白口服液(內(nèi)含10%蔗糖，其外觀形狀、色澤與養(yǎng)血生乳口服液相近)。各組均不使用對本研究有干擾的藥物，如鹽酸甲氧氯普胺和催乳中藥等。

3.3 觀察項(xiàng)目和結(jié)果

3.3.1 泌乳率 于產(chǎn)后第2天觀察各組產(chǎn)婦的乳汁分泌情況，統(tǒng)計(jì)有乳汁分泌的人數(shù)，計(jì)算泌乳率。

3.3.2 缺乳率 以產(chǎn)婦產(chǎn)后乳汁分泌量足夠嬰兒哺食，不需人工補(bǔ)加代乳品者為正常;以產(chǎn)后乳汁分泌量不能滿足嬰兒需要或無乳汁分泌，需人工補(bǔ)加部分或全部代乳品者為缺乳。觀察產(chǎn)后第5天的缺乳率。

3.3.3 日泌乳量 于產(chǎn)后第5天清晨去盡宿乳，每隔2 h喂奶1次，日間12 h共哺乳6次，每次哺乳前后稱量嬰兒體重，以其差值的總和為日泌乳量。

結(jié)果表明，藥物組產(chǎn)婦產(chǎn)后第2天的泌乳率明顯高于對照組(P＜0.05)，而產(chǎn)后第5天的缺乳率明顯低于對照組(P＜0.01)，產(chǎn)后第5天的日泌乳量明顯高于對照組(P＜0.01)。見表2。

表2 養(yǎng)血生乳口服液對產(chǎn)后乳汁分泌的影響(x±s)

4 討論

祖國醫(yī)學(xué)在防治產(chǎn)后乳汁分泌不足方面有悠久的歷史，認(rèn)為其病因是氣血虛弱或經(jīng)脈阻滯所致，治療方法是補(bǔ)氣養(yǎng)血、活血通絡(luò)。我們根據(jù)中醫(yī)學(xué)產(chǎn)后“多虛多瘀”的理論，采用黑芝麻、黨參、大棗等補(bǔ)養(yǎng)氣血，益母草、當(dāng)歸等活血通經(jīng)，經(jīng)水提醇沉工藝加工制成養(yǎng)血生乳口服液，并采用顯色反應(yīng)、薄層確認(rèn)和高效液相色譜法來控制制劑的內(nèi)在質(zhì)量，方法簡便、可靠。經(jīng)藥理研究表明，本品具明顯促進(jìn)乳汁分泌和補(bǔ)血等作用［3］。本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步通過對80例正常產(chǎn)婦臨床觀察表明，養(yǎng)血生乳口服液能促進(jìn)產(chǎn)婦產(chǎn)后迅速泌乳，顯著提高其日泌乳量，是一種預(yù)防產(chǎn)后乳汁分泌不足的理想制劑。

［1］ 國家藥典委員會.中國藥典(一部).北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2005:附錄 31-32．

［2］ 楊凱，嚴(yán)紅.高效液相色譜法測定補(bǔ)氣養(yǎng)血注射液中阿魏酸含量. 中成藥，1993，15(7):17-18．

［3］ 陳濤，李文勝，張春梅.養(yǎng)血生乳口服液促進(jìn)產(chǎn)后乳汁分泌的實(shí)驗(yàn)研究.中國中醫(yī)藥科技，1995，2(2):16-17．