郭英慧 喬明琦
山東中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,濟(jì)南 250355
調(diào)肝方藥對(duì)郁怒大鼠模型海馬腦區(qū)基因譜的影響
郭英慧 喬明琦
山東中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,濟(jì)南 250355
目的:在基因水平上借助基因芯片觀察調(diào)肝方藥經(jīng)前舒顆粒對(duì)郁怒反應(yīng)模型大鼠海馬腦區(qū)基因表達(dá)譜影響的作用靶點(diǎn)和機(jī)理。方法:采用社會(huì)隔離和居住入侵方法制備郁怒反應(yīng)大鼠模型,以正常組大鼠作為對(duì)照,以調(diào)肝方藥經(jīng)前舒顆粒干預(yù),分別取正常組、郁怒反應(yīng)模型組(郁模組)和經(jīng)前舒顆粒組(用藥組)大鼠海馬腦區(qū)組織。提取組織總RNA,進(jìn)行探針制備與芯片雜交掃描,利用Affymetrix Rat Genome 230 2.0大鼠芯片進(jìn)行基因芯片檢測(cè),在進(jìn)行數(shù)據(jù)提取和差異表達(dá)基因篩選基礎(chǔ)上,利用KEGG、Gen MApp、NCBI Gene-bank和Gene Ontology等公共數(shù)據(jù)庫(kù)或軟件對(duì)差異表達(dá)基因進(jìn)行功能歸類檢索分析。并用RT-PCR方法對(duì)差異表達(dá)基因Htr3b進(jìn)行擴(kuò)增驗(yàn)證。結(jié)果:與正常組相比,用藥組/郁模組共檢出127個(gè)不同差異表達(dá)基因,其中郁模組/正常組上調(diào)而用藥組/正常組基因下調(diào)基因有55個(gè),郁模組/正常組下調(diào)而用藥組/正常組基因上調(diào)基因有72個(gè),主要有各類激素受體、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白、代謝酶、離子通道蛋白、轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、細(xì)胞因子受體等,與80條調(diào)控路徑有關(guān)。差異表達(dá)基因Htr3b的RT-PCR驗(yàn)證結(jié)果與芯片數(shù)據(jù)表達(dá)的趨勢(shì)一致。結(jié)論:經(jīng)前舒顆粒通過(guò)上調(diào)或下調(diào)某些差異基因表達(dá)及調(diào)節(jié)神經(jīng)活化配體—受體交互作用等調(diào)控路徑,可在一定程度上緩解郁怒反應(yīng),為探討經(jīng)前舒顆粒的藥物作用靶點(diǎn)和機(jī)理提供了方向和線索。