亓國(guó)鋒

白術(shù)黃芪湯用于瀉痢恢復(fù)期的治療[1]。潰瘍性結(jié)腸炎屬中醫(yī)瀉痢等范疇，病程遷延時(shí)間較長(zhǎng)[2]。本實(shí)驗(yàn)使用三硝基苯磺酸致小鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型，觀察白術(shù)黃芪湯單藥提取成分組方對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎小鼠的療效，現(xiàn)將結(jié)果匯報(bào)如下。

1 材料

1.1 動(dòng)物 NIH雄性小鼠，SPF級(jí)，購(gòu)自上海BK公司，月齡4～5周，體重大約25～30g。各組小鼠進(jìn)行單籠飼養(yǎng)。

1.2 試劑及藥物 菊科植物白術(shù)(Atractylodes， rocephala Koidz.)的根莖、豆科植物蒙古黃芪(Astragalus mongholicus Bge.)的根。白術(shù)黃芪湯按原方比例白術(shù)（體積比）：藥材與蒸餾水比例為1：8，黃芪：甘草=10：7：3，按此比例浸泡4h，煮沸后，用紗布過濾藥液；第2次和第3次分別按照1：6和1：4的比例煮沸，紗布過濾，合并3次濾液。本實(shí)驗(yàn)按此比例將中藥各成分加蒸餾水混勻研磨配成所需濃度。所用原材料中三硝基苯磺酸(TNBS)，十六烷基三甲基溴化胺和鄰聯(lián)二茴香胺由Sigma公司提供。戊巴比妥鈉和無水乙醇為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.3 儀器 紫外可見光分光光度計(jì)、D型水浴鍋、電子分析天平、電熱恒溫真空干燥箱。

2 方法

2.1 動(dòng)物造模、分組及給藥 40只雄性小鼠，禁食24h后，使用1%戊巴比妥鈉（45mg／kg）進(jìn)行腹腔注射麻醉。隨機(jī)分為4組，為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、白術(shù)黃芪湯組、有效成分組。動(dòng)物肛門注入TNBS藥液（劑量為100mg／kg），倒立30秒使藥液達(dá)全結(jié)腸，將動(dòng)物放回原籠待其自然蘇醒。其中，正常對(duì)照組首先注入等量的50%乙醇，造模24h后開始灌胃給藥。正常對(duì)照組和模型對(duì)照組灌蒸餾水；白術(shù)黃芪湯組灌水煎劑（10g／kg），有效成分組灌提取物（0.4g／kg），每天一次，連續(xù)7天。

2.2 MPO活性檢測(cè):各組小鼠分別取100mg結(jié)腸組織并切碎，置入2mL十六烷基三甲基溴化胺(HTAB)緩沖液中，冰浴中勻漿3次，每次30 S，超聲振蕩10S，凍溶3次，4000 r／min離心15min，取上清液0.1mL，加入50mmol／L的PBS2.9mL中于460 nm處測(cè)吸光率A值，于3min后再次測(cè)定吸光率A值。該樣品的MPO單位即兩次A值差值除以3。

3 結(jié)果

各組MPO活性比較。模型組小鼠MPO活性較正常組明顯升高，白術(shù)黃芪湯組和有效成分組與模型組比較MPO活性明顯降低(P＜0.01)，有效成分組效果略優(yōu)。

注：**:與正常組相比，模型組MOP活性明顯升高，P＜0.01，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。##:與模型組相比，MOP活性明顯降低，P＜0.01，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

4 討論

潰瘍性結(jié)腸炎以急性發(fā)作的患者為多見，病初邪實(shí)，濕熱蘊(yùn)結(jié)腸腑；病程較長(zhǎng)，反復(fù)發(fā)作，形成虛實(shí)夾雜證，虛為脾虛血虧，實(shí)為濕熱留戀，腸絡(luò)瘀阻[3]?！毒霸廊珪ば篂a》曰：“泄瀉之本，無不由于脾胃……脾胃受傷，則水反為濕，谷反為滯，而瀉痢作矣”。在中醫(yī)學(xué)上，脾虛濕勝在發(fā)病及病變過程中有著至關(guān)重要的地位，因此，在潰瘍性結(jié)腸炎特別是恢復(fù)期的治療中，益氣健脾利濕等治法自然是重中之重的治療方法[4]。在瀉痢治療中，下列療法充分體現(xiàn)了“泄瀉之本，無不由脾胃”的中醫(yī)理論：治療濕熱毒邪郁蒸腸道而致的下痢，瀉痢去除后服白術(shù)黃芪湯健脾利濕，益氣補(bǔ)中[5]。

本實(shí)驗(yàn)中，TNBS所致的小鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型組小鼠MPO活性較正常組明顯升高。與模型組相比，白術(shù)黃芪湯組和有效成分組MPO活性明顯降低(P＜0.01)，而有效成分組效果略優(yōu)。從藥材提取有效組分是中藥現(xiàn)代研究的常用方法，但其中需要探討的問題仍然很多，這是需要我們以后進(jìn)一步學(xué)習(xí)的方向。

[1]李茹柳,遲莉,石忠峰.白術(shù)黃芪湯及其單藥提取成分組方對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎的治療作用[J].2007,21(3):223-228.

[2]孫洪鳳，李云峰.中藥氧灌腸治療潰瘍性結(jié)腸炎[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2010，16（25）：146-147.

[3]陳江.潰瘍性結(jié)腸炎中醫(yī)病機(jī)演變特點(diǎn)探析[J].遼寧中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2005,7(3):197.

[4]石忠峰,陳慰文,李茹柳,等.白術(shù)黃芪湯及其有效成分組方對(duì)小鼠潰瘍性結(jié)腸炎的療效觀察[J].中藥新藥與臨床藥理，2007,18(2):87-89.

[5]Shi ZF, Chen WW, Li WM, Gao Y.Purification on total astragalosides by macroporous adsorptive resin[J].Chin Tradit Herb Drugs (中草藥), 2005, 36(9): 1322-1325.