葛懷娥 臧春霞 白希永 崔海濱 耿翠芝

基于不同的臨床行為、分子表型和基因表達(dá)，反映出乳腺癌是一種異質(zhì)性疾病。它是一大類包含不同發(fā)病特點(diǎn)、治療決策和預(yù)后的疾病。據(jù)統(tǒng)計(jì)約有14%的乳腺癌因鉬靶X線表現(xiàn)為陰性［1］，進(jìn)而延誤診治，影響患者預(yù)后。截至目前，國內(nèi)外對鉬靶X線假陰性乳腺癌的相關(guān)研究較少。本文用免疫組化SP法檢測腫瘤組織中C-erbB-2和雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)，并回顧性分析了鉬靶X線假陰性和陽性乳腺癌患者的差異，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 循序選取2006年1至4月因乳腺癌在河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院和河北省滄州市中心醫(yī)院外科進(jìn)行治療的患者183例，均為女性，年齡18～75歲，中位年齡46歲。術(shù)前行雙乳鉬靶X線攝片，術(shù)后經(jīng)病理證實(shí)為原發(fā)性乳腺癌。根據(jù)乳腺癌鉬靶X線的直接和間接征象確診為乳腺癌148例(陽性組)，TNM分期:Ⅰ期122例，Ⅱ期22例，Ⅲ期2例，Ⅳ期2例;鉬靶X線診斷為乳腺增生或無異常者35例(假陰性組)，TNM分期:Ⅰ期5例，Ⅱ期27例，Ⅲ期2例，Ⅳ期1例。病理組織學(xué)類型:假陰性組浸潤性導(dǎo)管癌和浸潤性小葉癌分別為51.52%(18/35)和 21.21%(7/35)，陽性組為 61.64%(91/148)和34.25%(51/148)，所有患者均有完整的臨床、病理資料，并檢測C-erbB-2、ER、PR表達(dá)。

1.2 方法 常規(guī)軸位與斜位投照，斜位時(shí)包括胸肌及腋窩部乳腺組織，壓力適中，必要時(shí)局部加壓放大攝影，全部乳腺鉬靶X線片由三位專門從事乳腺影像診斷的醫(yī)師盲法閱片，寫出診斷報(bào)告。

1.3 免疫組織化學(xué)染色和結(jié)果判定

1.3.1 免疫組織化學(xué)染色:選取183例存檔組織蠟塊，各制備5μm連續(xù)性切片5張，分別用C-erbB-2、ER、PR單克隆抗體進(jìn)行相應(yīng)免疫組織化學(xué)染色，采用SP法。嚴(yán)格按試劑盒操作步驟進(jìn)行。陽性對照采用已知的陽性切片，陰性對照采用PBS代替一抗。試劑均購自北京中杉生物技術(shù)有限公司。所有切片均經(jīng)有經(jīng)驗(yàn)的病理醫(yī)師在不了解臨床資料的情況下獨(dú)立閱片。

1.3.2 結(jié)果判定:高倍鏡下觀察，細(xì)胞內(nèi)染色為棕黃色顆粒的為陽性細(xì)胞，C-erbB-2陽性部位為細(xì)胞膜，ER和PR陽性部位為細(xì)胞核。以陽性細(xì)胞數(shù)占病變部位細(xì)胞總數(shù)的百分比為判斷標(biāo)準(zhǔn)。ER和PR:(-)陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)＜10%;(+)陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)11% ～50%;(++)陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)51% ～75%;(+++)陽性細(xì)胞計(jì)數(shù) ＞75%(圖1、2)。C-erbB-2:(-)陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)＜10%(+);陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)11% ～30%;(++)陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)31% ～50%;(+++)陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)＞50%(圖3)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)和Fishers精確概率法，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ER 假陰性組ER陽性表達(dá)率40%(14/35);陽性組67.57%(100/148)，2組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=9.158，P＜0.01)。見表1。

2.2 PR 假陰性組PR陽性表達(dá)率62.86%(22/35)，陽性組PR陽性表達(dá)率57.43%(85/148)，2組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.343，P＞0.05)。見表1。

圖1 乳腺浸潤性導(dǎo)管癌ER+(SP×200)

圖2 乳腺浸潤性導(dǎo)管癌PR+(SP×200)

圖3 乳腺浸潤性癌C-erbB-2++(SP×400)

2.3 C-erbB-2 假陰性組陽性表達(dá)率25.71%(9/35);陽性組陽性表達(dá)率51.35%(76/148)，2組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=7.479，P＜0.01)。見表1。

表1 鉬靶X線假陰性與陽性患者C-erbB-2、ER、PR比較n=183，例(%)

3 討論

乳腺是ER、PR的靶器官，ER、PR屬于核受體超家族中的甾體激素受體，是調(diào)節(jié)性器官細(xì)胞生長發(fā)育的ER和PR，在正常乳腺上皮細(xì)胞的胞核內(nèi)均含有雌二醇受體和PR，乳腺癌細(xì)胞仍保留對ER、PR的表達(dá)。很多研究顯示乳腺癌細(xì)胞分化程度高，惡性程度低，其ER、PR的陽性表達(dá)高，內(nèi)分泌治療效果較好，預(yù)后較好。ER、PR的免疫組化測定，對于預(yù)后的判斷及指導(dǎo)治療有著重要意義。

研究顯示，ER在乳腺癌治療方面具有重要意義，ER陰性表達(dá)的腫瘤惡性程度高，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的可能性大，預(yù)后差［2-5］。王志震［6］報(bào)道假陰性組ER陽性表達(dá)率低。本組資料結(jié)果與之相符。有學(xué)者認(rèn)為，癌腫毛刺狀邊緣與癌細(xì)胞ER陽性表達(dá)之間呈正相關(guān)［7，8］。ER陽性表達(dá)率低的鉬靶X線假陰性癌灶周圍缺乏毛刺征，不易診斷，所以常常表現(xiàn)為陰性。另外，ER陽性表達(dá)率低提示鉬靶X線假陰性乳腺癌內(nèi)分泌治療不敏感，預(yù)后較差。

C-erbB-2是原癌基因，主要在胚胎發(fā)育時(shí)期表達(dá)，它位于17號(hào)染色體長臂，編碼糖蛋白，分子量為185 KD，成年后在正常組織中呈極少量表達(dá)，當(dāng)C-erbB-2高表達(dá)時(shí)，表示細(xì)胞增殖旺盛，侵襲力強(qiáng)。它參與調(diào)控細(xì)胞生長、增殖及腫瘤細(xì)胞分化，其產(chǎn)物過度表達(dá)提示惡性程度高，預(yù)后差，可作為獨(dú)立的預(yù)后指標(biāo)［2，9，10］。

C-erbB-2具有細(xì)胞內(nèi)酪氨酸激酶樣活性，在胚胎發(fā)育形成及上皮分化中有一定的作用，在人類組織的上皮細(xì)胞中有廣泛的表達(dá)。它在乳腺、卵巢、肺、前列腺、子宮內(nèi)膜等腫瘤的病理發(fā)生中有重要作用，它同乳腺癌的生成及演變有關(guān)系。在病理狀態(tài)下，細(xì)胞內(nèi)酪氨酸激酶的蛋白活化增強(qiáng)，酪氨酸激酶自身磷酸化，信息通道活性提高，激活基因，使C-erbB-2在細(xì)胞膜過度表達(dá)，加速了細(xì)胞的增殖，導(dǎo)致腫瘤形成和增長加快。乳腺癌中C-erbB-2的陽性率文獻(xiàn)中各家報(bào)道差異較大，10% ～75%不等。本組資料中，假陰性組C-erbB-2表達(dá)強(qiáng)陽性率明顯低于陽性組，二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。提示鉬靶X線假陰性乳腺癌患者進(jìn)行赫賽汀靶向治療的機(jī)會(huì)較少。

目前臨床公認(rèn)三陰乳腺癌由于缺乏內(nèi)分泌治療及特異性靶向治療而預(yù)后不良，適用于化療。本組資料顯示鉬靶X線假陰性乳腺癌患者ER陽性表達(dá)率低，C-erbB-2表達(dá)強(qiáng)陽性率明顯低于陽性組，是否也提示鉬靶X線假陰性乳腺癌患者預(yù)后不良，有待進(jìn)一步循證醫(yī)學(xué)研究證實(shí)。

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