張彥霞,喬海霞,單永強,劉文娟,劉佐霞,康 蒙
(1.河北北方學院病原生物研究所,河北 張家口075000;2.河北北方學院醫(yī)學檢驗系2007級,河北 張家口075000)
景天三七 (Sedum aizoon L.)為景天科景天屬植物,別名土三七、費菜、血散、養(yǎng)心草、吐血草,中醫(yī)認為景天三七有散瘀止痛、補氣攝血的功效,故常用于治療跌打損傷、創(chuàng)傷出血、吐血、產后血氣痛等.本品還可防治心臟病、高血壓、高血脂、血管硬化,用鮮全草燉豬心可治療神經衰弱、失眠、煩躁不安等[1-3].有報道顯示景天三七水煎劑對金黃色葡萄球菌和綠膿桿菌均有抑制作用[4],但景天三七醇提物的抑菌作用未見報道,因此對景天三七醇提物的抑菌作用進行了初步研究.
野生土三七采自河北省張家口市區(qū),黃連購自張家口市中醫(yī)院.
標準菌株:金黃色葡萄球菌,表皮葡萄球菌,微球菌,大腸埃希菌,乙型副傷寒沙門菌,銅綠假單胞菌,痢疾志賀菌,奇異變形桿菌,產氣桿菌,枯草芽胞桿菌,炭疽桿菌,近平滑念珠菌,熱帶念珠菌,白色念珠菌,均購自北京生物制品檢定所.
1.3.1 液體培養(yǎng)基:Mueller-Hinton (MH)肉湯
1.3.2 固體培養(yǎng)基:Mueller-Hinton(MH)瓊脂,沙氏培養(yǎng)基
721分光光度計,37℃培養(yǎng)箱,高壓蒸汽滅菌器,超凈工作臺.
參照陳奇的方法[5]進行,濃縮成含生藥1 g/m L的藥液,滅菌后備用.
2.2.1 0.5麥氏比濁比濁管配置:操作參考醫(yī)學微生物學實驗指導[6].
2.2.2 景天三七菌液制備:將實驗所用14種菌的培養(yǎng)物 (菌落)用無菌生理鹽水制成菌液,濃度相當于0.5麥氏比濁.配成比濁液相當于5×(107~108CFU/m L).
稀釋法:取無菌小試管5支作為一組,第一管加無菌肉湯0.4 m L其余五管加肉湯0.5 m L,再依次加藥液,第一管和第二管加藥液0.5 m L,從第二管開始倍比稀釋.然后第二至第五支試管各加肉湯0.4 m L,同樣方法制備14組試管.每組試管景天三七醇提物的最終稀釋度依次為:0.5 g/m L,0.25 g/m L,0.125 g/m L,0.0625 g/m L,0.03125 g/m L.實驗時將14種實驗菌液分別加入14組含藥液培養(yǎng)基的試管中,每管0.1 m L菌液,同時設培養(yǎng)基、藥液和菌液對照管.所有試管放置溫箱內37℃,培養(yǎng)24 h后觀察結果,在對照管符合要求的情況下,將各實驗管的培養(yǎng)物接種至相應培養(yǎng)基的瓊脂平板上,確定是否有細菌生長.37℃,24 h觀察結果,以瓊脂平板上完全無細菌生長的藥物最高稀釋度為最低抑菌濃度(MIC).
表1 黃連對金黃色葡萄球菌和大腸大腸埃希菌的最低抑菌濃度 (MIC)
表2 景天三七醇提物對14種菌的最低抑菌濃度 (MIC)
表1結果顯示:黃連對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌最低抑菌濃度分別為0.125 g/m L、0.5 g/m L,重復實驗,結果一致.
表2結果顯示:景天三七醇提物對球菌的抑菌效果強于桿菌.對無芽孢細菌的抑菌作用強于有芽孢細菌.對真菌的抑菌作用較弱,對熱帶念珠菌,白色念珠菌,近平滑念珠菌的MIC均大于0.5 g/m L.
實驗結果表明景天三七醇提物有體外抗菌作用,對金黃色葡萄球菌,表皮葡萄球菌,微球菌的MIC為0.125 g/m L,與對照黃連的最低抑菌濃度相同,提示景天三七可能在治療一般化膿性炎癥和腸道傳染病等方面有一定應用價值.
本次實驗預示了此藥可能具有廣泛的臨床應用前景,特別是耐藥患者,在使用大量抗生素后產生耐藥性菌株,是否可以聯(lián)合此藥來進行有效的治療?若配伍使用,利用藥物間的協(xié)同作用,還將增強其抗菌作用,是否可用于臨床抗感染治療有待于進一步研究.
本實驗在體外進行,在體內能否達到有效抗菌濃度,控制感染,有待繼續(xù)探討.
[1] 謝宗萬.中藥材品種論述 [M].第2版 (上冊).上海:上海科學技術出版社.1989:79-80
[2] 林水金.心臟病患者的良藥-費菜 [J].中國花卉盆景,1997,(11):6
[3] 陳偉超.新鮮景天三七治療中風 [J].中國民間療法,2000,8(09):46
[4] 譚蘋,姚麗芳,彭承秀.40種秦嶺 “七藥”最低抑菌濃度的測定 [J].時珍國醫(yī)國藥,2001,12(06):484-485
[5] 陳奇主編.中藥藥理研究方法學 [J].北京:人民衛(wèi)生出版社,1993:67-261
[6] 張玉妥,季建軍.醫(yī)學微生物學實驗指導 [M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2004:42