徐曉弘，熊 鑫

大慶油田總醫(yī)院藥學(xué)部，黑龍江大慶 163001

冠脈寧顆粒由丹參、葛根、血竭、冰片等14味藥材組合而成，具有活血化瘀，行氣止痛。用于以胸部刺痛、固定不移、心悸不寧、入夜更甚、舌質(zhì)紫暗，脈沉弦為主癥的冠心病、心絞痛、冠狀動(dòng)脈供血不足[1]。冠脈寧片處方收載于《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·中藥成方制劑》。本次實(shí)驗(yàn)依據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)并結(jié)合復(fù)方中主藥的特點(diǎn)，用薄層色譜法對(duì)丹參、葛根、當(dāng)歸、紅花進(jìn)行定性鑒別，從而更好地對(duì)“冠脈寧顆?！边M(jìn)行質(zhì)量控制。

1 試劑與試藥

1.1 試藥

丹參、葛根、當(dāng)歸、紅花（長(zhǎng)春宏檢藥材公司），對(duì)照品：人參皂苷Rb1、Rg1、三七皂苷R1、木犀草素（中國(guó)藥品生物制品檢定所）。

1.2 試劑

正丁醇、甲醇、磷酸、正己烷、乙酸乙酯、氯仿、乙醚。

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 性狀

本品呈顆粒狀，棕褐色；氣香，味微苦。

2.2 鑒定分析

薄層色譜法鑒別參照《中國(guó)藥典》（2005年版）一部項(xiàng)下薄層鑒別方法，并結(jié)合相關(guān)的文獻(xiàn)對(duì)丹參、當(dāng)歸、紅花、葛根進(jìn)行薄層鑒別，再對(duì)鑒別結(jié)果進(jìn)行定性分析。

2.2.1 薄層鑒別丹參 取本品5 g，研成細(xì)粉。加三氯甲烷50 ml，加熱回流1.5 h，濾過(guò)后藥渣備用，濾液蒸干，殘?jiān)右掖? ml使溶解、濾過(guò)，濾液作為供試品溶液。丹參在處方中為主藥，其有效成分丹參酮ⅡA含量直接影響藥效的發(fā)揮[2]。所以另取丹參酮ⅡA作為對(duì)照品，加入乙醇制成每1 ml含0.5 mg的丹參酮ⅡA對(duì)照品溶液。按照《中國(guó)藥典》（2005年版）一部附錄ⅥB薄層色譜法中薄層色譜法進(jìn)行試驗(yàn)，然后分別吸取4μl上述兩種溶液，在同一硅膠G薄層板上分別點(diǎn)樣，其中硅膠板的黏合劑是羧甲基纖維素鈉，展開劑為苯-乙酸乙酯，配制比例為19∶1，展開，晾干。結(jié)果顯示：在供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜斑點(diǎn)相應(yīng)的位置上，顯相同的暗紅色斑點(diǎn)。

2.2.2 薄層鑒別紅花 紅花具有活血通經(jīng)、祛瘀止痛等功效,其藥理作用主要表現(xiàn)為抗凝血、抗血栓[3]，研究結(jié)果亦有表明紅花具抑制炎癥反應(yīng)的作用。取本樣品3 g，加入80%的丙酮25 ml后，進(jìn)行30 min的超聲提取，濾過(guò)，濾液作為試驗(yàn)的供試品溶液并濃縮至5 ml。再取3 g紅花對(duì)照藥材細(xì)粉，同樣以80%的丙酮溶解并超聲30 min，所得濾液作為對(duì)照溶液。不含紅花藥材的陰性對(duì)照液也按處方的比例制得。按照《中國(guó)藥典》（2005年版）一部附錄ⅥB中薄層色譜法進(jìn)行試驗(yàn)，吸取對(duì)照藥材溶液、陰性對(duì)照液和三批供試品溶液各5μl，再統(tǒng)一用醋酸乙酯-甲酸-水-甲醇按 7∶2∶2∶0.4 的比例為展開劑的硅膠H薄層板上分別點(diǎn)樣，展開薄層板，晾干。結(jié)果：供試品色譜中，與對(duì)照品色譜相同位置上，顯出的斑點(diǎn)顏色是相同的，無(wú)陰性干擾。

2.2.3 薄層鑒別當(dāng)歸 當(dāng)歸主要成分含揮發(fā)油和水溶性物質(zhì)兩大類。揮發(fā)油中以藁本內(nèi)酯和正丁烯酉夫內(nèi)酯為主要成分[4]。取本品內(nèi)容物約4 g，研細(xì)后，加入石油醚（60~90℃）30 ml，經(jīng)過(guò)40 min的超聲處理后，濾過(guò)并蒸干濾液，用3 ml的無(wú)水乙醇將殘?jiān)芙?，作為供試品溶液。?duì)照品溶液的配制則另取5 g當(dāng)歸對(duì)照藥材，相同于供試品溶液的方法配制完成。按照《中國(guó)藥典》（2005年版）一部附錄ⅥB中薄層色譜法試驗(yàn)方法，對(duì)上述兩種溶液各吸取5μl，在同一硅膠G薄層板上點(diǎn)樣，展開劑以9∶1比例配制的正己烷-醋酸乙酯溶液，展開薄層板，晾干。結(jié)果：在365 nm的紫外燈下檢視，相應(yīng)于對(duì)照藥材色譜的位置上，供試品色譜顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)[5]。2.2.4葛根的薄層鑒別[6]取本品內(nèi)容物5 g，加甲醇50 ml，超聲提取45 min，濾過(guò)，蒸干濾液，用水25 ml加入將殘?jiān)芙?，濾過(guò)，用乙酸乙酯提取，每次20 ml，共提取5次。合并乙酸乙酯層，用無(wú)水硫酸鈉吸去多余水分，濾過(guò)，蒸干乙酸乙酯，殘?jiān)蛹状? ml使溶解，過(guò)濾，濾液作為供試品溶液。對(duì)照品溶液配制則用甲醇溶解葛根素對(duì)照品，制成每1 mg/ml的溶液。另取除葛根外的的陰性樣品粉5 g與等量的基質(zhì)混合進(jìn)行均勻，同法制得了陰性供試品溶液。分別吸取4μl上述對(duì)照品溶液、樣品及陰性溶液，再統(tǒng)一以氯仿-甲醇-乙酸乙酯-水按3∶3∶4∶0.8的比例為展開劑的硅膠G薄層板上分別點(diǎn)樣，展開薄層板，取出，晾干，置365 nm的紫外線燈下檢視，相同于對(duì)照品色譜位置上，供試品色譜顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。

3 討論

活血通絡(luò)片由丹參、沒藥（炒）、血竭、雞血藤、延胡索（醋制）、郁金、當(dāng)歸、制何首烏、桃仁（炒）等14味藥組成。以丹參為君藥，內(nèi)可以化臟腑之瘀滯，外可通經(jīng)而宣導(dǎo)氣機(jī)。臣藥雞血藤補(bǔ)血活血，疏通經(jīng)絡(luò)；延胡索、紅花活血化瘀，行氣止痛，血竭祛瘀定痛。佐用當(dāng)歸、何首烏和黃精補(bǔ)血生精，養(yǎng)心安神，體現(xiàn)標(biāo)本兼具之用[7]。本次試驗(yàn)采用薄層色譜法（TLC）對(duì)本制劑中的四味藥材丹參、當(dāng)歸、葛根、紅花進(jìn)行鑒別研究，對(duì)照實(shí)驗(yàn)均以四味藥材各自的藥材中相應(yīng)有效成分及陰性對(duì)照品進(jìn)行試驗(yàn)。經(jīng)過(guò)多次鑒別實(shí)驗(yàn)后，四種藥材實(shí)驗(yàn)測(cè)得的斑點(diǎn)均清晰可見，具有良好的重現(xiàn)性，且陰性無(wú)干擾。綜上，用薄層色譜法鑒別冠脈寧顆粒的實(shí)驗(yàn)具有操作簡(jiǎn)單、穩(wěn)定、重現(xiàn)性及專屬性都很強(qiáng)的特點(diǎn)，可作為此類中藥制劑質(zhì)量控制的定性依據(jù)，為今后標(biāo)準(zhǔn)的進(jìn)一步修訂提供了依據(jù)。

[1]張雪慧.HPLC法測(cè)定冠脈寧顆粒中丹參素鈉的含量[J].現(xiàn)代中醫(yī)藥,2008,28(1):60-61.

[2]賈艷寧,吳麗紅,張慶.復(fù)方丹參片中丹參提取工藝研究[J].黑龍江醫(yī)藥,2004,17(5):365-366.

[3]徐如英,童樹洪.紅花的化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J].綜述報(bào)告,2010,19(20):86-87.

[4]杜天璽,郭延生,華永麗,等.當(dāng)歸炭飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2010,21(9):2156-2158.

[5]中華人民共和國(guó)藥典委員會(huì).《中華人民共和國(guó)藥典》[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:103,109.

[6]劉紅霞,孫志坡,梁軍.冠脈寧軟膠囊薄層色譜鑒別研究[J].方藥縱橫,2007,34(3):343-344.

[7]劉萬(wàn)利.冠脈寧片治療心血瘀阻型胸痹療效觀察[J].中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用,2009,3(18):95-96.